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转化生长因子α、β1体外诱导人卵泡膜细胞的凋亡及调控
近年来的研究表明,卵泡膜细胞中产生的转化生长因子β1(TGFβ1)对卵巢功能有重要的调节作用。同时,TGFβ1和TGFα的同时存在,可诱导体外无血清培养的大鼠卵泡膜细胞发生凋亡[1]。本研究旨在探讨TGFβ1和TGFα与人卵泡膜细胞凋亡的关系,以及细胞内抑制凋亡基因bcl-2表达的变化。 一、资料和方法 1.研究对象:本研究收集子宫内膜癌、子宫颈癌患者共10例,平均年龄35~50岁。将经腹部行广泛子宫切除时从切除的卵巢中切下肉眼可见的大卵泡(直径约为15 mm)26个,立即置于预冷的磷酸缓冲液中。术中切除组织冰冻切片病理检查报告,10例患者的双侧卵巢均无癌细胞转移及病理性改变。手术于月经周期的第9~14天进行。 2.试剂:TGFα、TGFβ1购自美国R&D公司;抗bcl-2多克隆抗体购自北京中山生物公司;链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶免疫组织化学(SP)染色试剂盒购自福州迈新公司。 3.卵泡膜/间质细胞的获取和培养:参照Lobb等[2]的方法进行。用胶原酶1和牛胰腺DNaseⅡ消化,于37℃、5%二氧化碳箱内培养。
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卵巢癌细胞与成纤维细胞相互作用对明胶酶释放与活化的影响
明胶酶-A(MMP-2)和明胶酶-B(MMP-9)具有降解细胞外基质的主要成分--Ⅳ型胶原和明胶的功能,参与恶性肿瘤的侵袭与转移.有研究发现,明胶酶免疫组织化学(免疫组化)着色重的区域集中在癌巢的边缘,提示卵巢癌细胞与成纤维细胞的相互作用,对明胶酶的释放和活化产生影响[1].我们观察了卵巢癌细胞与成纤维细胞在非接触性和接触性共培养前后,明胶酶基因和蛋白表达的变化,现将结果报道如下.