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结核分枝杆菌rrs和rpsl基因突变与二线氨基糖苷类耐药关系分析
目的：了解耐二线氨基糖苷类结核分枝杆菌临床分离株rrs与rpsl基因突变特征及其与耐药的关系。方法对136株活动性肺结核患者痰标本分离的结核分枝杆菌进行菌型鉴定及结核分枝杆菌药敏试验，提取耐二线氨基糖苷类结核分枝杆菌DNA，应用PCR扩增rrs和rpsl目的片段，并进行测序、比对验证。结果从136株临床结核分枝杆菌中筛选出耐二线氨基糖苷类菌株25株（18.3%，25/136），其中耐卷曲霉素13株（9.56%，13/136）、耐卡那霉素9株（6.62%，9/136）、耐卷曲霉素和卡那霉素2株（1.47%，2/136）、耐卷曲霉素、卡那霉素、阿米卡星1株（0.73%，1/136）。经测序分析，25株均存在rrs和（或） rpsl基因突变（100%，25/25），其中双基因联合突变3株，共计两种类型：rrs A1401G和rpsl AAG43AGG、AAA121AAG （2株）；rrs A1401G和rpsl AAG88AGG、AAA121AAG（1株）；rpsl单基因双突变3株，共计两种类型：rpsl AAG43AGG、AAA121AAG（2株）；rpsl GGT11GTT、AAA121AAG（1株），rpsl 基因的GGT11GTT突变尚未见相关文献报道，为新的突变位点；余19株为单基因单突变rpsl AAA121AAG。结论结核分枝杆菌对二线氨基糖苷类耐药与rrs和rpsl基因突变有关，rrs A1401G与rpsl基因GGT11GTT突变为进一步研究耐药机制以及耐药结核病的快速检测提供了依据。
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结核分枝杆菌 rpsl 和 rrs 基因突变与链霉素耐药关系研究
目的：了解结核分枝杆菌 rpsl 和 rrs 基因突变的特征及其与耐链霉素的关系。方法对136例活动性肺结核患者痰标本进行菌型鉴定及结核分枝杆菌药敏试验，提取结核分枝杆菌 dna，应用 Pcr 扩增 rpsl 及 rrs 基因片段，并进行dna 序列分析。结果结核分枝杆菌药物敏感试验显示136株结核分枝杆菌中，44株耐链霉素，92株对链霉素敏感，耐链霉素率为32.3%。44株对链霉素耐药的菌株中，9株(20.45%,9/44)单耐链霉素，8株(18.18%,8/44)为多耐药，27株(61.36%,27/44)为耐多药。经测序分析，38株存在 rpsl 和（或）rrs 基因突变，其中21株（55.26%，21/38）为 rpsl基因单位点突变，17株（44.74%，17/38）为 rpsl 基因多位点突变。rpsl 多位点突变株中，1株（2.63%，1/38）联合rrs 基因突变。38株均存在 rpsl 基因 aaa121aaG 突变,其中15株（39.47％，15/38）rpsl 基因存在 aaG43aGG点突变，2株（5.26％，2/38）rpsl 基因存在 aaG88aGG 突变,1株(2.63%,1/38）rpsl 基因 aaG88aGG 突变联合 rrs基因 G1449a 位点突变，后1株突变形式及突变位点尚未见文献报道，为新的突变形式和位点。结论结核分枝杆菌对链霉素耐药与 rpsl 和 rrs 基因突变有关；耐链霉素结核分枝杆菌临床分离株 rpsl 基因 aaG88aGG 突变联合 rrs G1449a新突变位点的发现为进一步研究耐药机理以及耐药结核病的快速检测提供了依据。
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舒芬太尼和瑞芬太尼应用于腹腔镜胆囊切除术的对比
目的 研究探讨舒芬太尼与瑞芬太尼应用于腹腔镜胆囊切除术苏醒后躁动情况对比.方法 选择2005年9月至2010年9月我院接受腹腔镜胆囊切除术120例ASA分级Ⅰ～Ⅱ的患者作为观察对象,按照随机分组原则将所有观察对象分为治疗组与对照组各60例,所有患者气管插管全麻下进行腹腔镜手术,治疗组术毕前30 min给予0.35 μg/kg舒芬太尼静脉推注,对照组采用0.2 μg/kg瑞芬太尼静脉推注维持麻醉.对比两组手术结束时(T1),拔管时(T2)、拔管后10 min(T3)各时点的躁动评分(RS)、镇静评分(RSS)、心率、血压及不良反应的发生.结果 治疗组各三个观察时点RS、RSS评分相比对照组更优,患者躁动少,清醒完全(P<0.01),对照组心率、血压T2、T3时点相比差异有统计学意义(P<0.01),治疗组差异无统计学意义(P>0.05),对照组5例出现苏醒后头晕、恶心、呕吐不良反应.结论 舒芬太尼对比瑞芬太尼在全麻手术苏醒期躁动少,苏醒质量高,不良反应少,镇痛作用时间久.
关键词： 瑞芬太尼 舒芬太尼 腹腔镜下胆囊切除手术 rrs RS -
恩替卡韦有关物质测定方法的比较研究
比较标准草案和《美国药典》恩替卡韦有关物质的测定方法,确定恩替卡韦有关物质的测定方法.采用Welch uLtimate AQ-C18柱(4.6 nm×250 mm,5μm),体积流量为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为254 nm.标准草案以水-乙腈-5％三氟乙酸(95:5:0.05)为流动相A、乙腈为流动相B,进行梯度洗脱;《美国药典》以水-乙腈(97∶3)为流动相A、乙腈为流动相B,进行梯度洗脱.均采用自身对照法测定.两种方法中非对映异构体RRS、RRR、SRR,8-羟基恩替卡韦和8-羟甲基恩替卡韦分离度均符合要求.标准草案非对映异构体RRS、RRR、SRR回收率分别为98.2％,98.5％和98.6％,RSD％分别为1.4％,1.9％/和1.8％;《美国药典》非对映异构体RRS、RRR、SRR回收率分别为99.8％,98.2％和98.5％,RSD％分别为1.4％,1.7％和1.9％.标准草案灵敏度较高,分析时间较短,可用于恩替卡韦有关物质的测定.
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应用基因芯片技术检测结核分枝杆菌链霉素耐药性的研究
目的 研制一种新型DNA芯片,用于快速检测结核分枝杆菌耐链霉素rpsl和rrs基因突变.方法 根据结核分枝杆菌rpsl和rrs基因序列设计探针并制作DNA芯片,用TAMRA(四甲基罗丹明)标记的引物扩增结核分枝杆菌rpsl和rrs基因突变热点的片段,与DNA芯片杂交,同时以聚合酶链反应-单链构象多态性(polymerase chain reaction-single stranded conformation polymorphism,PCR-SSCP)和DNA测序法为对照.结果 144株结核分枝杆菌临床分离株中,42株链霉素敏感株的PCR-SSCP和DNA芯片杂交结果与结核分枝杆菌标准株完全相同;102株链霉素耐药株中有79株检测到rpsl基因突变77.5%(79/102),其中74株为43位密码子AAG→AGG突变,5株为88位密码子AAG→AGG突变;rrs基因突变5%(5/102),4株为513位密码子A→C突变,1株为516位密码子C→T突变,均与PCR-SSCP和DNA芯片杂交结果一致,余18株未检测到突变.结论 用DNA芯片可快速、特异地检测出大多数结核分枝杆菌耐链霉素分离株的rpsl和rrs基因突变,可用于临床耐药性的检测,指导临床用药.
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结核分枝杆菌临床分离株链霉素耐药相关基因rpsL和rrs突变的研究
目的 链霉素在结核病治疗中作为一线药物广泛使用,我国已经使用50年以上.本文主要研究结核分枝杆菌链霉素耐药基因rpsL和rrs基因突变检测对链霉素耐药的相关性.方法 205株结核分枝杆菌临床分离株(经常规方法证实,125株为链霉素耐药,80株为敏感),测定链霉素小抑菌浓度(MIC),测序法检测rpsL和rrs基因突变.结果 84％(105/125)的链霉素耐药株携有rpsL或/和rrs基因突变,其中rpsL基因突变占大多数(76.8％,96/125).对105株带有基因突变的菌株的分析表明,rpsL,rrs基因的突变类型与MIC之间未见密切关系.80株敏感株未检出基因突变.结论 结核分支杆菌链霉素耐药相关基因rpsL和rrs突变在结核分枝杆菌链霉素耐药中起主要作用.
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Nolen-Hoeksema反刍思维量表在中国的试用
目的:探索Nolen-Hoeksema反刍思维量表(RRS)的信效度及其在中国的适用情况.方法:采用反刍思维量表、抑郁、焦虑、自尊、神经质、生活满意度量表,对912名大学本科生施测.结果:验证性因素分析结果X2=2610.43(df=231)、RMSEA=0.068、GFI=0.87、AGFI=0.86、NNFI=0.82、CFI=0.83、IFI=0.83,各项指标表明原量表模型是可以接受的.RRS总量表α系数0.90,重测信度0.82,各因子α系数在0.68-0.85间.重测信度在0.63-0.80间.在抑郁症状反刍、强迫思考和总量表得分上性别差异显著,女性更倾向于反刍思维.结论:RRS中文版适合在中国本科生中使用.
