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融合蛋白hJagged1ext-Fc毕赤酵母表达载体的构建及表达
本研究旨在构建人IgG1 Fc蛋白及融合蛋白hJagged1ext-Fc,并在毕赤酵母GS115中表达.用RT-PCR法从人骨髓细胞中扩增hJagged1基因的胞外段.在测序正确后,将hJagged1基因的胞外段插入构建好的PIC-Fc载体,得到PIC-hJagged1ext-Fc.用MD平板筛选重组子,G418法筛选高拷贝转化子,经甲醇诱导表达后,采用SDSPAGE分析表达蛋白.结果表明:hJagged1基因的胞外段被有效地扩增.序列分析显示所构建的舍phJagged1ext-Fc融合基因的质粒与设计相同,人IgG1 Fc蛋白及融合蛋白hJagged1ext-Fc得到正确表达.结论:成功地构建了hJagged1ext-Fc融合基因的毕赤酵母表达载体,并在毕赤酵母中正确表达,为进一步研究Jagged1在造血干/祖细胞的体外扩增奠定了基础.
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Jaggedl-Notch信号通路在外周CD4+T细胞分化中的作用
病毒的慢性感染与机体的免疫耐受有关.近年来的研究发现,Notch信号通路与机体的免疫系统存在着密切的关系,它从多个方面参与T细胞功能的调控,包括T细胞的活化和增殖、细胞因子的分泌和Th1/Th2分化,也参与调节性T细胞(Treg)的产生、扩增和功能发挥等,表明Notch信号途径不仅参与免疫系统发育,同时在成熟免疫细胞功能调节中也具有重要的作用.
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Notch信号配体分子Jaggedl和Delta4在人肝癌中的表达及意义
目的:研究Notch信号配体分子Jaggedl和Deha4在肝癌中的表达,并分析其与肝癌临床病理学参数的相关性.方法:应用免疫组织化学的方法检测53例人肝癌组织标本中Jaggedl和Delta4的表达,分析染色强度在临床病理学参数不同分组之间的差别.结果:Jaggedl和Delta4均表达于肝癌细胞的胞质中,Jaggedl在79.2%(42/53)的肝癌组织标本中有表达,其水平显著高于癌旁组织(P＜0.05),Delta4表达于67.9%(36153)的肝癌组织中,其水平与癌旁无明显差异.对临床病理学资料的统计学分析显示Jaggedl和Delta4的表达在年龄大于50岁组均显著高于小于50岁组(均为P＜0.05),且它们的表达在不同分化级别间差异显著(均为P＜0.01).结论:Jaggedl的表达在肝癌组织显著高于癌旁组织,说明其参与肝癌的发病,Jaggedl和Delta4与肝癌的分化有关,说明该两个分子可能影响肝癌的进展.
