首页 > 文献资料
-
NeuroD1基因A45T多态性与自身抗体阴性的酮症倾向糖尿病的关系
目的 探讨NeuroD1基因A45T多态性与胰岛自身抗体阴性的酮症倾向糖尿病(KPD)的关系. 方法 应用PCR-测序法对296例GAD-Ab和IA-2Ab阴性酮症倾向糖尿病患者(KPD组)和399例非糖尿病对照者(NC组)检测了NeuroD1基因外显子2的A45T基因型,对等位基因和基因型频率进行分析. 结果 自身抗体阴性的KPD患者NeuroD1基因A45T的AA基因型频率和A等位基因频率与NC组比较差异均无显著性.对患者进行年龄和性别分层后仍未发现NeuroD1基因A45T基因型和等位基因频率与对照组有差别. 结论 在本组汉族人中,NeuroD1基因的Ala45Thr多态性与自身抗体阴性KPD无相关性.
-
pEGFP-NeuroD重组质粒的构建及其在肝癌细胞中的表达
神经分化因子1(NeuroD-1)又名B细胞E盒转录激活因子2(Beta-2),属于B类碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)转录因子家族.NeuroD-1蛋白与广泛存在的A类bHLH蛋白E47形成异二聚体,激活胰岛素基因的转录,对胰腺β细胞的发育及生理功能有重要作用,被认为是治疗糖尿病的候选基因之一.
-
NeuroD1基因过表达对大鼠神经干细胞增殖和分化的影响
[目的]神经干细胞(neural stem cells,NSCs)是一群能自我更新并具有多种分化潜能的细胞,可分化成神经元、少突胶质细胞和星形细胞.NSCs分化受多种转录因子调控网络的影响,本实验旨在研究神经分化因子1(neuronal differentiation1,NeuroD1)过表达对NSCs增殖和分化的影响.[方法]分离培养原代大鼠NSCs,免疫荧光染色鉴定NSCs.将携带NeuroD1基因的逆转录病毒转染NSCs,QPCR检测NeuroD1过表达神经干细胞系的构建.QPCR和MTT检测过表达NeuroD1对NSCs增殖和分化的影响;光镜下观察分化细胞形态变化.[结果]第3代NSCs经免疫荧光染色证实所培养细胞为NSCs,可分化为神经元和星形胶质细胞.QPCR结果显示NeuroD1 mRNA在NSCs-NeuroD1组表达高,与其他两组有统计学差异(P＜0.05). QPCR结果显示MAP2在NSCs-NeuroD1组表达高,与其他两组有统计学差异(P＜0.05).MTT结果显示NSCs-NeuroD1组细胞增殖水平高,与其他两组有统计学差异(P＜0.05).光镜下可见NSCs-NeuroD1组细胞多分化为神经元细胞.[结论]成功构建NeuroD1过表达神经干细胞系.NeuroD1可促进NSCs增殖和向神经元方向分化.
-
神经分化因子1 (Ala45Thr)基因多态性与2型糖尿病易感性关系的meta分析
目的 通过meta分析评估神经分化因子1(Neuro1D1)Ala45Thr基因多态性与2型糖尿病的关联性.方法 通过系统检索PubMed、EMBASE、CNKI、万方数据库、维普数据库等中英文数据库,在Kavvoura等已发表1999年至2004年NeuroD1 (Ala45Thr)基因多态性与2型糖尿病关联性的meta分析基础上,纳入2004年至2012年有关NeuroD1 (Ala45Thr)基因多态性与2型糖尿病相关性的研究,以2型糖尿病组和正常对照组基因分布的OR值为统计量,应用Rev Man 5.0软件对研究结果进行异质性检验和相关数据的合并,终纳入13篇病例对照试验文献.结果 共入选2型糖尿病患者3 896例,对照组3 186名.Meta分析结果显示,黄种人2型糖尿病与对照组Thr45Thr45/(Ala45Thr+Ala45Ala45) OR值为3.16(95％CI0.99 ～10.11),白种人OR值为1.09(95％ CI0.90～ 1.32),差异均无统计学意义(P＞0.05) 而2型糖尿病组和对照组G/A等位基因频率OR值为0.85(95％ CI0.72 ～0.99)/1.18(95％ CI.07 ～ 1.38),差异有统计学意义(Z=2.02,P=0.04).结论 NeuroD1 (Ala45Thr)位点A等位基因可能是2型糖尿病的危险因素.
-
pEGFP-NeuroD重组质粒在肝癌细胞中的表达及其功能探讨
目的:利用含绿色荧光蛋白的重组表达质粒pEG-FP-NeuroD做基因转染,观察其在肝癌细胞(HepG2)中的表达,探讨其在体外诱导肝细胞分泌胰岛素的可能性.方法:将酶切验证正确的重组质粒pEGFP-NeuroD,用脂质体法转染3种不同葡萄糖浓度培养的HepG2细胞,荧光显微镜下观测各组绿色荧光蛋白的表达情况;采用RT-PCR方法检测HepG2细胞中NeuroD-1及insulin mRNA的表达;采用Western Blot方法检测EGFP-NeuroD融合蛋白的表达.结果:①重组质粒体外成功转染入HepG2细胞,在荧光显微镜下可见强绿色荧光蛋白的表达,重组质粒转染率在30%～40%之间;②RT-PCR方法及Western Blot在3种不同葡萄糖浓度培养的细胞组中均榆测到NeuroD-EGFP融合蛋白的表达,其中RT-PCR方法扩增出NeuroD-1目的片段大小为634 bp,而融合蛋白Mr大小约为67×103,但是3组间蛋白表达量均无明显差异;③RT-PCR法未检测到肝癌细胞胰岛素的分泌.结论:重组表达质粒pEGFP-NeuroD可体外转染入HepG2细胞,功能探讨提示单一NeumD-1表达质粒的转染可能不足以诱导肝癌细胞分泌胰岛素.
