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纺锤体组装关卡基因hsMAD2在人肝细胞肝癌中的表达及其意义
目的:探讨人原发性肝细胞肝癌中纺锤体组装关卡hsMAD2蛋白的表达及其意义.方法:采用免疫组织化学SABC法检测了hsMAD2在39例HCC组织、26例肝硬化组织和3例HCC细胞系的表达情况,并分析了其阳性率与HCC病理分级的关系.结果:59%(23/39)的HCC组织表达hsMAD2,而癌旁肝组织的阳性率为100%(15/15);肝硬化为92%(24/26),3例HCC细胞系均未见表达.hsMAD2在HCC中表达率与HCC病理分级无关,而在癌组织与癌旁肝组织(χ2=6.888,P＜0.01)、肝硬化组织(χ2=8.656,P＜0.01)之间的差异具有显著性.结论:hsMAD2在HCC组织中的表达率相对于癌旁肝组织和肝硬化组织显著降低,提示该蛋白的表达可能与早期HCC发生相关.
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非放射性PCR-LIS-SSCP技术快速分析肝癌患者p53基因249位密码子的突变
目的应用非放射性PCR-LIS-SSCP方法快速分析肝癌患者p53基因第249位密码子突变.方法采用PCR-LIS-SSCP方法,研究了16例来自中国广西、江苏启东和上海地区肝癌患者p53基因第249位密码子的突变情况,并用限制性内切酶和DNA测序对PCR-LIS-SSCP方法所获得的结果进行了验证.结果从16例肝癌病人中检出3例在该位点具有突变.其中广西地区的4例肝癌病人有1例发生突变,江苏启东地区的4例肝癌病人有1例发生突变,上海地区的8例肝癌病人有1例发生突变. 结论用该方法检测肝癌病人p53基因第249位密码子突变频率为18.8%(3/16),为该方法应用于候选新基因的未知突变研究奠定了基础.
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肝细胞肝癌与癌旁肝组织胰岛素受体结合特性的对比研究
目的研究肝细胞肝癌与癌旁肝组织胰岛素受体密度与亲和力的差异.方法采用体外受体结合实验,通过S catchard分析,计算两种细胞膜的大结合容量(Bmax)与平衡解离常数(Kd值).结果肝癌细胞膜胰岛素受体Bmax为1.94±0.64pmol/mg蛋白,Kd值为2.12±0.62nmol/L;癌旁肝组织细胞膜胰岛素受体Bmax为1.42±0.57pmol/mg蛋白 ,Kd值为2.21±0.78nmol/L.肝癌细胞膜胰岛素受体Bmax显著高于癌旁组织细胞膜( P＜0.05),而肝细胞肝癌与癌旁肝组织细胞膜的胰岛素受体亲和力无显著性差异(P ＞0.05).结论肝细胞肝癌较癌旁肝组织表达胰岛素受体增高,而受体亲和力无明显差异.
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GRP94在HBV感染的人肝细胞肝癌中的表达及意义
目的：探讨葡萄糖调节蛋白（ glucose-regulated protein 94，GRP94）在乙型肝炎病毒（ hepatitis B virus， HBV）感染的人肝细胞肝癌（ human hepatocellular carcinomas，HCC）中的表达及其意义。方法：酶联免疫吸附试验（ enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）和实时荧光定量 PCR（ real -time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RTQF-PCR）方法来检测HCC患者血清。采用免疫组织化学（ immunohistochemistry， IHC）方法、蛋白质印迹（ Western blot）方法及半定量逆转录聚合酶链反应（ reverse transcrition -polymerase chain reaction，RT-PCR），来探讨GRP94在HBV病毒感染的HCC和癌旁组织中的表达。结果：GRP94在癌旁组织中低表达，而在HCC中高表达，两者在Western blot、IHC及RT-PCR中的表达，其差异有统计学意义。同时HCC中GRP94的表达强度与肝癌患者肿瘤TNM分期（P=0.02）、肿瘤大小（P=0.01）、肿瘤结节的数目（P=0.02）、HBV-DNA的拷贝数值（P<0.01）和血清甲胎蛋白（alpha-fetal protein，AFP）水平（P=0.02）相关，但与患者的性别、年龄差异无关。结论：GRP94与HCC临床病理特征存在一定的相关性，对HCC治疗、预后判定具有一定指导意义。
