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  • 普萘洛尔对大鼠肝大部分切除术后肠道细菌移位的影响

    作者:邓浩;陈文哲;潘卫东

    目的 探讨普萘洛尔对大鼠肝大部分切除术后肠道细菌移位的影响.方法45 只大鼠按随机数Χ表法随机分为假手术组(SO 组)、肝大部分切除组(PH 组)和肝大部分切除+普萘洛尔组(PHP 组),每组15 只.SO 组大鼠术后给予生理盐水2 ml 灌胃;PH 组和PHP 组大鼠切除肝左叶和肝中叶,切除的肝脏体积<为大鼠肝脏体积的70%,PH 组术后给予生理盐水2 ml 灌胃,PHP 组术后给予5 mg/ml 的普萘洛尔溶液2 ml 灌胃,12 h 后各组重复给药1 次.术后24 h 再次开腹,测定门静脉压力,抽取门静脉血检测血浆内毒素、D-乳酸变化,摘取肠系膜淋巴结行细菌培养及鉴定,计算细菌移位率,切取小肠壁用光镜和电镜观察小肠黏膜损伤情况,并进行小肠黏膜损伤评分.采用单因素方差分析和LSD-t 检验比较3 组大鼠门静脉压力、血浆内毒素及D-乳酸变化;采用Fisher 确切概率法比较3 组细菌移位率;采用Kruskal Wallis test 和Mann-Whitney 非参数检验比较小肠黏膜损伤评分变化.结果PH 组大鼠门静脉压力(13.8±2.4)cm H2O(1 cmH2O=0.098 kPa),显著高于SO 组的(8.2±2.0)cm H2O和PHP 组的(10.8±2.4)cm H2O(t=6.84、3.38,均为P<0.01).PH 组大鼠血浆内毒素(13.7±4.1)pg/ml,高于SO 组的(2.0±0.5)pg/ml 和PHP 组(6.8±2.0)pg/m(l t=9.44、5.26,均为P<0.01).SO 组、PH 组、PHP 组大鼠分别有1、8、3 只发生肠道细菌移位,细菌移位率分别为7%、53%、20%,PH 组大鼠细菌移位率与SO 组和PHP 组比较差异均有统计学意义(均为P<0.05),细菌培养主要为大肠埃希菌.PH 组的血浆D-乳酸水平(26±5)mg/ml,高于SO 组的(6±3)mg/ml 和PHP 组的(15±4)mg/m(l t=13.08、6.49,均为P<0.01).PH 组大鼠小肠黏膜损伤评分的中位数(5 分)较SO 组(1 分)和PHP 组(3 分)高(U=47.33、38.64,均为P<0.01).SO 组大鼠小肠黏膜完整,连续的黏液层覆盖在上皮细胞上;PH 组表现为不同程度的绒毛破坏,绒毛缩短、局灶性损害,细胞线粒体肿胀或消失、线粒体脊退化,细胞间隙增宽等变化;PHP 组大鼠上述几项指标介乎于SO 组和PH 组之间.结论普萘洛尔能降低大鼠肝大部分切除术导致的门静脉压力升高,增强肠黏膜屏障功能,有效减少术后肠道细菌移位的发生率,因而术后普萘洛尔灌胃可用于预防大鼠肝大部分切除术后感染.

  • 小鼠肝脏大部分切除后改良再生模型的建立

    作者:施国明;蔡加彬;俞静娴;柯爱武;董兆如;张弛;张鹏飞;邱双健;孙惠川;周俭;樊嘉

    目的:探讨小鼠肝脏大部分切除后再生模型的改良制作方法。方法:将8~10周龄雄性C57BL/6小鼠腹腔麻醉后,用带针6-0 proline缝线环绕肝左外叶、肝中叶共同肝蒂,距肝蒂0.2 cm穿肝右中叶表面固定,结扎肝蒂,于结扎线远侧0.2 cm处切除小鼠肝脏左外叶、肝中叶(左、右)。观察小鼠术后成活率以及术后3d、7d、14d小鼠肝脏质量。结果:成功建立小鼠肝脏大部分切除模型,该模型切除小鼠肝左外叶、肝中叶(左、右),切除肝质量占肝总质量的66.7%,术后小鼠存活率100%。术后小鼠剩肝代偿性增生,术后第3天恢复至原肝总质量的58.2%,第7天恢复至原肝总质量的78.0%,术后第14天恢复至原肝总质量的93.2%。结论:本研究建立的改进型小鼠肝脏大部分切除后再生模型,具有简便、可操作性强、成功率高等优点。

  • 右美托咪定对肝大部分切除术后小鼠远期认知功能的影响

    作者:李继峰;李志国;王习海

    目的:探讨右美托咪定对肝大部分切除术(PH)后小鼠远期认知功能的影响。方法成年雄性 C57BL/6J 小鼠40只,采用随机数字表法分为四组,每组10只:对照组(C 组)、PH 组、生理盐水组(NS 组)和 Dex 组。PH 术模型制备后2 d,C 组和 PH 组进行 Morris 水迷宫试验,4次/天,共4 d;Dex 组小鼠术毕苏醒即刻经腹腔注射 Dex 25μg·kg-1·d-1,NS 组给予等容量生理盐水,均连续30 d 后,Dex 组和 NS 组进行 Morris 水迷宫试验,4次/天,共4 d。检测四组小鼠海马组织湿/干重比(W/D)和总含水量(TWC);RT-PCR 和 Western blot 分别检测海马组织 caspase-12 mRNA 及蛋白表达水平;原位末端细胞凋亡检测法(TUNEL 法)检测海马组织细胞凋亡指数(AI)。结果与第1天比较,C 组、NS 组和 Dex 组小鼠第3、4天逃避潜伏期及游泳距离均明显缩短(P <0.05);与 C 组比较,PH 组小鼠第3、4天逃避潜伏期及游泳距离均明显延长(P <0.05),海马组织W/D、TWC 及 AI 均明显升高(P <0.05),海马组织 caspase-12 mRNA 及蛋白表达水平均明显升高(P <0.05)。与 NS 组比较,Dex 组第3、4天小鼠逃避潜伏期及游泳距离均明显缩短(P <0.05),海马组织 W/D、TWC 及 AI 均明显降低(P <0.05),海马组织 caspase-12 mRNA 及蛋白表达水平均明显降低(P <0.05)。结论 Dex可改善 PH 后小鼠远期认知功能,其机制可能与其抑制海马组织caspase-12介导的细胞凋亡有关。

  • 大鼠肝再生过程中miR-27b与Tmub1表达相关性研究

    作者:李光耀;刘孟刚;赵晓彪;陈景祥;匡怡;陈平

    目的 探讨miR-27b与Tmub1在大鼠70%肝大部分切除术肝脏再生过程中的表达相关性.方法 将SD雄性大鼠(180±20)g,随机分为实验组(肝部分切除术,partial hepatectomy,PH)和假手术组(剖腹探查手术,exploratory laparotomy),依次提取0、12、24、48及72h原代肝细胞并留取组织标本,利用real-time PCR检测不同时间段肝脏内miR-27b与Tmub1 mRNA的量,并利用Western blot检测不同时间段肝脏内Tmub1蛋白含量,从而分析出miR-27b与Tmub1蛋白表达的时间相关性;将miR-27b模拟物转染入肝细胞,采用荧光素酶报告基因检测系统观察miR-27b对Tmub1表达的影响.结果 肝切除12、24、48及72 h后PH组miR-27b表达较假手术组均显著下降(P<0.05),而该相同时相点Tmub1 mRNA及蛋白水平显著增高(P<0.05);改变miR-27b的表达后,含Tmub1基因序列的报告基因荧光素酶活性明显下降(P<0.05).结论 肝再生过程中miR-27b与Tmub1的表达呈负相关,miR-27b可能参与了Tmub1的表达调控过程.

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