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铁过载对成骨细胞铁稳态及生物活性的影响
目的 了解铁过载对成骨细胞铁稳态及生物活性的影响.方法 34℃条件下体外培养人成骨细胞(hFOB1.19),以不同浓度(50、100、200 μmol/L)枸橼酸铁铵(FAC)干预,用RT-PCR检测成骨细胞铁调节基因膜转铁蛋白(FPN1)、转铁蛋白受体(TfR)和二价金属转运蛋白1 (DMT1)表达的变化；用激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)观察成骨细胞铁离子荧光强度；流式细胞仪检测成骨细胞活性氧(ROS)水平；碱性磷酸酶活性试剂盒检测碱性磷酸酶活性；Von kossa染色法行钙结节染色.结果 与对照组相比,FAC干预48 h后FPN1 mRNA的表达随FAC干预浓度增加呈剂量依赖性上调,TfR、DMT1 mRNA的表达呈剂量依赖性下调(P＜0.05)；FAC 干预48 h后成骨细胞铁离子荧光强度剂量依赖性减弱,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05)；48 h后成骨细胞ROS水平随FAC干预浓度增加呈剂量依赖性升高(P＜0.05)；FAC干预10d后各组成骨细胞碱性磷酸酶活性均随FAC浓度增高而降低,差异有统计学意义(P ＜0.05)；与对照组相比,FAC干预17 d后成骨细胞钙结节染色显示矿化面积和钙结节形成随FAC浓度增加而减少.结论 铁过载对成骨细胞生物活性有明显抑制作用,其机制可能与细胞内铁离子浓度增加及活性氧水平升高有关.
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胰岛素对人成骨细胞胰岛素受体底物-2的作用
胰岛素受体底物(IRS)是胰岛素受体、胰岛素样生长因子-1受体酪氨酸蛋白激酶的主要底物[1].IRS-2在糖尿病的发生和发展中起着一定作用,它调节胰岛β细胞数目及功能[2].IRS-2还是骨代谢的调节因子,在胰岛素、胰岛素样生长因子-1等骨代谢因子的信号传递中起重要作用,IRS-2在骨形成方面起着主导作用[3,4].胰岛素绝对缺乏的1型糖尿病可发生骨质疏松,但其机制尚未完全阐明.本实验通过研究胰岛素对人成骨细胞IRS-2蛋白及磷酸化的影响来探讨其发病机制.
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左旋肉毒碱对人成骨细胞增殖和凋亡的影响
目的 观察左旋肉毒碱(L-carnitine,L-C)对人成骨细胞增殖和凋亡的作用.方法 以3H掺入法(3H-TdR)测定左旋肉毒碱对人成骨细胞增殖的影响;以吖啶橙/溴化乙啶染色和细胞凋亡ELISA(酶联免疫吸附法)试剂盒测定左旋肉毒碱对人成骨细胞凋亡的影响;以免疫印记法检测左旋肉毒碱干预前后活化型Caspase-3、-9蛋白质表达水平的改变.结果 10～100 mmol/L左旋肉毒碱能促进人成骨细胞增殖.吖啶橙/溴乙啶染色法示100 mmol/L左旋肉毒碱干预使人成骨细胞凋亡细胞明显减少.ELISA结果示10～100 mmol/L左旋肉毒碱干预可显著抑制人成骨细胞凋亡.10～100 mmol/L左旋肉毒碱干预可抑制无血清饥饿诱导的人成骨细胞caspase-3、9活化增加.结论 左旋肉毒碱促进人成骨细胞增殖,并通过下调Caspase-3、-9的活化抑制人成骨细胞凋亡.
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联合甲状旁腺激素和普萘洛尔对人成骨细胞增殖及OPG 和 RANKL mRNA 表达的影响
目的：联合甲状旁腺激素（ rhPTH1-34）和普萘洛尔（ PRO）处理体外培养的人松质骨源性成骨细胞（ HOB），观察其对人成骨细胞增殖及骨保护素（OPG）和核因子κB受体活化因子配体（RANKL）基因表达的影响，探讨其对骨代谢影响的可能机制。方法（1）以成人髂骨和股骨颈部松质骨为原料，分离培养原代人成骨细胞并对其鉴定。（2）以人成骨细胞为体外实验模型，固定浓度rhPTH1-34（50 ng/ml）和不同浓度PRO（0.1μM、1μM、10μM）分别及联合刺激体外培养的人成骨细胞72 h后，采用CCK-8法检测细胞增殖能力，用实时荧光定量PCR法检测成骨细胞OPG和RANKL基因的表达。结果 rhPTH1-34和PRO单独给药均可促进成骨细胞增殖（ P＜0.05），在PRO 10 uM时成骨细胞OPG基因的表达量增加（ P＜0.05），且大于RANKL基因的表达量；相反，联合rhPTH1-34和PRO给药抑制成骨细胞增殖（ P＜0.05），并抑制成骨细胞OPG和RANKL基因的表达（P＜0.05），且随着PRO浓度的增加，OPG和RANKL基因表达均呈下降趋势。结论 rhPTH1-34和PRO单独给药均可促进成骨细胞增殖，而两者联合给药后却抑制了成骨细胞的增殖，可能是通过调控OPG和RANKL基因的表达来实现的。
关键词： 甲状旁腺素 普萘洛尔 人成骨细胞 骨保护素 核因子kB受体活化因子配体 -
人成骨细胞体外培养、鉴定及护骨素表达的研究
目的用酶消化法从正常人松质骨中分离成骨细胞,进行体外培养和功能鉴定,观察用17β-雌二醇(17β-E2)和雌激素受体拮抗剂ICI182780处理后,成骨细胞中护骨素(OPG)的表达变化.方法用胰酶-胶原酶消化法从正常人松质骨中分离培养成骨细胞,I型胶原染色用Van Gieson法,钙化结节用茜素红染色,用钙钴法显示成骨细胞中碱性磷酸酶的表达,骨钙素和OPG基因的表达用RT-PCR检测,OPG蛋白用Western Blot检测.结果用酶消化法分离的人成骨细胞,在体外培养时可维持合成I型胶原、碱性磷酸酶、骨钙素,并形成钙化结节等功能;体外培养的人成骨细胞表达OPG,17β-E2上调其表达,并能被雌激素受体拮抗剂ICI182780阻断.结论用酶消化法进行人成骨细胞培养,方便易行,可培养大量高纯度人成骨细胞供研究使用;17β-E2上调OPG表达,而绝经后雌激素缺乏时,OPG的表达相应减少,可能是骨质疏松的发病因素之一.
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不同浓度铁离子对成骨细胞铁离子通道蛋白的影响
目的 铁过载与骨代谢相关,在人成骨细胞(hFOB1.19)中,膜转铁蛋白(FPN1)、转铁蛋白受体(TfR)和二价金属转运蛋白1(DMT1)是细胞内铁离子进入和排除的重要通道蛋白;本研究用不同浓度铁离子干预成骨细胞培养,观察成骨细胞铁离子通道蛋白基因表达变化和相互联系,了解铁过载对相关通道蛋白的影响意义.方法人成骨细胞在34℃下进行体外培养,以不同浓度枸橼酸铁铵FAC(50 μmol/L、100 μmol/L、200 μmol/L)干预成骨细胞培养,48小时后收集细胞,按不同干预组抽提总RNA,采用半定量RT-PCR法检测成骨细胞中TfR、DMT1、FPN1 mRNA的表达.结果①RT-PCR检测显示不同浓度FAC干预成骨细胞后,各组FPN1、TfR、DMT1 mRNA均有表达;②不同浓度组FPN1、TfR、DMT1 mRNA表达光密度比值不同,组间密度比值比较存在统计学意义(P<0.05);③培养环境铁离子浓度增高可以使得FPN1的mRNA表达上调,而TfR、DMT1的mRNA表达下调.结论 成骨细胞的铁通道蛋白受环境铁离子影响,在一定范围内随着细胞外铁离子浓度增加,细胞膜铁离子进入通道功能下调、排除通道功能上调,说明铁过载对成骨细胞内铁离子水平有明显影响.
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LC促进人成骨样MG-63细胞增殖及相关机制的研究
目的 探讨大黄酸哌嗪雌酚酮(rhein-piperizinyl-estrone,LC)对人成骨样MG-63细胞增殖活性的影响及其相关分子机制.方法 在原工作基础上,以兼有两种雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型表达的人成骨样MG-63细胞为研究对象,分别应用MTT法和流式细胞术,观察LC对MG-63细胞的增殖活性和细胞周期分布的影响.利用前期构建的ERα或ERβ稳定高抑制表达的MG-63细胞株,应用免疫印迹技术,对LC的作用机制和可能的信号通路进行研究.结果 与对照组相比,LC可明显促进MG-63细胞的增殖活性,该作用具有剂量依赖性;可调节细胞周期分布,使G1期细胞比例减少、G2 +S期细胞比例增加,进而促进细胞生长.进一步研究发现,ER阻断剂ICI 182,780可完全阻断LC的促增殖作用,提示LC是经ER途径对MG-63的增殖活性发挥作用的;利用ERα或ERβ高抑制表达的稳定细胞株,证实LC的促增殖作用是由ERα和ERβ共同介导的;该作用与Ras/MEK/ERK、PI3K/Akt信号通路的激活密切相关.结论 LC可经ERα和ERβ共同介导对人成骨细胞的促增殖作用,有望成为治疗绝经后骨质疏松症的新型骨靶向雌激素类药物.
关键词： 大黄酸哌嗪雌酚酮(LC) 人成骨细胞 MG-63 增殖 雌激素受体 -
活性氧在铁过载影响成骨细胞生物活性中的作用
目的 观察铁过载对人成骨细胞(hFOB1.19)生物活性的影响,同时观察活性氧在这一实验变化过程中的作用.方法 体外培养成骨细胞,一组运用200 μmol/L枸橼酸铁铵(FAC)干预,一组运用2.5 mmol/L抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)干预,一组NAC预处理1 h后运用相同浓度FAC干预,一组为正常对照;细胞培养48 h后,流式细胞仪检测各组细胞内活性氧(ROS)的水平;CCK-8法检测各组细胞活力;RT-PCR法检测各组细胞OPG、BGP和COL1 mRNA表达的变化;碱性磷酸酶活性试剂盒检测各组细胞碱性磷酸酶活性.结果 不同干预组成骨细胞内活性氧含量差异显著不同(P＜0.05),FAC组显著高于对照组,FAC+NAC组低于FAC组、高于NAC组;各组间活性氧含量的变化与成骨细胞活力、OPG、BGP和COL1 mRNA表达光密度比值、碱性磷酸酶活性呈负相关性,组间比较有统计学差异(P＜0.05).结论 铁过载降低成骨细胞生物活性可能与铁过载增加成骨细胞内活性氧水平有关.
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体外培养人成骨细胞骨相关基因表达
目的探讨体外培养人成骨细胞骨相关基因表达情况.方法应用组织块移行生长法分离培养人成骨细胞,活体观察与碱性磷酸酶染色观察其生物学特性,采用RT-PCR方法检测培养14 d的二代人成骨细胞基因COL1,BGP,OPG,ON,IGF-1,TGF-β的表达情况,并用GAPDH予以矫正.结果相差倒置显微镜观察可见细胞呈三角形、四角形或不规则形,50%～90%的细胞碱性磷酸酶呈阳性,培养14 d的二代人成骨细胞检测到基因COL1,BGP,OPG,ON,IGF-1,TGF-β的mRNA表达.结论体外培养人成骨细胞可表达COL1,BGP,OPG,ON,IGF-1,TGF-β等骨相关基因.
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牛骨胶原蛋白肽促进HOB增殖
目的 研究牛骨胶原蛋白肽(Bovine Collagen peptides,BCP)对人成骨细胞(Human Oseoblast,HOB)增殖的影响.方法 分离培养HOB,茜素红染色鉴定HOB的成骨特性,利用MTT实验检测胶原蛋白肽对HOB的增殖,流式细胞仪测定胶原蛋白肽对HOB细胞周期.结果 茜素红矿化染色结果表明,HOB具有成骨能力.MTT实验表明0.3 mg/ml胶原蛋白肽能显著促进细胞的增殖,并能增加G2 +S期的百分含量.结论 牛骨胶原蛋白肽能够促进HOB增殖,为骨质疏松的预防和治疗提供理论依据.
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盐酸二甲双胍对人成骨细胞增殖及CollagenⅠ、LRP5mRNA表达的影响
目的 观察不同浓度二甲双胍对体外培养人成骨细胞增殖、CollagenⅠ及LRP5mRNA表达的影响,探讨二甲双胍对成骨细胞作用的可能机制.方法 不同浓度二甲双胍(0、25、50、100、200 μmol/L)刺激体外培养人成骨细胞72 h,采用CCK-8比色法检测细胞增殖情况,用荧光定量RT-PCR法检测CollagenⅠ、LRP5mRNA表达.结果 显示二甲双胍可促进其增殖(P<0.05),并促进成骨细胞CollagenⅠ及LRP5mRNA表达 (P<0.05),在200 μmol/L时增殖、表达明显,呈剂量效应关系.结论 二甲双胍在一定浓度范围内可促进人成骨细胞增殖,可能通过Wnt/LRP5信号通路增强CollagenⅠ及LRP5mRNA的表达来调控.
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雌二醇对人成骨细胞增殖及基质金属蛋白酶活性的影响
本文报道了雌二醇对体外分离培养的人成骨细胞增殖的影响,SDS-Gel-PAGE电泳及固体胶原-羟脯氨酸测定法测定成骨细胞基质金属蛋白酶(MMPs)活性.结果表明:低浓度雌二醇对人成骨细胞有刺激增殖的作用,1.3×10-7M时刺激作用强,浓度过高则抑制细胞增殖,成骨细胞的分化则随着雌二醇浓度的增加而分化越好,随雌激素浓度增加成骨细胞MMP活性也相应增大与分化程度一致.
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利用RNAi技术稳定抑制ERβ表达的人成骨细胞株hFOB 1.19细胞模型的建立
目的:探讨利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术稳定抑制雌激素受体β(Estrogen receptor β,ERβ)表达建立人成骨细胞株hFOB 1.19细胞模型的可行性.方法:设计3种特异性ERβ-shRNA,体外合成后将其克隆人pRNAT-H 1.4/Retro逆转录病毒质粒中,并包装成逆转录病毒;ERβ-shRNA逆转录病毒瞬时感染hFOB 1.19细胞后,通过流式细胞仪检测感染效率,并使用半定量RT-PCR和Western blot检测对ERβ mRNA和蛋白表达的抑制效率;然后取ERβ抑制效率高的hFOB l.19细胞,通过抗性筛选,将得到稳定感染的细胞扩大培养,再通过半定量RT-PCR和Western blot检测ERβ稳定抑制的效率;并应用MTT法检测ERβ稳定抑制后对细胞增殖的影响.结果:成功构建了3种ERβ-shRNA逆转录病毒载体;流式细胞仪检测结果显示,瞬时感染效率均高达70％以上;ERβ-shRNA-1、ERβ-shRNA-2、ERβ-shRNA-3逆转录病毒载体对hFOB 1.19细胞中ERβ mRNA的抑制率分别为(54.56±0.95)％、(69.60±1.12)％、(76.491.15)％,蛋白的抑制率分别为(59.21±4.44)％、(78.35±2.00)％、(85.60±2.66)％(均P＜0.05);成功筛选出稳定感染ERβ-shRNA-3逆转录病毒载体的hFOB 1.19细胞,ERβ mRNA和蛋白的抑制率分别为(83.23±2.45)％和(93.11±0.57)％(均P＜0.05),MTT法检测显示ERβ稳定抑制后对细胞的增殖没有明显影响(P＞0.05).结论:利用RNAi技术可成功建立ERβ稳定抑制的hFOB 1.19细胞模型.
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吗啡对女性体外培养成骨细胞ERmRNA、PRmRNA表达的影响
目的:用酶消化法从正常女性松质骨中分离成骨细胞,进行体外培养和功能鉴定,从mRNA水平研究吗啡对体外培养人成骨细胞雌激素受体(estrogen receptor,ER)和孕激素受体(progesterone receptor,PR)表达的影响,探讨吗啡对成骨细胞的直接作用,为进一步寻求减少或阻断吗啡依赖对骨的负面影响提供一定的理论依据.方法:用胰酶一胶原酶消化法从正常人松质骨中分离培养成骨细胞,用茜素红染色法、Gomonri改良钙钴法鉴定成骨细胞;制备不同浓度的吗啡及其拮抗剂纳洛酮,作用于体外培养的成人正常成骨细胞上,通过RT-PCR法半定量分析不同浓度的吗啡及其拮抗剂纳洛酮对成骨细胞ER、PRmRNA及BGP(骨钙素)mRNA表达的影响.结果:用酶消化法分离的人成骨细胞,在体外培养时可合成碱性磷酸酶(ALP)、形成钙化结节.不同浓度吗啡组成骨细胞上.ERmRNA表达与对照组比较有显著性下降(P＜0.05)且与吗啡浓度负相关(r=0.996,P＜0.001);不同浓度吗啡组成骨细胞上PRmRNA表达与对照组比较均有显著性下性(P＜0.05),且与吗啡浓度负相关(r=0.983,P＜0.001);不同浓度吗啡组成骨细胞上BGPmRNA表达与对照组比校均有显著性下(P＜0.05),且与吗啡浓度负相关(r=-0.988,P＜0.001).结论:用酶消化法进行人成骨细胞培养,简捷易行,可培养大量高纯度人成骨细胞供研究使用;从mRNA水平证明了吗啡可以引起体外培养的女性成骨细胞内ER、PR及BGP数量下调,且与吗啡浓度呈负相关,可剂量依赖下调人成骨细胞ER、PRmRNA及BGPmRNA的表达.
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吗啡对体外培养正常女性成骨细胞的增殖及BGP mRNA表达的影响
目的:观察阿片类药物是否对体外培养正常女性成骨细胞增殖有影响.方法:用胰酶-胶原酶消化法从正常女性松质骨中分离培养成骨细胞,用茜素红染色法、改良Gomonri钙钴法鉴定成骨细胞;制备不同浓度的吗啡及其拮抗剂纳洛酮,作用于体外培养的成人正常成骨细胞上,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测吗啡对其的影响;通过RT-PCR法半定量分析不同浓度的吗啡及其拮抗剂纳洛酮对成骨细胞骨钙素(BGP mRNA)表达的影响.结果:用酶消化法分离的人成骨细胞,在体外培养时可合成碱性磷酸酶(ALP)、形成钙化结节.不同浓度的吗啡组与对照组OD490(optical density,OD)值相比差异有显著性(P<0.001);1×10-7 molL-1、1×10-6 molL-1、1×10-5 molL-1和1×10-4 molL-1吗啡组的细胞增殖速度依次降低(P＜0.001);而吗啡(10-5 molL-1)+纳洛酮(10-5 molL-1)组与对照组OD490值相比差异不明显(P>0.05).吗啡作用24 h呈剂量依赖性抑制BGP mRNA的表达.结论:用酶消化法进行人成骨细胞培养,简捷易行,可培养大量高纯度人成骨细胞供研究使用;外源性阿片类药物吗啡可直接抑制人成骨细胞的增殖.阿片类物质可以抑制成骨细胞内BGP mRNA的表达.
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孕激素对成骨细胞增殖和凋亡的影响
绝经后骨质疏松症(osteoporosis,OP)采用孕激素替代治疗可促进骨形成,减少骨丢失,其机制尚未完全阐明.研究发现,成骨细胞的增殖和凋亡在骨重建过程中起重要作用[1].我们观察了孕酮(progesterone,P)对人成骨细胞(human osteoblast cells,hOB)增殖和凋亡的影响,旨在探讨孕激素治疗绝经后OP的作用机制.
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雌二醇和孕酮对人成骨细胞胰岛素受体底物的作用
目的观察雌二醇和孕酮对人成骨细胞胰岛素受体底物(IRS)表达的影响.探讨雌、孕激素对绝经后骨质疏松症的作用机制.方法用半定量RT-PCR检测细胞IRS-1、IRS-2 mRNA的表达;分别用免疫印迹和免疫共沉淀检测细胞 IRS-1 、IRS-2蛋白表达及磷酸化.结果雌二醇和孕酮均使人成骨细胞IRS-2 mRNA的表达上调,分别为对照组的421%±68%(P＜0.05)和327%±54%( P＜0.05),两者联合干预能进一步诱导人成骨细胞IRS-2 mRNA的表达上调496%±54%(P＜0.01),但IRS-1 mRNA的表达不受影响(P>0.05).雌二醇、孕酮、雌二醇和孕酮联合干预上调细胞IRS-2蛋白的表达,分别为对照组的487%±65%、507%±54%和552%±47%,雌二醇、孕酮、雌二醇和孕酮联合干预使IRS-1去磷酸化,分别为对照组的54%±7.6% (P＜0.05),37%±4.2%,21.2%±3.0%(P＜0.01),对IRS-1蛋白的表达无影响.结论雌二醇和孕酮均可使人成骨细胞IRS-2 mRNA及蛋白的表达上调,并促使IRS-2的磷酸化,二者之间存在正性协同效应.虽然二者在转录和翻译水平对IRS-1表达无影响,但可促使IRS-1蛋白去磷酸化.因而,雌激素与孕激素合用在骨质疏松的防治中可能具有重要的意义.
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氟化钠对人成骨细胞CyclinD1基因启动子区甲基化及其转录表达的影响
目的 构建人原代成骨细胞氟中毒模型,检测不同剂量氟化钠对人成骨细胞中CyclinD1基因启动子区甲基化、mRNA转录及蛋白表达的影响,从细胞周期调控基因的表观遗传学角度探索氟中毒发生机制.方法 在知情同意原则下,收集贵州航空工业集团贵阳医院骨科外伤手术健康人(车祸)髂骨或股骨松质骨.采用酶消化法分离人原代成骨细胞,以碱性磷酸酶及钙化结节染色进行细胞鉴定;以0、125、250、500及1 000 μmol/L氟化钠处理细胞72 h.以硫化测序PCR法(bisulfite sequencing PCR,BSP)检测CyclinD1基因启动子区甲基化状态;以实时荧光定量PCR(QT-PCR)检测CyclinD1基因转录mRNA相对表达量;以免疫印迹法(Western-blotting)检测CyclinD1蛋白表达.结果 分别以0、125、250、500及1 000 μmol/L氟化钠处理细胞72 h后,CyclinD1基因启动子区未检测到甲基化;CyclinD1基因mRNA转录相对表达量在0、125、250、500及1 000 μmol/L NaF剂量组分别为0.414±0.093、0.742 ±0.089、0.796 ±0.122、1.114 ±0.260、1.140±0.171,NaF剂量组均高于对照组(F=18.89,P＜0.05).CyclinD1蛋白相对表达量分别为0.304±0.014、0.395±0.020、0.511 ±0.042、0.565±0.028、0.719±0.047,NaF剂量组均高于对照组(F=71.80,P＜0.05).CyclinD1基因转录mRNA及其蛋白表达随氟化钠剂量的升高均相应上升(P＜0.05).结论 氟化钠上调人成骨细胞中CyclinD1基因转录与表达,是氟致人成骨细胞增殖能力及细胞周期时相分布发生改变的重要分子机制之一,但未观察到CyclinD1基因启动子区甲基化参与其表达上调过程.
关键词： 氟 人成骨细胞 CyclinD1基因 DNA甲基化 -
染料木黄酮对人成骨细胞凋亡的影响
目的:观察染料木黄酮(Gen)对人成骨细胞凋亡的影响.方法:将体外分离到的人骨膜成骨细胞在高糖DMEM(含10%小牛血清)中进行纯化扩增至第三代,然后接种于无酚红高糖DMEM培养液中(含10%经活性碳-葡聚糖苷处理的胎牛血清,CDT-FBS),4 d后用0.25%的胰蛋白酶消化、收集细胞,用PBS洗涤2次后,用于各项实验.指标包括:流式细胞仪分析细胞凋亡比例,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂条带,免疫组化观察Gen对Bax、Bcl-2及caspase-3表达的影响.结果:无雌激素(E2)血清培养可诱导成骨细胞发生凋亡(45.7%),加入10-8mol/L E2、10-6mol/L和10-5mol/L Gen对细胞处理48 h,成骨细胞凋亡率分别降低到15.3%、36.3%及28.4%(P＜0.05)免疫组化结果表明,同E2类似,Gen可抑制Bax和capsase-3的表达,而促进Bcl-2蛋白的表达.结论:染料木黄酮可能是通过影响雌激素受体途径而发挥其骨保护作用的.
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纳米羟基磷灰石/胶原/聚乳酸支架材料对人成骨细胞早期附着影响的实验研究
目的 以人成骨细胞(MG-63细胞)复合纳米羟基磷灰石/胶原/聚乳酸[nano-hydfoxyapatite/collagen/poly(Lkactic)acid,nHAC/PLA]支架材料进行体外培养,观察其早期附着生长情况.方法 将MG-63细胞在nHAC/PLA支架材料上培养,通过倒置显微镜观察、HE染色、ALP染色、细胞增殖指数测定等方法对细胞在nHAC/PLA支架材料上的早期附着情况进行研究.结果 细胞在nHAC/PLA上生长良好;ALP染色阳性度高,细胞增殖指数比空白对照组有显著提高.结论 nHAC/PLA支架有利于MG-63细胞的早期黏附、生长,可以用作骨组织工程的支架材料.
关键词： 纳米羟基磷灰石/胶原/聚乳酸 支架材料 人成骨细胞
