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鸟苷三磷酸酶活化蛋白Git2对乳腺癌转移的影响
目的：探讨鸟苷三磷酸（ GTP ）酶活化蛋白Git2与乳腺癌转移的关系。方法以Git2短发夹RNA慢病毒或Git2 cDNA分别对标记荧光素酶的乳腺癌细胞中Git2基因进行敲降或过表达，在雌性小鼠尾静脉或乳腺脂肪垫注射乳腺癌细胞建立乳腺癌转移模型，分析小鼠肿瘤的转移情况。结果4T1、4TO7、168FARN和67NR乳腺癌细胞中，Git2 mRNA的相对表达水平分别为0．91±0．03、0．125±0．06、0．131±0．04和0．92±0．04，其中内源性低表达Git2蛋白的168FARN细胞和4TO7细胞过表达Git2后，上皮间充质细胞转化分子标记物E?cadherin表达被抑制，N?cadherin及vimentin的表达升高；而内源性高表达 Git2蛋白的67NR细胞和4T1细胞敲降 Git2后， E?cadherin 的表达升高， N?cadherin和vimentin的表达降低。过表达Git2促进了4TO7细胞在肺中从微小转移发展为肿瘤转移灶；抑制Git2的表达使完全没有转移能力的67NR细胞获得向循环系统中内渗的能力，4T1细胞的转移灶克隆形成能力降低。敲降 Git2基因的4T1细胞（4T1?luc?KD 细胞）肺转移的光子数为（0．4±0．05）×106，低于对照组4T1?luc细胞[（3．0±0．04）×106]，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 Git2参与乳腺癌转移的启动和转移灶的克隆形成。
关键词： GTP酶激活蛋白质类 乳腺肿瘤 肿瘤转移 小鼠 Git2 -
胃癌组织中能量代谢相关基因的表达及甲基化与幽门螺杆菌的关系
目的 探讨幽门螺杆菌(Hp)感染与胃癌组织中能量代谢相关基因的表达及甲基化修饰的相关性.方法 选择贵州省肿瘤医院(原贵阳医学院附属医院肿瘤科)2005年1月至2009年12月经病理检查确诊的30例患者的胃癌组织、转移淋巴结组织及癌旁组织标本各30份,应用实时荧光定量反转录-PCR(RT-PCR)定量检测乳酸脱氢酶(LDH)、二氢硫辛酰胺脱氢酶(DLD)及Ran-特异性GTP酶活化蛋白(RanGAP)基因的表达量,并分析其与Hp感染的关系.用亚硫酸氢盐测序法(BSP)检测Hp感染细胞后LDH、DLD及RanGAP基因启动子区CpG岛甲基化修饰状态.结果 癌旁组织、胃癌组织及淋巴结组织中LDH基因的相对表达量分别是1.0,3.1和3.0,DLD基因分别是1.0,3.1和2.8,而RanGAP基因分别是1.0,0.4和0.5,差异均有统计学意义(均P＜0.05).胃癌组织中Hp感染组LDH、DLD和RanGAP基因的表达量高于无Hp感染组(2.3比1.0,3.0比1.0及2.6比1.0,均P＜0.05).Hp感染的胃癌细胞及高表达cagA基因的胃癌细胞中LDH基因启动子区-2325位点和DLD基因启动子区-1885位点发生去甲基化修饰,而RanGAP基因启动子区- 570位点和- 170位点发生高甲基化修饰.结论 Hp感染可能通过诱导LDH、DLD及anGAP基因启动子区发生异常甲基化而上调LDH、DLD基因及下调RanGAP基因的表达,从而参与胃癌的发生发展.
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GPSM2过表达对人胰腺癌细胞迁移能力的影响
目的:构建G蛋白信号调节蛋白2(GPSM2)稳定高表达的胰腺癌细胞株,探讨GPSM2与人胰腺癌细胞迁移能力的关系.方法:构建GPSM2基因过表达质粒(pCMV-Tag 3B-GPSM2)并鉴定,将人胰腺癌MIA-PaCa-2细胞分别转染pCMV-Tag 3B-GPSM2(GPSM2转染组)或pCMV-Tag 3B空载体(阴性对照组),以无处理的MIA-PaCa-2细胞为空白对照,用RT-PCR检测各组细胞GPSM2 mRNA表达;Western blot检测各组细胞GPSM2、β-连环蛋白(β-catenin)的表达;用Transwell实验检测各组胰腺癌细胞迁移能力.结果:成功构建了GPSM2稳定高表达的重组细胞株.与空白对照组比较,GPSM2转染组细胞GPSM2 mRNA表达量明显上调,达前者73.3倍、GPSM2、β-catenin蛋白表达量明显升高、迁移细胞计数明显增加(均P<0.05).此外,胰腺癌细胞中GPSM2与 β-catenin的表达水平呈明显的正向线性关系(P<0.05).阴性对照组与空白对照组间各指标的差异均无统计学意义(均P>0.05).结论:上调胰腺癌细胞中GPSM2的表达能增加胰腺癌细胞的迁移能力,该作用可能与 β-catenin蛋白表达升高有关.
关键词： 胰腺肿瘤 GTP酶激活蛋白质类 β连环素 细胞运动
