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重组葡激酶对重症急性胰腺炎大鼠心肌损伤的治疗作用
[目的]研究重组葡激酶(r-Sak)对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)的发展及心肌损伤的干预作用,探讨其作用机制.[方法]63只SD大鼠随机分为假手术(A)组(n=9),模型对照(B)组(n=27),r-Sak治疗(C)组(n=27).SAP模型采用5%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射方法建立.ELISA法测定6、12、18 h各时点血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)及心肌肌钙蛋白(CTn1)水平,免疫组化法检测术后6、12、18 h各时点心肌核转录因子-κB(NF-κB)的活化情况,光镜及电镜下观察胰腺及心肌组织的病理变化.[结果]大鼠从术后6 h开始出现CTn1、CK-MB升高,治疗组各时点较对照组明显下降(P＜0.05).IL-6、TNF-α水平亦从术后6 h开始升高,其变化在时点上与CTn1、CK-MB的变化具有一致性,治疗组各时点与对照组相比明显下降(P＜0.05).治疗组胰腺及心肌组织的出血坏死减轻,微血管血栓的形成减少.[结论]r-Sak能减轻SAP的病变程度和心肌损伤,可能具有治疗SAP及预防心肌损伤等并发症的作用,特异性溶栓剂的应用可能成为治疗SAP的新途径.
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益活清胰汤与葡激酶在大鼠重症急性胰腺炎治疗中的协同作用
[目的]研究葡激酶(r-Sak)和益活清胰汤对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)的治疗作用及2药合用的协同作用.[方法]162只SD大鼠随机分为假手术(A)组(n=18)、造模(B)组、益活清胰汤治疗(C)组、r-Sak治疗(D)组及益活清胰汤合用r-Sak治疗(E)组(均n=36).每组随机选9只用于测定18 h存活情况,SAP造模术后6、12、18h各取9只测定胰腺血流量,计算腹水量,测定血清淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LPO),并在光镜下观察胰腺病理变化.[结果]A、B、C、D和E组大鼠18 h存活数分别为9、2、6、7、8只.A、C、D、E 4组SAP术后6、12、18 h AMY、LPO、腹水均较B组明显降低,C组较D组低,E组较C、D组低(均P＜0.05).术后各时点B组胰组织血流量呈逐渐下降趋势,B、C、D、E组较A组显著下降(P＜0.05).C、D、E 3组各时点胰组织血流量降低值＜B组,D组＜C组,E组＜C、D组(均P＜0.05).C、D、E组胰腺的病理损伤程度较B组减轻.[结论]r-Sak及益活清胰汤均对大鼠SAP具有治疗作用,且2药具有协同作用.
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浅谈溶栓药的特点及应用
在1959年已经用链激酶(SK)治疗心肌梗死,在80年代前可供使用的溶栓药除SK外还有尿激酶(UK),80年代以来,先后有基因重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)及其突变体、TNKt-PA前尿激酶(Pro-UK)和葡激酶(SAK).
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重组葡激酶的表达纯化及纤溶活性鉴定
目的:构建葡激酶( Staphylokinase,SAK)基因的原核表达质粒,在大肠杆菌中表达SAK蛋白质,纯化并初步鉴定其生物学活性.方法:基于生物信息学方法分析优化基因序列,使用基因合成技术合成SAK基因,转化感受态大肠杆菌B834菌株,使在其中表达,利用离子交换柱,分子筛(Superdex 75)等进行分离纯化,应用纤维蛋白平板溶圈法测定评价其生物活性.结果:SAK在大肠杆菌中以可溶上清的方式高效表达,利用离子交换柱和分子筛等纯化效果良好,纯度达95％,体外实验显示其纤溶活性与尿激酶标准品相当.结论:应用全基因合成经过优化的基因可在大肠杆菌系统中高效上清表达具有较高纤溶活性的SAK.
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葡激酶研究进展
葡激酶是由金黄色葡萄球菌分泌的新一代天然的纤溶酶原激活剂,具有高效的溶栓活性和纤维蛋白特异性.进入机体后引起的免疫反应是限制其临床使用的主要原因,近年来生物工程技术的发展为解决这些问题提供了新的重要途径.现将从结构特点、溶栓机制、免疫原性及分子结构改造等方面重点介绍葡激酶的研究进展.
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重症急性胰腺炎大鼠心肌核因子-κB激活及重组葡激酶和益活清胰汤的干预作用
目的:研究重症急性胰腺炎(SAP)心肌功能损害时心肌NF-KB的活化及葡激酶的干预作用.方法:63只SD大鼠随机分为假手术组(n=9)、对照组(n=27)、葡激酶合用益活清胰汤治疗组(n=27),SAP模型采用5%的牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射方法建立.ELISA法测定6 h、12 h、24 h各时点血TNF-α、IL-6含量,RT-PCR检测心肌NF-KBmRNA的表达,免疫组化法检测心肌NF-kB蛋白的表达,HE染色光镜下观察胰腺及心肌组织的病理变化.结果:术后6h大鼠心肌NF-kBmRNA及NF-KB蛋白表达异常增高,TNF-α、IL-6呈进行性升高,治疗组用药后心肌NF-KBmRNA及蛋白表达下调,与对照组相比(P＜0.05),血TNF-α、IL-6明显下降,与对照组相比(P＜0.05),治疗组胰腺及心肌组织的病理变化减轻.结论:SAP大鼠的心肌损伤可能与循环中TNF-α、IL-6水平升高导致的心肌NF-KB活化有关,益活清胰汤合用葡激酶对SAP并发的心肌损伤具有防治作用.
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重组葡激酶治疗急性心肌梗死的疗效观察
目的 比较重组葡激酶(r-SAK)和重组组织型纤溶酶原激活物(r-tPA组)溶栓治疗急性心肌梗死(AMI)的疗效.方法 选择2003年12月至2004年12月我院收治的无溶栓禁忌征的首次急性心肌梗死患者48例,随机分为试验组(r-SAK组)和对照组(r-tPA组)各24例.两组溶栓后90分钟行CAG,以TIMI血流分级法进行再灌注评估,判断血管是否开通.结果 r-SAK组血管开通率(83.33%vs70.83%,p=0.308),TIMI 3级率(75.00%vs 62.25%,p=0.355),差异均无统计学意义.r-SAK组出血并发症发生率略低于r-tPA组(8.33%vs 25.00%,p=0.125),但无统计学意义.结论 急性ST段抬高性心肌梗死应用r-SAK溶栓治疗具有相当于r-tPA同等效果的IRA血管开通率.
