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Rett综合征患儿MECP2基因型和表型关系研究
目的 寻找中国Rett综合征(RTT)患儿甲基化CpG结合蛋白2基因(MECP2)突变的基因型和表型之间的相互关系,为临床诊断和治疗提供帮助.方法 对126例经分子遗传学方法诊断的RTT患儿的临床表型参照Kerr等和Scala等评分标准进行打分,采用SPSS 12.0软件包进行统计分析.结果 分析MECP2突变类型、基因功能区和表型的关系显示,位于基因不同功能区的突变:甲基化CpG结合区(MBD)、转录抑制区(TRD)和C末端(CTS)对RTT表型的影响差异无统计学意义(P>0.05);不同突变类型:错义、无义、移码和大片段缺失突变对RTT表型的影响差异无统计学意义(P>0.05).分析MECP2突变类型和基因功能区共同对表型的影响显示:同位于MBD的无义和错义突变相比较,前者临床严重性评分高于后者,差异有统计学意义(P=0.016),而位于TRD的无义和错义突变临床严重性评分之间差异无统计学意义(P>0.05);位于MBD和TRD的错义突变的临床严重性评分之间差异无统计学意义(P>0.05),位于MBD和TRD的无义突变的临床严重性评分之间差异无统计学意义(P>0.05).分析MECP2常见突变类型和表型的关系显示:p.T158M、p.R168X、c.806delG和p.R255X对RTT表型总的影响差异无统计学意义(P>0.05),但在语言功能的受累程度上,以上4种突变之间差异有统计学意义(P=0.028),且语言能力受损的发生率差异也有统计学意义(P=0.019).结论 MECP2基因型和表型之间存在一些相互关系:位于MBD的无义突变病情较严重;在<5岁组中发生频率较高的4种突变对语言功能和语言能力受损发生率方面存在不同,其中p.R168X受损重.
关键词： Rett综合征 甲基-CpG-结合蛋白质2 基因型 表型 -
分子遗传学技术诊断MECP2重复综合征四例分析
目的 用多重连接探针扩增技术(MLPA)和微阵列比较基因组杂交技术(array-CGH)研究4例以运动、智力发育落后为主要表现的患儿甲基化CpG结合蛋白2基因(MECP2)基因突变特点.方法 取北京大学第一医院2012年6月至2014年4月收治的4例患儿及其中例2、例4母亲的外周血,提取基因组DNA;先对患儿用MLPA方法进行微缺失和微重复检测,然后用array-CGH进行分析进一步确定重复片段的大小;同时对2例患儿的母亲进行array-CGH和X染色体失活分析(XCI).结果 4例患儿均表现为严重肌张力低下,运动、智力发育落后和语言发育障碍,除例2之外,另3例患儿婴儿期均反复发生肺炎.MLPA显示4例患儿均存在染色体Xq28重复;array-CGH检测显示4例患儿Xq28区域存在重复,4例患儿重复片段大小分别为14.931 Mb、0.393 Mb、0.482 Mb、0.299 Mb,经与UCSC(http://genome.ucsc.edu/)数据库比对,4例患儿的重复片段均包含MECP2和宿主细胞因子C1基因(HCFC1).例2和例4患儿的母亲存在Xq28重复,其中例4患儿母亲的重复片段起止位点和大小与患儿完全相同,例2母亲重复片段为0.343 Mb,小于患儿,近着丝粒断点与患儿不同,远端断点与患儿相同.X染色体失活分析发现母亲二条X染色体活性比例为0∶100,存在重复的一条X染色体完全失活,并且将发生重复的这条X染色体遗传给了患儿.结论 对于运动智力发育落后、肌张力低下、语言发育障碍和反复发生感染的患儿进行MLPA和array-CGH联合检测是诊断MECP2重复综合征的有效且特异的方法.
关键词： X染色体失活 甲基-CpG-结合蛋白质2 基因 -
叶酸对子宫颈癌细胞甲基-CpG-结合蛋白质2表达及细胞增殖抑制的作用
目的 探讨叶酸对子宫颈癌细胞甲基-CpG-结合蛋白质2(MeCP2)表达及细胞增殖抑制的影响.方法 选择子宫颈癌细胞Caski(HPV16阳性)和C33A(HPV阴性)进行不同浓度叶酸干预后,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,分别用Western blot和实时荧光聚合酶链反应(PCR)技术检测MeCP2蛋白和mRNA的表达水平.结果 叶酸随着浓度的增加,对两种细胞的生长抑制作用加强,各浓度叶酸实验组与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).C33A与Caski细胞的凋亡率随叶酸浓度的增加呈上升趋势(C33A:r=0.965,P＜0.001；Caski:r=0.973,P＜ 0.001).MeCP2蛋白的表达量则呈下降趋势,其与叶酸浓度呈负相关(C33A:r=-0.952,P＜ 0.001；Caski:r=-0.947,P＜ 0.001)；Caski与C33A细胞各浓度组间mRNA表达水平差异有统计学意义(C33A:F=77.041,P＜0.001；Caski:F=59.885,P＜ 0.001)；同一质量浓度下,500 μg/ml组Caski细胞MeCP2蛋白表达及mRNA水平均较C33A细胞高,且差异有统计学意义(P＜0.05).MeCP2蛋白表达量与细胞凋亡率呈负相关(C33A:r=-0.970,P＜0.001；Caski:r=-0.932,P＜ 0.001).结论 叶酸可以抑制子宫颈癌细胞的生长,促进细胞凋亡,降低MeCP2在子宫颈癌细胞中的表达.MeCP2的异常高表达对子宫颈癌细胞C33A和Caski的凋亡有抑制作用.
关键词： 子宫颈肿瘤 叶酸 甲基-CpG-结合蛋白质2 细胞增殖抑制 -
男性孤独症儿童甲基CpG结合蛋白-2基因突变的分析
目的:应用甲基CpG结合蛋白-2(methyl-CpG-binding protein 2,MECP2)基因突变筛查方法,检测孤独症患者的MECP2基因,探讨孤独症与MECP2基因的关系.方法:收集男性孤独症44例,均满足孤独症《美国精神障碍诊断和统计手册》第4版诊断标准,应用变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)筛查MECP2基因变异,并进行DNA测序鉴定.对存在MECP2基因错义突变的病例进行家系调查.结果:在44例患者中经DHPLC筛查阳性和DNA测序发现,4例患者存在不同的MECP2基因突变,包括c.590C＞T(T197M)和c.602C＞ T(A201V)2种错义突变,以及c.1053C＞G、c.897C＞T 2种同义突变；17例的内含子3位于Exon 4前74位点C＞T,为SNP (rs2071569)；1例c.602C ＞T错义突变患者家系调查发现,突变来源于母亲及外祖父,母亲呈杂合子,为X染色体随机失活,母亲与外祖父智力均正常,外祖父有抑郁症.结论:在男性孤独症患者中,存在MECP2基因较高的变异率,MECP2基因在孤独症致病中可能起着一定作用,不除外是孤独症的易感基因.
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Rett综合征的致病基因彻CECP2的研究进展——MECP2的基因结构、功能及调控基因
Rett综合征(Rett syndrome,RTT)是一种神经系统发育异常性疾病,主要累及女孩,是导致女性智力低下的主要原因之一.女孩发病率大约为1:10 000～1:15 000.典型RTT的临床特征为:出生后6～18个月生长发育基本正常,随后出现神经发育停滞或倒退,丧失已获得的技能(如手的功能、语言等),头围增长缓慢,呼吸异常,出现手的刻板动作(如搓手、绞手、吃手等),伴有孤独症样行为,此外,惊厥发作也是常见症状之一,到疾病后期还可能出现骨骼改变、脊柱侧弯及强直等~([1-2]).
关键词： Rett综合征 甲基-CpG-结合蛋白质2 基因 突变 -
糖尿病神经病理性痛大鼠脊髓和背根神经节H3K9Ac和MeCP2表达的变化
目的 评价糖尿病神经病理性痛(DNP)大鼠脊髓和背根神经节赖氨酸9位-乙酰化组蛋白H3(H3K9Ac)和甲基化CpG结合蛋白2(MeCP2)表达的变化.方法 清洁级雄性SD大鼠,体重120～ 160 g,高糖高脂饲养8周后,腹腔注射链脲佐菌素35 mg/kg,注射后3d血糖≥16.7 mmol/L为2型糖尿病模型制备成功;注射后14d痛阈降低至基础值的85％以下为DNP模型制备成功,否则为非DNP(NDNP).取DNP大鼠和NDNP大鼠各18只,分别为DNP组和NDNP组;另取18只正常大鼠为对照组(C组).DNP组于模型制备成功后3、7和14 d时,C组和NDNP组于相应时点,测定机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL),随后处死大鼠,取脊髓和背根神经节组织,采用Western blot法测定H3K9Ac和MeCP2的表达水平.结果 与C组和NDNP组比较,DNP组于模型制备成功后3、7和14d时MWT降低,TWL缩短,脊髓和背根神经节中H3K9Ac表达上调,MeCP2表达下调(P＜0.05).结论 大鼠DNP维持的机制可能与脊髓和背根神经节H3K9Ac表达上调,MeCP2表达下调有关.
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甲基结合蛋白MeCP2与mbd2在SLE患者中的表达
目的 探讨甲基结合蛋白MeCP2及去甲基化酶mbd2基因的表达异常在SLE发病中的作用.方法 以RT-PCR方法检测SLE缓解期、活动期患者与正常人外周血单一核细胞(PBMC)中MeCP2及mbd2基因的表达水平,并进行相关性分析.结果 SLE活动期、缓解期及正常人对照组PBMC中MeCP2的表达差异无统计学意义(P>0.05).SLE缓解期患者PBMC中mbd2的表达水平显著高于正常人对照组(t=12.8,P<0.01);SLE活动期患者PBMC中mbd2表达显著高于SLE缓解期(t=20.0,P<0.01).SLE患者PBMC中mbd2的表达与SLEDAI评分呈正相关(r=0.737,P=0.0001).正常人对照组PBMC中mbd2的表达与MeCP2的表达呈止相关(r=0.550,P=0.0222).结论 在正常情况下,MeCP2和mbd2的表达相瓦制约,在SLE患者中这种关系被破坏.
关键词： 红斑狼疮 系统性 甲基-CpG-结合蛋白质2 基因表达
