首页 > 文献资料
-
基质金属蛋白酶抑制剂GM6001干预外伤性增生玻玻璃体视网膜病变的研究
目的 观察外伤性增生性玻璃体视网膜病变(tPVR)和外伤后应用GM6001的大鼠视网膜组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、TIMP-2在病程中的表达变化.评价GM6001干预tPVR的效果.设计 实验研究.研究对象 SD大鼠108只.方法 将大鼠随机分为生理盐水(实验对照)组、tPVR组和外伤后应用GM6001组.分别于外伤后1、3、7、14、21、28天(d)对各组大鼠视网膜组织MMP-2、MMP-9及TIMP-1、TIMP-2的表达进行Western印迹法检测.主要指标 大鼠视网膜组织MMP-2、MMP.9及TIMP-1、TIMP-2的表达情况.结果 Western印迹法结果显示大鼠视网膜中的MMP-2在tPVR组外伤后3、7、14、21、28 d表达显著增高;外伤后14、21、28 d,应用GM6001组MMP-2表达明显低于tPVR组.MMP-9在tPVR组各个亚组表达显著增高;外伤后1、3、7、14、21 d,应用GM6001组与tPVR组比较,MMP-9表达明显降低.tPVR组大鼠视网膜中的MMP-2/TIMP-2比值在14、21、28 d增高,在外伤后应用GM6001组明显低于tPVR组.MMP-9/TIWP-1比值在tPVR组各个亚组均增高,在外伤后应用GM6001组均明显低于tPVR组.结论 MMP-2与TIMP-2、MMP-9与TIMP-1失衡参与了tPVR发生发展的病理过程,GM6001可促进其动态平衡重新建立,在干预tPVR的发生发展中起重要作用.
-
基质金属蛋白酶抑制剂GM6001对肺炎链球菌性脑膜炎模型大鼠的脑保护作用
目的:探讨基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂GM6001对细菌性脑膜炎的脑保护作用.方法①短期治疗实验:大鼠小脑延髓池穿刺注入1μl肺炎链球菌菌悬液,制备脑膜炎模型;头孢曲松组大鼠造模后24h开始sc给予头孢曲松100mg·kg-1,共2d;头孢曲松+GM6001组大鼠制备模型后24hsc给予头孢曲松100mg·kg-1和ip给予GM6001 65mg·kg-1共2d;72h后观察症状表现,检测脑含水量,测定脑脊液MMP酶活性,并进行脑组织病理学检查.②长期治疗实脸:分组给药和造模同短期治疗实验,给药共14d;3周后行Morris水迷宫行为测试.结果:①短期治疗实验:与正常对照组相比,脑膜炎模型组,头孢曲松和头孢曲松+GM6001组大鼠症状评分明显增加,从0分别增加到(5.0±0.24),(2.1±0.52)和(1.3±0.23)分(P<0.01);与模型组相比,头孢曲松和头孢曲松+GM6001组相比症状明显减轻(P<0.01);与正常对照组相比,模型组、头孢曲松组和头孢曲松+GM6001组MMP-9酶活性也显著升高,从36±24分别升高到1264±98,602±48和405.8±59.8(P<0.01);与模型组相比,MMP-9酶活性头孢曲松组和头孢曲松+GM6001组显著降低(P<0.01).病理检查发现,模型组大鼠蛛网膜下腔明显扩张,充满大量炎性细胞,血管高度扩张充血,海马和皮质神经元均出现损伤表现;与模型组相比,头孢曲松组和头孢曲松+GM6001组MMP-9酶活性,海马神经元数目97±23分别增加到112±5和125±18(P<0.01),皮质神经元数目由129±21分别增加到142±8和157±24(P<0.01);脑组织含水量分别由(49.2±1.2)%下降到(48.6±0.8)%和(47.2±1.3)%(P<0.01).②长期治疗实验:与正常对照组相比,模型组Morris水迷宫行为测试大鼠到达平台时间由23±6延长到(49±9)s(P<0.01);与脑膜炎模型组相比,经头孢曲松和头孢曲松+GM6001长期治疗14d后,Morris水迷宫行为测试大鼠到达平台时间则从49±9明显缩短到33±8和(40±8)s(P<0.01).结论:基质金属蛋白酶抑制剂GM6001能减轻肺炎链球菌性脑膜炎脑组织的水肿,减少神经元死亡,提高大鼠空间记忆能力,具有神经保护作用.
-
基质金属蛋白酶抑制剂在滤过性手术中抗瘢痕作用的实验研究
目的:研究基质金属蛋白酶抑制剂GM6001对兔眼滤过性术后抗瘢痕作用.方法:取青紫蓝兔24只,双眼行小梁切除术.术后右眼结膜下注射GM6001,左眼注射PBS作为对照,术后测量眼压,观察结膜、角膜、前房、晶状体情况,记录功能性滤过泡数,并进行HE染色,光镜观察.结果:术后眼压较术前下降,术后各时间点实验组眼压均较对照组眼压低,且有显著性差异(P<0.01).术后未出现角膜水肿、晶状体混浊、浅前房等并发症,轻微的结膜充血和前房反应于术后7d基本消失且两组无明显差别.实验组较对照组功能性滤过泡形成率高.结论:GM6001具有抑制兔青光眼滤过术后滤过道中成纤维细胞过分增生,减少瘢痕形成的作用,延长了功能性滤过泡存活的时间.
关键词： 基质金属蛋白酶抑制剂 GM6001 滤过术 瘢痕 -
GM6001的玻璃体代谢及视网膜毒性作用的研究
目的:评价人工合成的金属蛋白酶抑制剂GM6001在玻璃体中的代谢及其眼内安全性.方法:选择健康成年的青紫蓝兔16只,随机分成4组,右眼分别玻璃体房注射GM6001各0.05 mL(A组100μmol、B组75μmol、C组50 μmol和D组25μmol).左眼分别注射PBS0.05 mL作为对照.各组术后不同时间取玻璃体样本,应用高效液相色谱分析仪检测其中GM6001的浓度.术前术后进行裂隙灯、间接检眼镜和视网膜电图(ERG)检查,后处死动物对视网膜进行光镜及透射电镜的检查.结果:术后前3 d,玻璃体房GM6001浓度下降迅速,而后保持缓慢降低至术后28 d完全清除.术后裂隙灯、间接检眼镜、ERG检查、视网膜光镜及透射电镜观察,各组均未发现异常改变.结论:GM6001在玻璃体房注射对视网膜是安全的.GM6001在单次玻璃体房注射后2 wk可维持有效浓度.
-
基质金属蛋白酶抑制剂GM6001在眼科疾病中的应用
GM6001是一种基质金属蛋白酶抑制剂,它可以抑制新生血管的生成.目前,GM6001在肿瘤疾病的治疗中得到了广泛应用,在治疗眼科新生血管性疾病也取得了很好的疗效.应用前景十分广阔.
关键词： GM6001 基质金属蛋白酶抑制剂 新生血管 -
GM6001在兔眼滤过性手术中抗瘢痕作用的实验研究
目的:研究基质金属蛋白酶抑制剂GM6001对兔眼滤过性术后抗瘢痕作用.方法:取青紫兰兔24只,双眼行小梁切除术.术后右眼结膜下注射GM6001,左眼注射PBS作为对照,术后测量眼压,观察结膜、角膜、前房、晶状体情况,通过免疫组化方法标记平滑肌肌动蛋白抗体a-SMA阳性细胞数,反映滤过道成纤维细胞增殖情况.结果:术后实验组较对照组眼压低,各时间点实验组α-SMA阳性细胞数均低于对照组(P<0.05),差别有统计学意义.结论:GM 6001具有抑制兔青光眼滤过术后滤过道中成纤维细胞过分增生,减少瘢痕形成的作用,延长了功能性滤过泡存活的时间.
-
基质金属蛋白酶抑制剂的研究
基质金属蛋白酶家族(MMPs)是细胞外基质(ECM)降解过程中的重要酶类,与多种病理过程尤其是细胞的侵袭和转移有重大关联.基于MMPs的种类、结构和作用方式,已经发现了多种抑制剂,均处于临床前或临床研究阶段.MMPs抑制剂正被开发为一种新型的抗血管生成剂,已成为研究的焦点.
-
GM6001对真菌性角膜炎角膜组织中基质金属蛋白酶-1表达和活性的影响
目的 检测兔真菌性角膜炎中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的表达,探讨MMP-1在真菌性角膜炎发病机制中的作用及其选择性抑制剂GM6001对其表达的影响.方法 75只新西兰大白兔随机分为3组:对照组、真菌性角膜炎组和GM6001治疗组.分别于接种真菌后12h,24h,4d,7d,14d,21d,28d用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测角膜组织中MMP-1 mRNA的表达.结果 对照组及12h时相兔角膜组织中,未检测到MMP-1 mRNA表达,24h时相检测到MMP-1 mRNA表达,与对照组比较,差异有显著性(P＜0.05).随时间延长,MMP-1 mRNA表达量逐渐升高,并持续至28d.自24h时相起,GM6001治疗组各时相兔角膜组织中MMP-1均有表达,但明显低于角膜炎组,差别有统计学意义(P＜0.05).结论 MMP-1与真菌性角膜炎组织溶解密切相关,GM6001对MMP-1的表达和活性有明显的抑制作用,进而抑制角膜组织的溶解.
-
MMPs抑制剂GM6001干预外伤性PVR的超微结构观察
目的 观察基质金属蛋白酶(MMPs)抑制剂GM6001干预外伤性增生性玻璃体视网膜病变(PVR)视网膜超微结构的改变.方法 取SD大鼠108只随机分为实验对照组36只、外伤性PVR组36只和GM6001干预组36只,应用透射电镜观察视网膜超微结构改变.结果 外伤性PVR组大鼠视网膜光感受器细胞、视网膜色素上皮(RPE)细胞、视网膜内外屏障受损,而应用GM6001干预组视网膜光感受器细胞外节膜盘结构尚清晰;RPE基底部质膜内褶较外伤性PVR组多,胞质中含大量线粒体、吞饮小泡和滑面内质网,部分线粒体嵴脱失;细胞连接清晰、规则.结论 MMPs抑制剂GM6001干预可保护视网膜组织结构,GM6001在干预外伤性PVR的发生发展中起重要作用.
关键词： 外伤性增生性玻璃体视网膜病变 GM6001 超微结构 视网膜 -
外源性基质金属蛋白酶抑制剂GM6001对FDM形成的抑制作用
目的 研究非特异性基质金属蛋白酶(MMPs)抑制剂GM6001对小鸡形觉剥夺性近视眼(FDM)形成的影响.方法 150只1 d龄来亨雏鸡采用半透明塑料眼罩单眼遮盖制备FDM动物模型,同时每日球后注射不同剂量GM6001连续4 d、14 d.检测眼轴长度及屈光度,观察后极部巩膜组织病理学变化及检测MMP-2蛋白质、酶活性及其mRNA的表达.结果 GM6001明显抑制遮盖4d眼FDM的形成,对遮盖14d眼仅部分抑制,对正常鸡无作用.GM6001干预后,遮盖14 d眼后极部巩膜组织病理学改变与FDM相似,后极部巩膜MMP-2表达显著降低,而遮盖4 d组均与正常小鸡眼相似.GM6001干预眼明胶酶谱图未检测到透亮带.GM6001对后极部巩膜MMP-2 mRNA表达无影响.结论 MMP-2活性增高为小鸡细胞外基质(ECM)后极部巩膜ECM重塑的关键因素之一.
-
GM6001预防dispase诱导的兔眼增生性玻璃体视网膜病变
目的评价金属蛋白酶抑制剂GM6001对dispase诱导的兔眼实验性增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的预防作用.方法健康成年的青紫蓝兔20只,采用dispase诱导的PVR动物模型,右眼玻璃体腔注射100μmol/L GM6001 0.05 ml,左眼注射PBS作为对照,共观察6周.采用PVR分级评分进行临床观察,流式细胞学方法检测玻璃体细胞增生,免疫组织化学方法标记抗增生核抗原(PCNA),判断视网膜细胞增生状况.结果GM6001组与对照组的PVR分级评分分别是1.19和2.54,差异有显著统计学意义(P＜0.05);GM6001组的玻璃体增生细胞数低于对照组(P＜0.05);GM6001组PCNA阳性率低于对照组(P＜0.05).结论GM6001玻璃体腔注射能抑制和延缓实验性PVR的发生.
关键词： GM6001 金属蛋白酶抑制剂 增生性玻璃体视网膜病变 -
GM6001对碱烧伤角膜组织中基质金属蛋白酶表达及活性的影响
目的检测正常和碱烧伤后不同时间角膜组织中明胶酶(MMP-2,MMP-9)和胶原酶(MMP-1)的表达,探讨在角膜融解发生中的作用.方法兔角膜碱烧伤20眼,分为对照组和GM6001治疗组,于伤后12、24、48、72 h,l、2周和1个月取材,酶谱法检测角膜组织中明胶酶MMP-2、MMP-9的表达,Western blot检测胶原酶MMP-1的表达.结果在正常兔角膜中,仅检测到微弱的明胶酶原MMP-2,碱烧伤后1周后开始明显升高,至烧伤后1个月维持较高水平,并在2周时出现MMP-2活性酶的表达,并持续至烧伤后1个月.明胶酶MMP-9在正常角膜组织中检测不到,但烧伤后24 h开始表达,于烧伤后1周达到高,然后逐渐下降,至伤后1个月已检测不到.胶原酶MMP-1在正常组织中检测为阴性,从伤后24 h开始升高,1个月内无下降.GM6001治疗组角膜组织MMP-2、MMP-9及MMP-1的表达均明显低于对照组.结论基质金属蛋白酶参与碱烧伤角膜组织的融解,GM6001可抑制MMPs的活性,进而抑制角膜融解的发生.
-
基质金属蛋白酶抑制剂GM6001抑制兔青光眼滤过性手术后瘢痕的形成
目的：探讨基质金属蛋白酶抑制剂GM6001在青光眼滤过术后滤过道瘢痕化中的作用。方法随机取青紫兰兔24只，双眼行抗青光眼小梁切除术，术后右眼结膜下注射GM6001作为实验组，左眼注射PBS作为对照组，1次/d，监测眼压，并通过免疫组化方法标记抗增殖细胞核抗原（PCNA）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA），观察滤过道成纤维细胞增殖情况。结果术后7，14，21，28 d，实验组较对照组眼压低，术后各时间点实验组PCNA和α-SMA阳性细胞数低于对照组，均具有显著性差异(P<0.01)。结论GM6001具有抑制兔眼滤过术后滤过道成纤维细胞过度增殖，减少瘢痕形成和延长功能性滤过泡存在时间的作用。
-
GM6001对激素性股骨头坏死大鼠组织形态学与基因表达的影响
目的 探讨静脉注射基质金属蛋白酶抑制剂GM6001对激素性股骨头坏死(SINFH)大鼠组织形态学与基因表达的影响.方法 60只健康SD大鼠,经臀肌注射甲基泼尼松后制备激素性股骨头坏死模型,随机分为SINFH组、低剂量GM6001(GM6001-L)组和高剂量GM6001(GM6001-H)组,每组20只,GM6001-L组与GM6001-H组在造模同时经尾静脉注射50 mg/kg GM6001与100 mg/kg GM6001,1周1次,共计8周.另选取20只健康SD大鼠于臀肌注射等量生理盐水作为对照,经12周、20周后,观察SD大鼠股骨头形态学改变,以及过氧化氢酶体增殖物激活受体γ(PPAPγ)、11β-羟基类固醇脱氧酶(11β-HSD1)、Run相关转录因子2(Runx2)与CCAAT区/增强子结合蛋白α(C/EBPα)的变化.结果 与对照组比较,造模组大鼠造模8周内的血清钙、磷水平降低;SINFH大鼠经GM6001治疗后8周内的血清钙、磷水平均显著升高,与SINFH组比较差异有统计学意义(P<0.05),且GM6001-H组血清钙、磷水平均高于GM6001-L组,差异有统计学意义(P<0.05);造模组大鼠造模8周内的BALP、StrACP水平显著高于对照组,BGP、CT水平显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);GM6001-L组与GM6001-H组经治疗后8周内的BALP、StrACP水平均显著低于SINFH组,BGP、CT水平均显著高于SINFH组,差异均有统计学意义(P<0.05);造模组大鼠造模8周内的股骨转子、股骨头的骨密度及股骨头成骨细胞计数均低于对照组,破骨细胞数高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);GM6001-L组与GM6001-H组经治疗后8周内的股骨转子、股骨头的骨密度及股骨头成骨细胞计数均高于SINFH组,破骨细胞计数低于SINFH组,差异均有统计学意义(P<0.05).应用GM6001治疗后,与SINFH组比较,PPAPγ、11β-HSD1、C/EBPα表达减少,Runx2表达升高,且随剂量增加,PPAPγ、11β-HSD1、C/EBPα下降明显,而Runx2上升明显,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 大鼠股骨头坏死改变可能与激素抑制成骨及成脂分化基因表达有关,与11β-HSD1表达关系密切,而GM6001能改善这种病理改变以及基因异常表达,具有良好的临床应用价值.
-
MMP-1、MMP-3、TIMP-1对外伤性PVR的影响研究
目的:观察外伤性PVR大鼠和外伤后应用人工合成基质金属蛋白酶抑制剂(GM6001)中大鼠视网膜组织MMP-1、MMP-3及TIMP-1在不同病程中的表达变化.方法:将180只SD大鼠随机分为正常对照组、外伤性PVR组和外伤后应用GM6001组.应用免疫组化法在不同时间对各组大鼠视网膜组织MMP-1、MMP-3及TIMP-1的表达进行定性、定位、半定量检测.结果:1)MMP-1、MMP-3、TIMP-1主要表达于视网膜组织的视锥视杆层、视网膜外网状层、视网膜内网状层、神经纤维层.2)各个亚组在正常对照组、外伤后应用 GM6001组MMP-1、MMP-3微弱表达.3)MMP-3在外伤性PVR组1,3,7d显著表达.MMP-1在外伤性PVR组3,7,14d显著表达(P<0.05).TIMP-1在外伤性PVR组与外伤后应用GM6001组的各个亚组均有明显表达(P<0.01).MMP-3/TIMP-1的比率在外伤性PVR组1,3,7d增高(P<0.05).MMP-1/TIMP-1的比率在外伤性PVR组3,7,14d增高(P<0.05).结论:MMP-1、MMP-3与PVR形成的病理过程有关,TIMP-1与二者特异性结合抑制其活性:GM6001通过调节MMP-1/TIMP-1和MMP-3/TIMP-1达到平衡,能抑制PVR的发生和发展,干预PVR的发展进程.
-
外伤性PVR大鼠视网膜中MMP-9、TIMP-1的表达及意义
目的:为研究外伤性PVR和外伤后应用GM6001干预大鼠视网膜组织MMP-9及TIMP-1、在不同病程中的表达变化.方法:360只SD大鼠随机分为正常对照组、外伤性PVR组和外伤后应用GM6001组.正常对照组玻璃体腔内注射生理盐水;外伤性PVR组玻璃体腔内注射PRP血浆制成外伤性PVR大鼠动物模型;外伤后应用GM6001组在外伤后12h玻璃体腔内注射GM6001.应用免疫组化染色方法分别于1,3,7,14,21,28d对各组大鼠视网膜组织MMP-9及TIMP-1的表达检测.结果:免疫组化结果示MMP-9、TIMP-1蛋白均主要表达于视锥视杆层、视网膜内外网状层、神经纤维层.MMP-9在正常对照组、外伤后应用GM6001组的各个亚组微弱表达.MMP-9在外伤性PVR组1,3,7d显著表达,与正常对照组和外伤后应用GM6001组的差异有显著性(P＜0.01),随着病程的延长,MMP-9的表达呈进行性减弱的趋势;TIMP-1在外伤性PVR组与外伤后应用GM6001组的各个亚组均有明显表达,与正常对照组的差异均有显著性(P＜0.01).MMP-9/TIMP-1比率在外伤性PVR组1,3.7d增高,与正常对照组和外伤后应用GM6001组的差异均有显著性(P＜0.05).结论:MMP-9、T1MP-1参与了PVR发生发展的病理过程,MMP-9/TIMP-1比率增高促进PVR发生发展的进程.人工合成基质金属蛋白酶抑制剂GM6001可促进MMP-9/TIMP-1动态平衡的重新建立,从而在外伤性PVR的防治中起重要作用.
