首页 > 文献资料
-
32周胎龄人胎脑神经干细胞发育状态的研究
目的 探讨人同一胎龄胎脑不同部位神经干细胞的发育状态.方法 收集胎龄32周的水囊引产胎儿15例,采用免疫组织化学及光镜技术对人胎脑海马、纹状体、室下区、额叶、颞叶、枕叶、顶叶等部位的神经干细胞(NSCs)的分布、形态、生长方式以及数量进行检测.结果 32周胎脑海马、纹状体、室下区、额叶、颞叶、枕叶、顶叶等部位均存在NSCs.NSCs呈圆形、椭圆形及星形,以圆形及星形多见;细胞有0～2个突起不等,胞浆丰富,核呈圆形,染色质疏松,1～2个核仁不等.NSCs呈明显的区域性分布,可见群状、集落样、对称分裂、单个存在等生长方式,有的NSCs与其他NSCs形成突触联系.不同部位上述特点有所不同.海马、室下区、纹状体、额叶、颞叶、顶叶、枕叶等7个部位NSCs逐渐减少,检出率差异非常显著.结论 人胎脑的海马、室下区、纹状体、额叶、颞叶、顶叶、枕叶等部位均存在NSCs;且同一胎龄不同部位NSCs在分布、形态、生长方式及数量上存在差异.
-
人胎脑神经干细胞的体外分离、培养与鉴定
目的 探索人胎脑神经干细胞的体外分离培养条件,从而在体外大量增殖神经干细胞,并观察神经干细胞增殖和分化的特点.方法 采用含碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮细胞生长因子(EGF)的无血清培养技术,从14周自愿水囊引产人胎脑海马皮质中分离出神经干细胞,并进行培养、传代、分化观察,应用免疫荧光细胞化学技术对培养的细胞及其分化的细胞进行鉴定.结果 从14周人胎脑皮质中成功分离出具有自我更新和多分化潜能的神经干细胞,在无血清培养时细胞呈悬浮状态生长,形成神经球,该细胞具有连续增殖能力,可传代培养,表达神经巢蛋白抗原(Nestin);在含血清培养时诱导神经干细胞分化,分化后的细胞表达神经元细胞和胶质细胞的特异性抗原.结论 在含有EGF和bFGF的无血清培养液中,从人胎脑能分离培养出具有自我复制和分化潜能的神经干细胞,并能在体外扩增,可进一步用于基础及临床研究.
-
36周胎龄人胎脑不同部位神经干细胞变化特征研究
目的 观察同胎龄不同部位人胎脑神经干细胞(NSCs)的变化特征.方法 收集胎龄36周的水囊引产胎儿15例,采用免疫组织化学技术对人胎脑海马、纹状体、室下区、额叶、颞叶、枕叶、顶叶等部位NSCs的分布、形态、生长方式以及数量进行检测.结果 36周胎脑海马、纹状体、室下区、额叶、颞叶、枕叶、顶叶等部位均存在NSCs,NSCs呈圆形、椭圆形、星形、多角形及梭形,以圆形及星形多见;细胞0～4个突起不等,胞浆丰富,核呈圆形,染色质疏松,1～2个核仁不等.可见NSCs呈群状、集落样、对称分裂、单个存在等生长方式.海马、室下区、纹状体、额叶、颞叶、顶叶、枕叶等7个部位NSCs逐渐减少.结论 36周胎龄不同部位NSCs在分布、形态、生长方式及数量上存在差异.
-
电离辐射对小鼠胎脑NO含量及SOD活力的影响
目的 探讨孕鼠受γ射线照射后对旁效应器官胎鼠脑组织中NO含量和SOD活力的影响.方法 将孕9 d昆明小鼠随机分为7组:空白对照组、0.5 Gy全身照射组、0.5 Gy头部照射组、1.0 Gy全身照射组、1.0 Gy头部照射组、2.0 Gy全身照射组及2.0 Gy头部照射组,照射组用60Co治疗机对小鼠于孕9 d单次急性γ射线垂直照射,于孕18 d取胎鼠脑组织匀浆,测定其NO含量和SOD活性.结果 与空白对照组相比,2.0 Gy头部照射组胎脑组织匀浆中NO含量明显增加(P＜0.05),SOD活力显著下降(P＜0.05);同时1.0 Gy头部照射组较1.0 Gy全身照射组SOD活力高(P＜0.05);1.0 Gy头部照射组较1.0 Gy全身照射组NO含量低(P＜0.05);而2.0 Gy头部照射组较2.0 Gy全身照射组NO含量明显增加(P＜0.05);1.0 Gy全身照射组、2.0 Gy全身照射组NO含量均明显增加(均P＜0.05),SOD活力均显著下降(均P＜0.05).结论 孕鼠早期头部受到电离辐射后,诱发体内旁效应,NO自由基增加,SOD活力下降,导致脑组织神经发育损伤,其效应与全身受照时胎脑出现的损伤效应类似.
-
苯醋酸钠对胎鼠中枢神经系统生长的毒性作用
通过在大鼠整个怀孕期间苯醋酸钠灌胃,以观察苯醋酸(PA)对胎鼠和成熟大鼠中枢神经系统的损害情况.从而证实患苯丙酮尿病(PKU)母亲体内过多的PA是造成所产非PKU胎鼠中枢神经异常的发病原因.而脑胶质瘤细胞是和胎脑中枢神经细胞高度相似的肿瘤神经细胞,由此推测PA可能是一种对脑胶质瘤细胞有高度选择性毒性作用的化合物.
-
正常胎脑发育磁共振成像表现的研究进展
磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)技术不断发展,其越来越多的运用于胎脑发育的评估之中.胎脑发育是一个动态、复杂的过程,其结构在MRI上可清晰地表现出来.只有熟知胎脑发育的正常MRI表现,才能对发育异常做出准确判断.文中主要对胎脑的幕上脑实质、脑沟形成、脑室、胼胝体、灰质核团、颅后窝结构和髓鞘的发育及它们在MRI上的正常表现做一综述.
-
褪黑素受体在人胎脑中的分布
目的探讨两种褪黑素受体MT1、MT2在人胚胎脑组织中是否存在及存在的部位.方法收集胎龄为4～6个月的水囊引产胚胎16例,运用免疫组织化学和原位杂交方法,切片观察褪黑素受体MT1和MT2在不同脑区的分布. 结果褪黑素受体MT1在下丘脑、小脑皮层中存在;褪黑素受体MT2在下丘脑、枕叶和延髓中存在.结论人胚胎脑组织细胞中存在MT1、MT2两种褪黑素受体,表明脑组织是褪黑素作用的靶器官.
-
电离辐射诱发胎鼠的形态及胎脑组织甲基化结合蛋白MeCP2改变
目的 探讨电离辐射诱发体内旁效应损伤表现及可能机制.方法 将孕9d昆明小鼠随机分为7组:空白对照组、0.5Gy全身照射组、0.5Gy头部照射组、1.OGy全身照射组、1.0Gy头部照射组、2.0Gy全身照射组及2.0Gy头部照射组,照射组用60Co治疗机对实验小鼠于孕9d时进行单次急性垂直照射,于孕18d取胎鼠,观察胎鼠状态,记录胎鼠个数、大小,有无死胎、畸胎及流产等,取活胎快速断脑取脑组织.用western - blot方法检测胎鼠脑组织中MeCP2蛋白含量变化.结果 与空白对照组比较,电离辐射照射孕鼠后,随着剂量的增加,胎鼠死胎率、畸胎率、流产率呈上升趋势;除0.5Gy全身照射组外,其余各剂量组MeCP2表达量明显降低,组间无明显差异.结论 电离辐射作用于孕鼠后,能够诱发胎脑旁效应,无论是直接照射腹部还是作用头部,在一定剂量范围内,随着剂量的增加可能导致确定性效应和随机性效应增加,如死胎、畸胎、发育障碍发生率增加.
-
胎脑神经干细胞的培养及鉴定
检测3个月胎龄人胎脑各个解剖部分神经巢蛋白(Nestin)的表达,分离神经干细胞进行培养,诱导其分化,利用免疫荧光细胞化学技术对培养的神经干细胞及分化细胞进行鉴定.结果 在人胎脑室管膜下区、海马、纹状体、丘脑、嗅球、皮层部位发现数量不等的Nestin阳性表达细胞,从海马和皮层组织分离培养得到的大量悬浮生长具有连续增殖能力的神经干细胞球,能够传代培养,表达神经干细胞的标志物Nestin,经诱导分化为神经元和胶质细胞.
-
人胎脑神经干细胞特征性标记物的分布
目的:探讨人胎脑神经干细胞特征性标记物的分布.方法:收集胎龄16-36周水囊引产胎儿90例,采用免疫组织化学和光镜技术对人胎脑不同部位神经干细胞的特征性标记物分布进行检测.结果:不同胎龄胎脑均存在神经干细胞,Nestin和CD34蛋白双阳性NSCs仅存在于28周胎龄组的海马及室下区、32周胎龄组的海马、室下区及纹状体和36周胎龄组的纹状体,且这类NSCs主要呈圆形和椭圆形,大小不一.Nestin和CD133蛋白双阳性NSCs在不同的胎龄组以及同一胎龄组的不同部位其表达不同,胎龄越小,Nestin和CD133蛋白双阳性NSCs越多,32周胎龄组仅在海马部位发现1个此类NSCs,36周胎龄组的任何部位均未发现此类NSCs.结论:Nestin是人胎脑神经干细胞特征性标记物,CD133和CD34是人胎脑部分神经干细胞特征性标记物.
-
ndrg2在人胎前脑发育期的表达特点
目的系统分析ndrg2在胎前脑组织中表达分布的时空特点,以期明确ndrg2在胎前脑脑功能区的组织分布、细胞定位及表达趋势,为进一步研究其功能提供实验依据.方法收集引产4～7月胎脑组织标本,分别进行组织石蜡切片和总RNA提取,应用免疫组化方法和RT-PCR技术检测ndrg2在蛋白质及mRNA表达水平变化规律.结果免疫组化结果表明,在上述胎前脑脑区神经元细胞胞浆中均有ndrg2蛋白不同程度的表达.RT-PCR结果显示,ndrg2 mRNA在正常胎脑各脑区均有表达;随脑组织发育成熟,ndrg2表达水平增高,4月胎脑中海马ndrg2表达水平较高,而到7月额叶、顶叶则表达增强.以上结果表明,ndrg2基因在不同脑功能区广泛表达,但不同时期、不同胎脑功能区域表达有明显区别.结论在脑发育的过程中,ndrg2表达呈一定时空特点,ndrg2可能对神经细胞发育成熟有一定影响.
-
胎脑的磁共振成像研究应用进展
自1983年有学者首次将磁共振成像（magnetic resonance imaging，MRI）技术应用在胎儿上，由于其大视野、良好的软组织及空间分辨率、精确的数据分析，MRI 技术在产前胎儿检查中得到广泛应用。近年来随着新序列及先进的图像后处理技术应用使得胎儿 MRI（foetal MRI，FMRI）广泛应用于临床，成为部分宫内疾病诊断金标准，如：胎儿静脉窦血栓［1］等。尤其在胎儿孕中晚期，对胎脑发育、早期发现病变及预后评估极有优势。胎儿在发育是一个精细、复杂的过程，其中任意一环的偏移和阻滞均可导致胎脑发育的异常。此外，妊娠期的母体的状况、外界的环境（如：电离辐射、化学物质、病毒等）也影响着胎脑的发育。根据胎脑发育异常的病因分为先天性、获得性胎脑发育异常。借助 FMRI 的对宫内发育的情况的探测，能清晰观察胎脑异常具体组织结构及相关病变。本文将应用于 FM-RI 的磁共振技术、胎脑发育的正常及异常的 MRI 的重点观察征象及应用等方面研究进展综述如下。
-
ndrg2 mRNA在人胎脑组织中表达的时空特点
本研究利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测了ndrg2 mRNA在人胎脑组织中表达的时空特点,为进一步研究其功能提供实验依据.收集正常引产16-28周人胎脑组织标本,进行总RNA提取,应用RT-PCR方法半定量分析ndrg2基因在上述人胎脑组织中的表达水平和变化规律.RT-PCR结果显示:ndrg2 mRNA在正常人胎脑16、20、24和28周的各脑功能区均有表达,但随着发育,其表达水平有差别.在小脑、延髓和海马等部位,narg2 mRNA的表达水平在16周胎脑中较高.而在额叶和顶叶等部位,ndrg2 mRNA的表达水平在28周胎脑中达到高峰.以上结果表明,在人胚脑发育过程中ndrg2 mRNA从16～28周均有表达,但在不同脑后其表达存在一定差异,提示ndrg2基因对中枢神经系统的发育和成熟可能有重要影响.
-
免疫磁珠体外纯化人胎脑中CD133阳性干细胞的实验研究
为了探讨免疫磁珠体外纯化人胎儿脑内CD133阳性细胞的可行性,本研究取人胎儿脑室下区并制备单细胞悬液,采用磁珠分选法选择CD133阳性细胞群,台盼蓝染色观察活力并采用流式细胞仪鉴定纯化前后CD133的阳性表达率.结果显示,分选后所得细胞纯度为(85.57±1.66)%,回收率为(62.3±18)%,纯化前后细胞活力无显著性差异(P＞0.05).结论:联合应用CD133表面标志及免疫磁珠分选系统可有效地从人胎儿脑组织中直接分离得到高纯度的CD133阳性干细胞,细胞活力不受影响.
