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上颌窦鳞癌中CyclinD1和CyclinE的表达及其意义
目的检测上颌窦鳞癌、上颌窦内翻性乳头状瘤及上颌窦炎性黏膜中CyclinD1和CyclinE的表达情况,并分析其表达与上颌窦鳞癌临床病理特性之间的关系.方法应用免疫组化方法检测50例上颌窦鳞癌、20例上颌窦内翻性乳头状瘤、10例上颌窦炎性黏膜中CyclinD1和CyclinE的表达情况.结果在上颌窦鳞癌、上颌窦内翻性乳头状瘤及上颌窦炎性黏膜中,CyclinD1阳性表达率分别为10.0%、25.0%和48.0%(P＜0.05);CyclinE阳性表达率分别为20.0%、35.0%和58.0%(P＜0.05).CyclinD1和CyclinE阳性表达率与上颌窦鳞癌患者的性别、T分型无显著相关(P＞0.05).CyclinD1和CyclinE在高、中和低分化的喉癌中阳性表达率组间比较差异无显著性(P均＞0.05).结论在上颌窦炎性黏膜、上颌窦内翻性乳头状瘤及上颌窦鳞癌中,随病变加重,CyclinD1、CyclinE阳性表达率呈逐渐升高的趋势.细胞周期调控网络中,细胞周期调控因子的异常可能是上颌窦鳞癌发生发展的内在原因.
关键词： 上颌窦肿瘤 CyclinD1基因 CyclinE基因 -
氟化钠对人成骨细胞CyclinD1基因启动子区甲基化及其转录表达的影响
目的 构建人原代成骨细胞氟中毒模型,检测不同剂量氟化钠对人成骨细胞中CyclinD1基因启动子区甲基化、mRNA转录及蛋白表达的影响,从细胞周期调控基因的表观遗传学角度探索氟中毒发生机制.方法 在知情同意原则下,收集贵州航空工业集团贵阳医院骨科外伤手术健康人(车祸)髂骨或股骨松质骨.采用酶消化法分离人原代成骨细胞,以碱性磷酸酶及钙化结节染色进行细胞鉴定;以0、125、250、500及1 000 μmol/L氟化钠处理细胞72 h.以硫化测序PCR法(bisulfite sequencing PCR,BSP)检测CyclinD1基因启动子区甲基化状态;以实时荧光定量PCR(QT-PCR)检测CyclinD1基因转录mRNA相对表达量;以免疫印迹法(Western-blotting)检测CyclinD1蛋白表达.结果 分别以0、125、250、500及1 000 μmol/L氟化钠处理细胞72 h后,CyclinD1基因启动子区未检测到甲基化;CyclinD1基因mRNA转录相对表达量在0、125、250、500及1 000 μmol/L NaF剂量组分别为0.414±0.093、0.742 ±0.089、0.796 ±0.122、1.114 ±0.260、1.140±0.171,NaF剂量组均高于对照组(F=18.89,P＜0.05).CyclinD1蛋白相对表达量分别为0.304±0.014、0.395±0.020、0.511 ±0.042、0.565±0.028、0.719±0.047,NaF剂量组均高于对照组(F=71.80,P＜0.05).CyclinD1基因转录mRNA及其蛋白表达随氟化钠剂量的升高均相应上升(P＜0.05).结论 氟化钠上调人成骨细胞中CyclinD1基因转录与表达,是氟致人成骨细胞增殖能力及细胞周期时相分布发生改变的重要分子机制之一,但未观察到CyclinD1基因启动子区甲基化参与其表达上调过程.
关键词： 氟 人成骨细胞 CyclinD1基因 DNA甲基化 -
氟化钠对人成骨细胞细胞周期蛋白D1、细胞周期蛋白依赖性激酶4基因组蛋白乙酰化水平的影响
目的 构建人原代成骨细胞体外氟中毒模型,观察不同剂量氟化钠(NaF)对入成骨细胞细胞周期蛋白D1 (CyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)基因组蛋白乙酰化水平的影响,探讨氟骨症发生发展的分子机制.方法 收集骨科外伤手术健康人(车祸)骨组织,通过酶消化法分离人原代成骨细胞,经鉴定后作为实验对象.以0、125、250、500及1 000 μmol/L NaF处理细胞72 h.定量染色质免疫共沉淀技术检测CyclinD1、CDK4基因转录调控区ChIP1区域及编码区ChIP2区域(对照区)组蛋白H3K9、H3K14、H4K12、H4K16乙酰化水平.结果 ①分别以0、125、250、500及1 000 μmol/L NaF处理细胞72 h后,CyclinD1基因转录调控区ChIP1区域组蛋白H3K9乙酰化水平分别为1.152±0.104、1.174±0.187、1.090±0.176、1.170±0.197、1.147±0.097,组间比较差异无统计学意义(F=0.524,P＞0.05);H3K14乙酰化水平分别为1.495±0.117、1.465±0.069、1.470±0.187、1.760±1.089、1.341±0.443,组间比较差异无统计学意义(F=0.841,P＞0.05);H4K12乙酰化水平分别为1.239±0.286、0.702±0.063、0.765±0.370、1.011±0.321、1.319±0.026,组间比较差异无统计学意义(F=2.329,P＞0.05);H4K16乙酰化水平分别为1.452±0.217、1.621±0.165、1.462±0.090、1.510±0.146、1.564±0.154,组间比较差异无统计学意义(F=0.123,P＞ 0.05).②CDK4基因转录调控区ChIP1区域组蛋白H3K9乙酰化水平分别为1.472±0.163、1.580±0.161、1.585±0.132、1.451±0.136、1.560±0.039,组间比较差异无统计学意义(F=0.461,P＞0.05);H3K14乙酰化水平分别为0.919±0.149、0.900±0.059、0.911±0.162、0.663±0.049、0.841±0.122,组间比较差异无统计学意义(F=0.974,P＞0.05);H4K12乙酰化水平分别为0.456±0.142、0.911±0.126、0.969±0.185,1.110±0.146、0.931±0.141,组间比较差异无统计学意义(F=5.459,P＞0.05);H4K16乙酰化水平分别为1.315±0.083、1.374±0.153、1.423±0.055、1.300±0.132、1.385±0.696,组间比较差异无统计学意义(F=1.663,P＞ 0.05).③CyclinD1、CDK4基因编码区ChIP2区域组蛋白H3K9、H3K14、H4K12、H4K16乙酰化水平,各NaF处理组间比较差异均无统计学意义(F=0.392、0.823、0.999、0.397,0.705、0.049、1.065、0.196,P均＞0.05).结论 在氟处理的人原代成骨细胞中,未观察到细胞周期调控基因CyclinD1、CDK4转录调控区组蛋白乙酰化参与其表达调控.
关键词： 氟 成骨细胞 CyclinD1基因 CDK4基因 组蛋白乙酰化 -
宣威及昆明地区肺癌患者cyclinD1基因多态性比较及意义
目的 探讨cyclinD1(CCND1)基因在肺癌发生、发展中的作用.方法 采用PCR-SSCP和DNA直接测序技术,对宣威、昆明地区非小细胞肺癌各45例(分别为宣威、昆明组)和非肺癌(肺大疱、肺出血)行手术切除的正常肺组织石蜡包埋标本18例(对照组)进行CCND1的G870A基因多态性检测.结果 CCND1的G870A的AA、AG、GG基因型在宣威组的频率分别为46.7%、42.2%、11.1%;在昆明组中分别为24.4%、44.4%、31.1%;对照组为22.2%、38.9%、38.9%.CCND1的G870A的AA型发生频率宣威组与对照组比较有显著差异(P＜0.05),而昆明组与对照组比较无差异.CNND1的G870A基因多态性与TNM分期及淋巴结转移有关(P＜0.05).结论 肺癌的发生、发展是一个多基因、多步骤参与的过程,CCND1的G870A多态性与宣威地区特异性有关.
关键词： 非小细胞肺癌 CyclinD1基因 基因多态性 -
cyclinD1甲基化程度降低与大肠癌的关系
目的探讨cyclinD1基因启动子区甲基化改变在大肠癌发生发展过程中的作用及意义.方法采用MSP法检测大肠癌标本中cyclinD1的甲基化状态,并与大肠癌病理学特征比较.结果在大肠癌发生发展过程中,cyclinD1甲基化率呈逐渐下降趋势,其在癌旁、腺瘤、癌组织中的甲基化率与切缘上皮相比均有显著性差异(P<0.01).在各病变阶段cyclinD1甲基化程度与其蛋白表达呈明显负相关.癌组织中cyclinD1甲基化率还与肿瘤的分化程度、浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.01).结论 cyclinD1甲基化程度降低致cyclinD1过表达在大肠癌的发生发展中可能起重要作用,其在大肠癌的早期诊断和恶性程度及预后判断上可能是一个有用的分子指标.
关键词： 大肠癌 CyclinD1基因 DNA甲基化 -
Rb与cyclinD1在骨肉瘤中的表达及其意义
目的:研究Rb与cyclinD1蛋白在骨肉瘤中的表达及其意义.方法:采用免疫组织化学方法对47例骨肉瘤及18例良性骨肿瘤组织标本进行Rb、cyclinD1蛋白表达检测.结果:cyclinD1在骨肉瘤标本中的表达高于良性骨肿瘤组织中的表达(P<<0.05),其差异有显著性.Rb蛋白在骨肉瘤标本中的表达低于良性骨肿瘤标本中的表达(P<0.05),其差异有显著性.Rb蛋白表达在骨肉瘤临床分期ⅡA与Ⅲ期之间有显著差异(P<0.05).Rb与cyclinD1之间无明显相关关系(P>0.05),其差异有显著性.Rb蛋白在骨肉瘤标本中的表达低于良性骨肿瘤标本中的表达(P<0.05),其差异有显著性.Rb蛋白表达在骨肉瘤临床分期ⅡA与Ⅲ期之间有显著差异(P<0.05).Rb与cyclinD1之间无明显相关关系(P>0.05).结论:cyclinD1、Rb基因表达的改变可能与骨肉瘤的发生、发展有关,Rb基因表达可能与骨肉瘤的转移有关,为骨肉瘤的癌基因研究积累了资料.
关键词： 骨肉瘤 CyclinD1基因 RB基因 免疫组织化学 -
CyclinD1基因扩增及其蛋白表达在乳腺癌中的意义
目的探讨乳腺癌中CyclinD1基因扩增和其蛋白表达的相关性及其临床意义.方法应用半定量PCR和免疫组化技术,检测和分析了乳腺癌及其癌旁组织、乳腺良性组织及正常乳腺标本中CyclinD1基因的扩增和CyclinD1蛋白的表达情况.结果 62例乳腺癌中,CyclinD1基因扩增占22.6%(14/62),蛋白过度表达占48.4%(30/62),二者有一定相关性,而其它各种乳腺组织的CyclinD1基因扩增及蛋白过度表达与之相比差异有显著性意义(P＜0.05).CyclinD1基因扩增及蛋白过度表达与乳腺癌组织学分级呈明显正相关,且CyclinD1蛋白过度表达还与雌孕激素受体状况呈正相关.结论乳腺癌中CyclinD1基因扩增程度和其蛋白过度表达虽有一定相关性,但并不完全一致,说明还存在着其它导致CyclinD1蛋白过度表达的机理,CyclinD1蛋白的表达可能还受雌激素的调控.对乳腺癌中CyclinD1基因及其蛋白表达的检测有一定临床意义.
关键词： 乳腺癌 CyclinD1基因 CyclinD1蛋白 -
Genistein 对K562细胞生长及CyclinD1基因和bcr-abl融合基因表达的影响
目的研究Genistein抑制K562细胞生长的机制及对CyclinD1基因和bcr-abl融合基因表达的影响. 方法用RT-PCR方法检测Genistein作用于K562细胞前后CyclinD1基因和bcr-abl融合基因的mRNA表达变化,用免疫荧光、流式细胞仪和电镜检测CDK4蛋白的表达、细胞周期及凋亡. 结果 K562细胞中CyclinD1基因、bcr-abl融合基因的mRNA和CDK4蛋白表达阳性,用Genistein与K562细胞共同孵育后,bcr-abl融合基因的mRNA表达阴性,CyclinD1的mRNA和CDK4蛋白表达下降,细胞阻滞于G2/M期,K562细胞出现凋亡. 结论 bcr-abl融合基因、 CyclinD1基因和CDK4蛋白在K562细胞中高表达, Genistein能使K562细胞生长受抑, 诱导其凋亡, 抑制bcr-abl基因的mRNA表达, 并使CyclinD1基因的mRNA和CDK4蛋白表达下降, 表明bcr-abl融合基因、 CyclinD1基因和CDK4对慢粒发展存在内在关系.
关键词： 染料木黄酮 CyclinD1基因 CDK4蛋白 BCR-ABL融合基因
