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细胞外基质受体α-Dystroglycan影响胸腺细胞分化发育的可能机制
目的研究细胞外基质受体alpha-Dystroglycan(α-DG)对胸腺细胞分化的影响及机制. 方法摘取15日胚龄鼠胸腺小叶进行体外器官培养.将α-DG抗体、对照抗体或培养液滴加在胸腺小叶上.FACS(Fluorescence-activated cell sorting)分析胸腺细胞表面分子CD4、CD8、CD95和CD69等的表达. 结果α-DG中和抗体能明显抑制胸腺细胞分化,显示胸腺双阴性细胞比例从对照组的26.5%增高到实验组的71.6%,双阳性细胞和CD8单阳性细胞比例则显著下降,分别从39.8%和20.7%下降到7.5%和6.8%,CD4单阳性细胞比例则无明显变化;同时胸腺细胞数目明显减少;CD95、CD69的表达水平随α-DG中和抗体的持续存在呈现显著升高. 结论α-DG通过参与胸腺细胞的活化和凋亡活动影响胸腺细胞的发育.
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胚胎胸腺细胞在体外胚胎胸腺器官培养中的发育研究
体外可调控的T细胞培养系统的建立,为研究T细胞发育及T细胞和基质细胞的作用提供了很好的实验模型,如胸腺或基质细胞的分离培养和胚胎胸腺器官培养(FTOC)[1].近年来研究表明,长期体外培养的胸腺基质细胞,由于表型的变化如MHCⅡ类分子丢失,而失去了支持T细胞发育的能力,其应用受到限制.
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IL-7对胸腺T细胞及树突状细胞体外分化发育的影响
目的:探讨IL-7对胸腺T细胞及胸腺树突状细胞分化的影响.方法:摘取15～16日龄胎鼠胸腺进行体外器官培养(胚胎胸腺器官培养-FTOC),分别将细胞因子IL-7和培养基滴加在胸腺小叶上,12天后收集不同条件下经FTOC培养获得的胸腺细胞,流式细胞仪检测细胞表面分子CD4、CD8、CD11c、B220、Ia等的表达,通过光学显微镜观察细胞形态,通过细胞计数检测细胞数目的变化.再将经FTOC培养获得的胸腺细胞和异源的T细胞进行混合淋巴细胞反应,通过MTT法检测T细胞的增殖情况.结果:细胞计数结果表明添加外源性IL-7组的胸腺细胞数目明显减少,流式细胞仪检测结果显示其中胸腺CD4~-CD8~-双阴性细胞及CD8~+单阳性细胞比例有所增加,而CD4~+CD8~+双阳性细胞比例显著下降,CD4~+单阳性细胞比例没有明显变化;此外,B细胞和树突状细胞、NK细胞数量均有不同程度的增加.结论:IL-7在胸腺T细胞及胸腺树突状细胞的分化发育中发挥重要的调节作用.
