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抗环瓜氨酸肽抗体检测在关节病中的临床应用
蛋白翻译后修饰在自身免疫性疾病启动过程中的作用是近年研究的一大发现.在类风湿关节炎(RA),精氨酸在多肽精氨酸脱氨酶的作用下使精氨酸残基脱氨后形成瓜氨酸,经瓜氨酸化修饰后的自身抗原暴露某些抗原表位并与HLAⅡ类抗原分子结合,从而启动自身免疫反应终导致关节破坏[1].已证实瓜氨酸是RA血清抗聚角蛋白微丝蛋白(filaggrin)相关抗体的主要抗原决定簇,这些抗体对RA的诊断具有高度特异性,并可在RA早期出现.2000年环瓜氨酸肽(cyclic citrullinated peptide, CCP)的人工合成使抗瓜氨酸抗体检测在临床广泛应用成为可能.目前美国食品和药物管理局已批准第二代商品化的抗CCP抗体ELISA试剂盒.文献表明抗CCP抗体检测对包括RA在内的多种关节病的诊断、鉴别诊断及预后判断都有重要临床意义.
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抗环瓜氨酸肽抗体ELISA检测方法的建立及临床意义
类风湿关节炎(RA)是一种致畸性疾病,发病2年即可出现不可逆的骨关节破坏[1].现行的诊断标准主要依靠临床表现、X线检查以及类风湿因子(RF)检测,符合此标准时病人常已出现骨关节破坏,加之RF缺乏特异性,都不利于早期诊断早期干预治疗,因此临床需要能用于RA早期诊断的实验室指标.自从证实抗核周因子(APF)是RA的特异性抗体并可在疾病早期出现后,又陆续发现抗角蛋白抗体(AKA)2-51、抗聚角蛋白微丝蛋白(cytokeratin filamentaggregating protein,filaggdn)抗体(AFA)[6]以及抗Sa抗体[7],这些都对诊断RA具有高度特异性,都可在疾病早期出现.新近认为上述抗体在化学结构上具有相关性,它们的表位都含有瓜氨酸,故称之为瓜氨酸相关自身免疫系统[8].此系统可能在RA的发病及发展中起作用.2000年,国外首次报道根据filaggrin的cDNA序列合成一条含瓜氨酸的环肽(cyclic citrullinated peptide,CCP)可用于ELISA检测,并成功地在RA血清中检测出抗CCP抗体(anfi-CCP)[9].目前国外仅有数篇报道,国内尚无有关报道.我们以人工合成的CCP为底物,自行建立了ELISA方法,检测了RA病人血清中的抗CCP抗体.
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抗聚角蛋白微丝蛋白抗体的检测在类风湿关节炎诊断中的意义
目的探讨抗聚角蛋白微丝蛋白抗体(AFA)对RA诊断的意义,并比较其与抗核周因子抗体(APF),抗角蛋白抗体(AKA)以及HLA-DR4之间的相关性.方法用免疫印迹法(WB)检测157例类风湿关节炎(RA)血清标本和104例对照血清,包括系统性红斑狼疮(SLE)、干燥综合征(SS)、骨关节炎(OA)等的AFA.APF和AKA用间接免疫荧光法检测.结果 157例RA病人的AFA敏感性和特异性分别为36.3%,93.4%,与疾病对照组和正常对照组相比,差异有显著性(P<0.05).57例AFA阳性的血清中,其中AKA同时阳性的有36例,重叠率为63.2%;APF同时阳性的有38例,重叠率为66.7%;HLA-DR4同时阳性的有30例,重叠率为52.6%.统计学分析证实AFA与AKA、APF及HLA-DR4之间有相关性.结论 AFA对RA具有很高的特异性,可用于RA的临床诊断.AFA与APF、AKA及HLA-DR4有相关性.AFA不能完全替代APF和AKA,三项临床检测可互相补充,提高RA的诊断率.