首页 > 文献资料
-
颈后肌受长期应力作用家兔血清CK和LDH含量观察
研究证实,肌肉损伤或慢性疼痛可以引起血清中一些与骨骼肌有关的酶的变化,这种酶活力的变化可以作为骨骼肌细胞膜通透性增加及细胞损伤的标志[1-2].血清肌酸激酶(CK)活性的变化可作为评定肌肉承受刺激和骨骼肌微细损伤及适应与恢复的敏感生化指标[3].乳酸脱氢酶(LDH)广泛存在于各组织器官中.
-
乳酸脱氢酶联合免疫细胞化学检测在恶性胸腔积液诊断中的价值
目的 探讨乳酸脱氢酶(LDH)联合免疫细胞化学检测在恶性胸腔积液诊断中的价值.方法 回顾性分析50例胸腔积液患者胸腔积液LDH检测浓度和细胞学标本分别做标记物癌胚抗原(CEA)、广谱细胞角蛋白(AE1/AE3)、钙视网膜蛋白(cahetinin)、间皮细胞(mesothelial cell)、波形蛋白(vimentin)、细胞增殖指数(Ki-67)免疫细胞化学染色.结果 癌症组LDH含量(850.60±126.58 U/L)显著高于对照组LDH含量(125.68 ±32.45 U/L),差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 LDH联合检测CEA、AE1/AE3、calretinin、MC、Vimentin、Ki-67的表达情况,有助于鉴别胸腔积液的良、恶性,还可以进一步确定恶性胸腔积液中恶性肿瘤细胞的类型,对患者治疗方案的选择及预后的判断具有重要的临床意义.
-
缺氧诱导因子1α、葡萄糖转运蛋白1和乳酸脱氢酶5在结直肠癌的表达及其意义
目的探讨缺氧诱导因子1α（ HIF-1α）、葡萄糖转运蛋白1（ GLUT-1）及乳酸脱氢酶5（LDH-5）在结直肠癌中的表达及其临床病理意义。方法采用免疫组织化学SP法检测142例结直肠癌组织及其癌旁组织中HIF-1α、GLUT-1及LDH-5蛋白的表达。结果 HIF-1α、GLUT-1及LDH-5在结直肠癌组织的表达率分别为78.2％（111／142）、75.4％（107／142）及68.3％（97／142），与癌旁组织的表达率（14.8％，21／142；11.3％，16／142；7.0％，10／142）比较，其差异均具有统计学意义（ P＜0.01）。结直肠癌组织中HIF-1α、GLUT-1及LDH-5的阳性表达率与淋巴结转移、肿瘤分化程度和病理分期有相关性（均P＜0.05）；结直肠癌中HIF-1α、GLUT-1和LDH-5的表达两两之间具有关联性，并且表达呈正相关（ P＜0.05）。结论联合检测HIF-1α、GLUT-1及LDH-5在结直肠癌的表达，可作为评估结直肠癌的发展、转移及预后重要指标。
-
国际酶学参考实验室室间比对四种酶学项目结果分析
目的：评估和分析中国酶学参考实验室参加国际临床化学委员会（ IFCC ）组织的参考实验室室间比对（ RELA）中γ-谷氨酰转移酶（ GGT）、乳酸脱氢酶（ LDH）、丙氨酸氨基转移酶（ ALT）及天冬氨酸氨基转移酶（ AST）的测定一致性及不确定度，反映中国参考实验室检测能力。方法收集2006年至2011年RELA结果发布网站上的所有参与GGT、LDH、ALT及AST比对实验室的测定值及合成不确定度，分为全体组（所有实验室，12～27家/年）、国外组（除中国实验室外的实验室，4～10家/年）、中国组（中国实验室，6～18家/年）和参考组（ Lab3， Gerhard Schumann ）四组，分年度及样品值高低水平统计分析，计算组内测定值的变异系数（ CV）、中国组及参考组测定值对国外组的偏倚及各组相对标准不确定度（ur），评价国内外实验室四种酶学项目RELA结果一致性以及ur 的变化趋势。结果各实验组四种酶高低两个水平样品CV值变化趋势一致，除LDH外，各组各项目高低两个水平样品CV值总体呈随年度递减趋势；全体组、国外组及中国组三组各项目测定值组内CV值除2006年ALT结果外，均在5％之内；六年的组内CV值数据中，中国组有87.5％（42/48）的情况低于国外组。除2006年GGT、ALT结果及2008年ALT结果外，中国组对国外组偏倚均在-2％～2％之间；2006年至2011年，中国组实验室测定值有75.0％（36/48）的结果低于国外组。2008年ALT高水平测定值均值中国组3.525μkat/L 低于国外组3.647μkat/L，差异有统计学意义（ T ＝2.635， P ＜0.05）。各实验组四种酶高低两个水平批次的ur 均呈上升趋势，各年度各实验组低水平均较高水平值高约10％。参考组ur稳定在1.2％，中国组在2007年至2009年ur低于国外组；中国组实验室在2009、2010、2011三年ur稳定在1.0％。结论中国参考实验室酶学项目测定值与国外实验室无统计学差异，参考实验室间一致性较好，相对标准不确定度结果客观且稳定。
-
校准方式与CK和LDH检测结果一致性
目的 应用酶学参考方法实验室网络赋值的人源冰冻血清做校准品,探求实现不同检测系统间检测结果一致性的途径,为实验室确定适合的项目校准方式提供参考方法.方法 量值溯源研究.由首都医科大学附属北京朝阳医院、北京航天总医院、首都医科大学附属北京世纪坛医院、中国医学科学院北京协和医院、北京利德曼生化股份有限公司、四川迈克生物科技股份有限公司6家实验室组成的酶学参考方法实验室网络使用国际临床化学和检验医学联合会(IFCC)推荐的磷酸肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)参考测量程序为新鲜冰冻混合人血清赋值,再用此赋值血清做统一的酶校准品,于2012年2月校准8套北京地区的单点校准模式的常规检测系统.每日校准程序校准各系统后顺序检测定值血清、原系统厂家校准品、质控品和患者样本;患者样本为北京市临床检验中心于2011年9月至11月收集的中国医学科学院阜外心血管病医院患者验后血清样本.再固定10日平均校准系数(以下简称:固定K均值),并用它替换每日校准系数,以固定K均值重新计算获得上述相应的结果,比较两者的室内精密度.计算患者样本校准前、后的均值、标准差、变异系数(CV)以及原系统校准品的偏移等统计学指标.结果 定值血清校准后,8台常规检测系统原系统校准品赋值的偏移有不同,CK、LDH各有2个校准品赋值偏移＞5％;患者样本CK结果系统问CV分别由3.78％和4.44％下降到0.74％和0.89％;LDH由4.11％和4.08％下降到1.08％和1.28％.每日校准与固定K均值两种校准方式比较结果显示:CK项目K值的CVs≤1.00％、LDH项目CVs≤2.50％的检测系统,各样本的系统内CVs分别小于1.50％和3.00％;且两种校准方式原系统校准品、质控品及患者样本的CV均没有明显差异;而对于CK项目K值CV＞ 1.00％、LDH项目CV＞2.50％的系统,系统内CV明显增大;并有系统显示,各样本固定K均值的CV较每日校准的CV明显增大.结论 使用参考方法实验室网络赋值的冰冻人源血清做统一的酶校准品,校准不同的单点校准模式的开放检测系统,可实现CK、LDH检测结果的一致性,并使结果溯源至参考方法.实验室应基于检测系统的稳定性确定适宜的校准方式.
-
地区性肌酸激酶及乳酸脱氢酶检测标准化途径设计与实施
目的 基于嘉兴市临床实验室现状设计适合此地区的肌酸激酶(CK)/乳酸脱氢酶(LDH)检测的标准化方案并实施,以减小检测结果的室间变异,保证检测结果的正确性及溯源性.方法 基于临床检验结果溯源性要求,于2012年10月至2013年2月期间,在嘉兴市6家医院,以国家一级标准物质GBW09167、GBW09168以及新鲜血清作为样本在嘉兴33家医院的临床实验室进行正确度验证以及室内不精密度调查;筛取其中6家室内不精密度(CV)小于2％的实验室,以血清基质标准物质GBW(E)091361作为校准品,GBW(E)091360作为正确度质量控制品,比较实施标准化前后检测结果的差异.结果 33家实验室中,31家实验室室内CV小于2％,肌酸激酶偏移为-7％～12％,乳酸脱氢酶偏移为-22％ ～ 15％.6家CV小于2％的实验室,标准化实施过程中,具统计意义的5家实验室血清样本检测结果如下:肌酸激酶室间变异由校准前的4.95％ ～6.55％降低到校准后的1.81％ ～2.33％,乳酸脱氢酶则由5.75％ ～ 11.68％降低到1.39％ ～ 1.80％;肌酸激酶的偏倚由校准前的-0.84％ ～6.23％降到-0.15％ ～2.44％;乳酸脱氢酶的偏倚由-10.18％ ～0.34％降低到校准后的-3.07％ ～0.58％.结论 基于实验室全面质量管理,以统一的校准方案,统一的具有互通性的标准物质作为校准品,可降低不同实验室室间检测结果的差异,提高检测准确性.
-
不同检测指标对早期筛查结核性胸膜炎粘连的价值
目的 分析不同检测指标对早期筛查结核性胸膜炎粘连的价值.方法 选取2015年3月至2017年3月深圳市第三人民医院确诊的病程超过1个月,但未进行规范抗结核药物治疗的134例结核性胸膜炎患者,按胸膜粘连情况分为无粘连组(32例)和粘连组(102例).对首次引流的胸腔积液和外周血进行常规生化检测[包括腺苷脱氨酶(ADA)、乳酸脱氢酶(LDH)、单核细胞百分比(MONO％)]、C反应蛋白(CPR)、血红细胞沉降率(ESR)、酶联免疫斑点检测(ELISPOT),以及CT扫描下测量胸腔积液厚度和胸膜厚度,并对CT测量结果进行分级评分.采用SPSS 17.0分析各项指标与结核性胸膜炎后期胸膜粘连的相关性,并采用Graphpad软件对有意义指标进行ROC曲线分析.结果 结核性胸膜炎患者胸膜粘连组中胸腔积液中MONO％[(68.36±30.72)％]、CRP[(51.21±34.95) mg/L]、ESR[(52.37±28.44) mm/1 h]、CT胸膜粘连评分[(6.76±6.03)分]、胸腔积液厚度[(33.50±16.65) mm]、胸膜厚度[(4.70±3.70) mm]、PBMC-ELISPOT-E6[(59.87±48.94) SFCs/孔]、PBMC-ELISPOT-peptide[(72.37±72.40) SFCs/孔]、PFMC-ELISPOT-E6 [(244.20±28.70)SFCs/孔]、PFMC-ELISPOT-peptide[(242.00±134.20) SFCs/孔]与无粘连组[分别为(83.37±12.63)％、(58.36±47.66) mg/L、(54.36±29.92) mm/1 h、(5.07±5.47)分、(28.85±21.30) mm、(3.60±3.00) mm、(60.71±64.52) SFCs/孔、(44.80±52.39) SFCs/孔、(203.10±174.70) SFCs/孔、(203.10±174.70) SFCs/孔]比较,差异均无统计学意义[t=1.882,P=0.067;t=0.520,P=0.604;t=0.511,P=0.826;t=0.943,P=0.352;t=2.352,P=0.022;t=0.584,P=0.571;t=0.400,P=0.691;t=1.310,P=0.197;t=0.914,P=0.373;t=0.720,P=0.372];仅ADA[(78.49±24.42) U/L]、LDH[(613.40±172.20) U/L]水平均高于无粘连组[分别为(49.64±18.98) U/L,(348.80±131.40) U/L](t=24.981、22.590,P值均＜0.001).对ADA、LDH值进行ROC曲线分析,两者在诊断结核性胸膜炎胸膜粘连时曲线下面积(95％CI值)、敏感度和特异度分别为0.84(0.76～0.93)、0.89(0.82～0.96),81.30％和81.82％、84.35和73.68％.结论 结核性胸膜炎胸腔积液中的ADA、LDH数值水平在无粘连组和粘连组中均有明显差异,可作为预测结核性胸膜炎后期是否发生粘连的重要指标.
-
夹竹桃麻素对兔心房电重构时氧化应激损伤保护作用的研究
目的 研究还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶抑制剂夹竹桃麻素(APO)对兔心房电重构引起氧化应激损伤的保护作用.方法 选择18只新西兰白兔,随机分为对照组、心房快速起搏(RAP)组和APO+RAP组,每组6只.术前3d,APO+ RAP组给予APO 30 mg/(kg·d)灌胃,对照组和RAP组术前生理盐水等体积灌胃.对照组术中未给予RAP,RAP组和APO+ RAP组术中以快能维持心房1∶1起搏频率(500～600/min)给予快速刺激3h.在完成电生理检查后,立即取出心脏并分离左、右心房和肺静脉,分别检测各组织超氧化物歧化酶( SOD)活性、乳酸脱氢酶(LDH)活性和钙含量.结果 与对照组比较,RAP组左、右心房、肺静脉SOD活性明显降低(P＜0.05),LDH活性和钙含量明显升高(P＜0.05),APO+ RAP组左、右心房、肺静脉SOD活性、LDH活性和钙含量比较,差异无统计学意义(P＞0.05).与RAP组比较,APO+ RAP组左、右心房、肺静脉SOD活性明显升高,左、右心房LDH活性明显降低(P＜0.05).对照组肺静脉钙含量明显高于左、右心房(P＜0.05).结论 心房颤动能够引起氧化应激损伤,APO能部分预防氧化应激损伤发生.
-
脑红蛋白在氧糖剥夺-复氧复糖诱导人神经母细胞瘤细胞线粒体膜电位去极化及活性氧生成中的作用
目的：探讨脑红蛋白（ NGB）在氧糖剥夺-复氧复糖诱导的人神经母细胞瘤细胞线粒体膜电位去极化及活性氧生成中的作用。方法在人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞中，使用慢病毒干扰NGB表达，建立NGB 表达敲减及相应的空载病毒稳转株。细胞行氧糖剥夺-复氧复糖处理。荧光实时定量PCR检测人神经母细胞瘤细胞NGB mRNA表达水平，免疫印迹检测人神经母细胞瘤细胞NGB蛋白表达水平。线粒体膜电位特异性染料JC-1染色，观察线粒体膜电位变化。 DCFH-DA染色，检测细胞内总活性氧水平。检测人神经母细胞瘤细胞释放乳酸脱氢酶（ LDH）活性。结果氧糖剥夺-复氧复糖后，NGB mRNA及蛋白水平升高，分别于4 h和8 h达高峰（2.04±0.35，1.69±0.18）。 NGB转染干扰NGB慢病毒较转染空载病毒线粒体膜电位去极化水平降低[荧光比值（ JC-1红色／绿色比值）1.10±0.10比1.46±0.11，P＜0.05]，总活性氧产生增多[（36.30±5.32）荧光强度／细胞比（16.26±2.97）荧光强度／细胞， P ＜0.05]，且 LDH 释放增多[（63.42±6.14）％比（49.65±5.09）％，P＜0.05]。结论 NGB对维持线粒体稳态起重要作用。干扰NGB表达可导致细胞在缺血缺氧状况下线粒体损伤加重，活性氧释放增多，细胞损伤加重。
-
恶性疟疾40例临床表现与血液生化学分析
疟疾是由疟原虫经按蚊叮咬传播的寄生虫病,其与艾滋病、结核病一起被认为是全球重要的三大公共卫生问题.本病因疟原虫虫株、感染程度、机体免疫状况和反应性等差异,临床症状和发作规律表现不一.恶性疟疾是疟疾中较少见的一种,发热常不规则,变化迅速,病情严重,并可引起脑型疟疾、溶血性尿毒综合征等[1].目前,许多医务工作者对恶性疟疾的诊断和治疗经验不足,极易误诊.
-
LDH-A shRNA对人胰腺癌细胞系PANC-1增殖凋亡和LDH-A表达的影响
目的 通过构建乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase,LDH-A)shRNA并转染PANC-1细胞,分析其对胰腺癌细胞生物学特性的影响.方法 构建3条LDH-A shRNA质粒,脂质体转染质粒至PANC-1细胞中,实时荧光定量PCR法检测不同质粒转染后LDH-A mRNA的表达变化.将抑制效率高的shRNA质粒-3转染PANC-1细胞,MTT法检测转染前后细胞增殖的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化.RT-PCR检测LDH-A表达以及酶化学染色检测转染前后LDH活性的变化.结果 3种LDH-A shRNA质粒转染胰腺癌细胞后,LDH-A shRNA质粒.3的2-△△Ct值为(0.47±0.02),较正常细胞(0.71±0.01)小,存在抑制作用,且抑制效率较高.PANC-1细胞在转染shRNA质粒-3后12 h转染组吸光度值显著低于对照组,细胞出现增殖抑制,24、36、48和72 h,转染组的吸光度值均显著低于对照组(P<0.01).转染质粒组细胞凋亡也明显增高,其凋亡率达到61.74%;转染shRNA质粒-3的胰腺癌细胞株,其LDH-A mRNA的表达明显抑制,酶化学染色显示LDH活性明显减弱.结论 LDH-A shRNA通过抑制胰腺癌细胞LDH-A mRNA的表达抑制其增殖及诱导细胞凋亡.
-
新生儿窒息后Tei指数与血清心肌酶的关系
目的 探讨新生儿窒息后Tei指数与血清心肌酶的关系.方法 超声心动图测定44例轻度窒息新生儿、27例重度窒息新生儿及20例正常新生儿的二尖瓣口舒张期血流频谱E峰、A峰及E/A值、左心室射血分数、等容收缩间期、等容舒张间期及Tei指数,同时取其静脉血测定天冬氨酸氨基转移酶、肌酸激酶及其同工酶、乳酸脱氢酶、羟丁酸脱氢酶和肌钙蛋白T水平.组间差异比较采用单因素方差分析,两两比较用q检验,Tei指数与血清心肌酶间的关系采用直线相关分析.结果 (1)Tei指数、等容收缩间期及等容舒张间期在重度窒息组分别为0.62±0.13、(47±7)ms和(52±8)ms,均高于轻度窒息组[分别为0.51±0.14、(41±6)ms和(43±6)ms],轻度窒息组高于正常对照组[分别为0.39±0.12、(34±6)ms和(37±6)ms],差异均有统计学意义(P均<0.01).(2)天冬氨酸氨基转移酶、肌酸激酶及其同工酶、乳酸脱氢酶、羟丁酸脱氢酶和肌钙蛋白T在轻度窒息组高于正常对照组(P<0.01),重度窒息组高于轻度窒息组(P<0.01).(3)Tei指数、等容收缩间期及等容舒张间期均与血清心肌酶水平呈正相关(P<0.01).其中Tei指数与肌酸激酶及其同工酶和肌钙蛋白T相关性更明显(r分别为0.762、0.821、0.778,P均<0.01).结论 Tei指数可与血清心肌酶联合应用,评价新生儿窒息后心肌损害患儿的心脏功能,更可准确和动态监测与评估心功能不全的程度.
-
急性白血病患者血清乳酸脱氢酶与白细胞介素-12检测的意义
目的 探讨急性白血病(AL)患者血清乳酸脱氢酶(LDH)与白细胞介素-12(IL-12)检测的意义.方法 对AL初治、复发患者15例及AL缓解患者15例,采用ELSA法检测患者血清IL-12及酶法检测LDH水平,并与健康对照进行比较.结果 AL初治、复发组LDH显著高于AL缓解组及健康对照组,IL-12水平则显著降低,AL缓解组患者血清LDH降低、IL-12升高.结论 AL细胞负荷可抑制AL患者体内IL-12表达.
-
血清乳酸脱氢酶在39例老年人急性白血病中的表达
目的 观察老年人急性白血病(AL)患者血清乳酸脱氢酶(sLDH)变化,以探索其对老年人AL诊断、治疗及预后判断的临床意义.方法 用速率法动态检测39例老年人AL患者化疗前、完全缓解期sLDH水平.结果 老年人AL患者治疗前sLDH为(616.58±728.66)U/L显著高于健康对照组的(155.05±37.03)U/L(P＜0.01),完全缓解期恢复正常(P＞0.05).治疗前sLDH升高组完全缓解率、有效率明显低于sLDH正常组(P＜0.05).结论 sLDH水平可作为老年人AL的病情动态观察和疗效、预后观测的重要参考指标.
-
缺血预处理对局灶性脑缺血-再灌注大鼠乳酸脱氢酶和肌酸激酶的影响
目的 探讨缺血预处理对缺血-再灌注大鼠血清及脑组织乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的影响.方法 SD大鼠63只,随机分为预处理组、模型组和假手术组,每组21只大鼠.阻塞大脑中动脉制备脑缺血模型,预处理组在脑缺血-再灌注前3 d接受15 min的缺血预处理,缺血2 h再灌注22 h;模型组未做缺血预处理.分别比较各组的神经功能缺损评分,血清和脑匀浆中的LDH和CK值.结果 ①预处理组与模型组神经功能缺损评分比较,差异有统计学意义(P＜0.01);②预处理组、模型组及假手术组血清LDH分别为(8227±395)、(9019±370)、(6894±172)U/L;脑匀浆LDH值为(9151±701)、(8762±140)、(10 498±434)U/g(蛋白),预处理组与模型组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).3组血清CK分别为(1240±1250)、(2140±610)、(790±763)U/L;脑匀浆CK为(603±86)、(699±220)、(764±235)U/g(蛋白),差异无统计学意义(P＞0.05).血清LDH与脑匀浆LDH呈负相关(r=-0.786,Y=15 688.052-0.793X,P＜0.05;X为血清LDH值);血清CK与脑匀浆CK无相关性.结论 缺血预处理对缺血再灌注大鼠神经细胞具有保护作用.
-
急性重复性低氧暴露对小鼠脑内乳酸脱氢酶表达的影响
目的 探讨急性重复性低氧对小鼠脑内乳酸脱氢酶(LDH)表达的影响.方法 制备小鼠急性重复性低氧模型,并将其分为急性缺氧1次(H1)组、急性重复缺氧3次(H3)组和急性重复缺氧5次(H5)组,未经低氧暴露的对照组用HO表示.采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR).和免疫印迹(Western blot)方法,观察急性重复性低氧对小鼠脑内乳酸脱氢酶基因和蛋白表达的影响.结果 RT-PCR和Western blot结果显示,H1、H3和H5组海马的LDH mRNA表达分别为HO组的(1.55±0.09)、(2.79±0.25)和(1.24±0.06)倍,皮质的为(1.89±0.32)、(3.04±0.46)和(1.23±0.18)倍;H1、H3和H5组海马的LDH蛋白表达分别为HO组的(1.55±0.23)、(2.79±0.39)和(1.24±0.12)倍,皮质的为(1.90±0.32)、(3.04±0.48)和(1.23±0.19)倍.小鼠海马和皮质LDH mRNA和蛋白表达水平在重复低氧中均呈现规律性变化,在低氧暴露1次(H1)至3次(H3)时呈逐渐升高趋势,但5次(H5)后又向正常水平回落.与乳酸脱氢酶基因的这种先升高后回落的变化相比较,小鼠对低氧的耐受能力却成倍增强.结论 急性重复性低氧改变小鼠脑内LDH的表达水平.
-
鼻腔NK/T细胞淋巴瘤预后相关因素分析
目的 探讨血液学常规检测在鼻腔NK/T细胞淋巴瘤预后分析中的应用.方法 收集62例鼻腔NK/T细胞淋巴瘤患者的临床病理资料,并进行随访.对患者血液乳酸脱氢酶(lactic acid dehydrogenase,LDH)、球蛋白、白蛋白、血红蛋白(hemoglobin,Hb)和白细胞数等指标进行检测.鼻腔NK/T细胞淋巴瘤患者预后的影响因素采用单因素分析和Cox比例风险模型多因素分析.结果 62例患者中,男女比例约为3:1,患者中位年龄41岁.92%的患者为Ann Arbor Ⅰ～Ⅱ期,76%的患者属于国际预后指数(international prognostic index,IPI)低危组.治疗前身体状况评分(performance status,PS)0～1分的患者占总数的92%,贫血见于26%的患者,而53%的患者伴随有B症状.全组患者中位生存时间27个月(95%Cl:10～45个月).单因素分析显示,性别、年龄、PS评分、LDH水平、IPI、B症状、Hb浓度及白细胞数等指标与预后相关.多因素分析显示,治疗前Hb＜110 g/L,有B症状及PS评分＞1是鼻腔NK/T细胞淋巴瘤患者的不良预后因素.结论 Hb浓度、B症状及PS评分可以作为判断鼻腔NK/T细胞淋巴瘤预后的参考因素.
-
殊异韦荣菌中乳酸脱氢酶重组蛋白的表达、纯化及活性分析
目的 进一步测定殊异韦荣菌中依赖性乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的活性,以期为研究该酶的具体功能及作用机制奠定基础,并为龋病预防和治疗提供新的思路.方法 重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)和Rosetta(DE3)中,采用不同时间及6种不同浓度的异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropyhhio-β-D-galactoside,IPTG)诱导乳酸脱氢酶蛋白表达,选择佳条件诱导LDH蛋白表达.并经His-标记蛋白纯化柱(HisTRAP FF柱)提纯,用LDH活性试剂盒测定蛋白活性.结果 pET-28a-LDH转入BL21(DE3)和Rosetta(DE3)中十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示适表达条件分别为IPTG终浓度0.4 mmol/L、30℃诱导8h,IPTG终浓度0.4 mmol/L、30 ℃诱导6h.经BandScan 5.0软件分析,pET-28a-LDH质粒转化BL21(DE3)表达相对含量为9.0％,高于Rosetta(DE3)的6.1％；LDH活性试剂盒测定的蛋白活性值为13.79.结论 本项研究获得了LDH蛋白的适诱导条件,并测出殊异韦荣菌中依赖性LDH的活性,为进一步研究LDH的功能及在龋病防治中的作用奠定了基础.
-
菌斑细菌糖酵解前后胞内乳酸脱氢酶活性的研究
目的 研究细菌胞内乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)在糖酵解过程中的表达特性,以了解菌斑细菌代谢的产酸机制.方法 取3种临床分离菌株(发酵乳杆菌、变形链球菌及寡发酵链球菌)和临床混合牙菌斑,在给糖前后经超声破壁后采用连续动力学法检测细菌胞内LDH活性.结果 单菌和集合菌斑细菌糖酵解前后LDH活性均无变化.但不同细菌LDH活性不同,发酵乳杆菌LDH活性[(52.91 ±8.97) U/mg]显著高于寡发酵链球菌[(0.61 ±0.05) U/mg]和变形链球菌[(0.32 ±0.07) U/mg],P＜0.01；集合菌斑LDH活性为(16.48±3.83) U/mg,加入1,6-二磷酸果糖(fructose 1,6-diphosphate,FDP)后活性显著增高[(26.37 ±8.26) U/mg] (P＜0.01).结论 不同菌种胞内LDH的活性不同,牙菌斑中存在FDP依赖型的细菌.
-
小鼠乳酸脱氢酶C4在大肠杆菌中的可溶性表达与鉴定
目的 构建小鼠精子特异性乳酸脱氢酶CA(mLDHCA)的原核表达载体并进行重组蛋白的纯化.方法 提取小鼠睾丸组织总RNA,反转录合成eDNA.自行设计引物,PCR扩增mLDHCA的编码序列,产物经EcoR I/BamH I双酶切后,克隆至表达载体pET-28a(-+-)中,获得重组载体.将重组载体转化大肠杆菌E coli BL21(DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导mLDHCA表达,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和乳酸脱氢酶活性测定方法对重组mLDHCA进行鉴定,Ni1+NTA亲和层析法纯化mLDHCA,并将其与pVAX1-mLDHCA(小鼠 mLDHC4的真核表达载体)免疫小鼠的抗血清进行免疫印迹反应.结果 重组载体经EcoR I/BamH I双酶切后,可释放大小约1000bp的插入片段,序列分析表明,克隆的DNA片段与GenBank登录的mLDHC4编码序列完全一致,将此重组质粒命名为pET-28a(+)-mLDHCA.在IFIY;的诱导下,重组菌可表达大小约35kD的蛋白质,且其裂解液具有很高的乳酸脱氢酶活性,经亲和层析纯化后在聚丙烯酰胺凝肢中仅显示单一蛋白区带,与抗血清反应后在硝酸纤维素膜上形成特异性条带.结论 小鼠mLDHCA的全长编码序列已被克隆至原核表达载体pET-28a(+)质粒,并在E coli BL21(DE3)中获得高效表达,纯化后的蛋白特异性高、活性强.
