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人脐动脉平滑肌细胞复合脱细胞基质构建海绵体平滑肌的动物实验研究
目的 探讨脐动脉平滑肌细胞(HUASMC)与阴茎海绵体脱细胞基质(ACCM)复合构建海绵体平滑肌的可行性.方法 以1%的Triton-X100与0.1%NH3H2O混合液对兔阴茎海绵体进行脱细胞处理,制备ACCM.采用贴块法分离、培养、扩增HUASMC.HUASMC以30×10<'6>/ml密度接种ACCM,细胞-ACCM体外复合10 d后将复合物植入9只5周龄BALB/C裸鼠背部皮下,术后10、20和40 d分别对移植物进行HE染色、免疫组织化学染色和器官浴槽实验,评价其裸鼠体内构建情况.结果 ACCM为白色圆柱状,镜下为富含胶原的疏松多孔结构,不含细胞成分.HUA-SMC与ACCM相容性良好,HUASMC在与ACCM接触部位充分伸展,并沿ACCM窦隙活跃生长.9只裸鼠均存活,植入部位无感染,无植入物排斥发生.随培育时间延长,裸鼠体内ACCM逐渐降解,植入的HUASMC分化形成结构良好、交错排列的平滑肌组织.器官浴槽实验显示,构建组织对去氧肾上腺素和电刺激均表现出收缩功能,去氧肾上腺素和电刺激所诱导的大收缩力分别为(3.64±0.18)和(2.50±0.21)g.结论 HUASMC作为种子细胞与ACCM复合可构建出具有一定形态和功能的组织工程海绵体平滑肌.
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脂质代谢异常影响阴茎海绵体平滑肌ATP合酶表达的研究
目的 探讨脂质代谢异常对阴茎海绵体平滑肌中ATP合酶表达的影响. 方法 2010年7月至2011年6月,体外培养人阴茎海绵体平滑肌原代细胞,游离脂肪酸处理24 h后,油红O检测海绵体平滑肌细胞脂质沉积情况,蛋白质印迹法检测ATP合酶表达情况；4周龄C57BL/6雄性小鼠12只随机分为2组,高脂饮食组和标准饮食的对照组,8周后尾静脉取血检测各组小鼠血清甘油三酯、血清胆固醇水平；蛋白质印迹法检测阴茎海绵体中ATP合酶以及相关分子p-Akt的表达情况. 结果 游离脂肪酸处理后的人海绵体平滑肌细胞中出现大量脂质沉积,ATP合酶及p-Akt的表达量与对照组相比明显下调(0.47±0.06与1.00±0.15；0.35±0.04与1.00±0.03),差异均有统计学意义(P＜0.05)；高脂饮食组小鼠的血清甘油三酯及血清胆固醇水平与对照组相比明显升高[(10.87±0.67) mmol/L与(1.32±0.02) mmol/L；(4.78±0.43)mmol/L与(2.78±0.03) mmol/L],差异均有统计学意义(P＜0.05),同时高脂饮食组小鼠阴茎海绵体中ATP合酶及p-Akt的表达量与对照组相比也明显下调(0.25±0.08与1.00±0.04；0.22±0.02与1.00±0.02),差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 脂质代谢异常能下调阴茎海绵体中ATP合酶的表达,可能是代谢因素引起勃起功能障碍的关键结点之一.
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磷酸二酯酶5抑制剂对肺和外周血管的作用
磷酸二酯酶5(PDE 5)抑制剂除对海绵体平滑肌有松弛作用外,对肺和外周血管张力也起到调节作用.在运动诱发血管扩张功能受损的心力衰竭患者,PDE 5抑制剂能改善肱动脉的内皮-依赖、血流-介导的血管扩张功能.对肺动脉高压患者,PDE 5抑制剂能促进一氧化氮(NO)诱导的肺血管阻力和肺动脉压力的改善,而不引起心肌功能的改变.而且,高血压患者应用PDE 5抑制剂可降低外周收缩和舒张血压以及动脉的僵硬度.这些初步的发现提示可能的临床前景,但是,PDE 5抑制剂对内皮-依赖血管扩张受损性疾病的潜在治疗作用尚待进一步研究.
