E3泛素连接酶CUL4A在肿瘤发生发展中的作用及机制

泛素化修饰在肿瘤的发生发展中具有重要作用,其中E3泛素连接酶Cullin 4A (CUL4A)能够通过与DDB1相结合而泛素化多种底物,介导其降解.目前,已经证实在多种肿瘤中均有CUL4A基因的异常表达.本文将总结有关CUL4A在人类恶性肿瘤中的相关作用及分子机制,并讨论将其作为防治肿瘤新靶点的研究进展,为进一步开展CUL4A在肿瘤发生中的研究提供参考.

结肠癌组织中CUL4A的表达及临床病理学意义

目的 探讨CUL4A在结肠癌进展中的作用.方法采用免疫组织化学(IHC)方法检测80例结肠癌组织及癌旁正常粘膜(距肿瘤>5 cm)CUL4A蛋白表达情况,并分析其与结肠癌临床病理参数的相关性.结果 结肠癌组织CUL4A阳性率显著高于癌旁正常粘膜组织(P<0.01);结肠癌组织中CUL4A的表达与AJCC分期、肿瘤浸润深度、血管侵袭、淋巴结转移及远处转移相关,而与性别、年龄、分化程度无关.结论 CUL4A蛋自在结肠癌组织中异常表达,癌组织中的表达明显高于正常组织,并与结肠癌的进展和转移密切相关;该基因可能在结肠癌的发生发展中起重要作用.

CUL4A作用机制研究进展

Cullin4A (CUL4A)是泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)中泛素E3连接酶家族的重要成员之一.UPS是细胞内蛋白降解的重要途径,越来越多的证据表明CUL4A可以通过CUL4A-DDB1-E3途径调节细胞中的一些功能蛋白质,产生相应的作用.本文就CUL4A在基因组的稳定、细胞周期的调控、恶性肿瘤的发生发展、胚胎发育、造血干细胞及脑缺血性损伤等方面的作用进行综述.

CUL4 A促进人卵巢癌细胞侵袭转移及其机制探讨

目的：：检测Cullin 4A(CUL4A)表达对卵巢癌细胞迁移及侵袭能力的影响,并初步探讨其相关分子机制。方法：Western blot法检测人卵巢癌细胞株中CUL4 A表达,设计合成靶向CUL4A的特异性shRNA,构建稳定低表达CUL4A的卵巢癌细胞株。 West-ern blot和荧光定量PCR验证干扰效率；划痕实验及Transwell法检测下调CUL4 A后细胞的迁移及侵袭能力；Western blot和荧光定量PCR检测上皮间质转化( EMT)相关指标及上游信号分子Snail、ZEB1变化。结果：SKOV-3、OV2008、ES-2、OVCAR-3卵巢癌细胞中CUL4A表达均高于正常卵巢上皮细胞HOSE,且以SKOV-3表达水平高。 shRNA转染SKOV-3细胞后,CUL4A的mRNA及蛋白水平显著下降,细胞迁移和侵袭能力明显受到抑制；E-cadherin表达增加, N-cadherin、Vimentin、Snail 和 ZEB1表达均显著降低。结论：CUL4 A可促进卵巢癌细胞的迁移和侵袭,其分子机制可能与调节EMT的上游信号分子Snail及ZEB1有关,提示CUL4 A在卵巢癌的发生发展中起着重要的作用。

CUL4 A、BRD4在非小细胞肺癌患者中的表达及临床意义

目的 检测Cullin4A(CUL4A)、布罗莫结构域蛋白4(BRD4)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织中的表达,探讨CUL4A、BRD4与NSCLC的临床病理特征的关系.方法 120例NSCLC患者和30例非癌症组织在免疫组织化学SP法下检测CUL4A、BRD4表达情况,分析CUL4A、BRD4表达与患者的临床病理资料的相关性.结果 NSCLC癌组织中CUL4A、BRD4阳性表达率明显高于正常对照组织(P<0.01),CUL4A阳性表达与年龄、TNM分期存在明显相关(χ2分别为6.485和8.442,P=0.011和0.004),BRD4阳性表达与年龄、组织类型、TNM和有无淋巴结转移分期有明显相关(χ2分别为4.350、6.389、12.105和13.841,P=0.009、0.006、0.000和0.000).结论 CUL4A、BRD4在NSCLC癌组织中表达明显增高,可能在肿瘤发生发展过程中发挥重要作用,并成为预测NSCLC诊断、预后的参考指标之一.

肝癌组织中CUL4A的表达及其对肝癌细胞生长的影响

目的:探讨肝癌组织中泛素连接酶Cullin 4A(CUL4A)的表达情况及CUL4A对肝癌细胞生长的影响.方法:选择2013年1月-2015年12月72例肝癌组织标本及其癌旁组织标本和72例正常肝组织标本作为对照,免疫组化法检测肝癌组织、癌旁组织和正常肝组织中CUL4A的表达情况,用CUL4A-siRNA、NC-siRNA转染Hep-G2、QSG-7701肝癌细胞,CCK法检测细胞的增殖情况,PI染色、流式细胞术检测细胞周期,Transwell法检测细胞的侵袭迁移能力.结果:肝癌组织中CUL4A的表达明显高于癌旁组织和正常肝组织(t=48.657,P=0.000).肝癌组织中CUL4A的表达和肝癌的分化程度、肿瘤直径、淋巴结转移、TNM分级有关(t=7.254、5.254、5.835、8.212,P=0.000、0.007、0.004、0.000).转染CUL4A-siRNA的Hep-G2、QSG-7701肝癌细胞株在3d和7d时的OD值明显低于NC-siRNA组(t=3.132、5.264;3.152、5.834,P=0.037、0.008;0.041、0.011).转染CUL4A-siRNA的Hep-G2、QSG-7701肝癌细胞株S期细胞比例低于NC-siRNA组(F=4.124、4.142;P=0.014、0.009).转染CUL4A-siRNA的Hep-G2、QSG-7701肝癌细胞株侵袭转移能力低于NC-siRNA组(t=3.756、4.635;4.104、4.967,P=0.003、0.000;0.003、0.000).结论:肝癌组织中CUL4A的表达升高,肝癌组织中CUL4A的表达与肝癌的分化程度、肿瘤直径、淋巴结转移、TNM分级有关,CUL4A能够促进肝癌细胞的增殖、细胞周期进程和侵袭迁移能力.

CUL4A作用机制及其与肿瘤关系的研究进展

CUL4A作为E3连接酶核心结构的主要骨架,可与DDB1结合,使多种底物泛素化并介导其降解,从而影响细胞内蛋白水平.已有研究证实CUL4A在多种肿瘤中高表达,表明泛素化修饰与肿瘤的发生发展密切相关.本文概述CUL4A的相关作用机制及其在恶性肿瘤发生发展中的作用,并讨论其作为肿瘤防治新靶点的研究进展.

Background and objectiveMaintenance of genomic integrity is essential to ensure normal organismal development and to prevent diseases such as cancer. PR-Set7 (also known as Set8) is a cell cycle regulated enzyme that catalyses monomethylation of histone 4 at Lys20 (H4K20me1) to promote chromosome condensation and prevent DNA damage. Recent studies show that CRL4CDT2-mediated ubiquitylation of PR-Set7 leads to its degradation during S phase and atfer DNA damage. hTis might occur to ensure appropriate changes in chromosome structure during the cell cycle or to preserve genome integrity atfer DNA damage.Methods We developed a new model of lung tumor development in mice harboring a conditionally expressed allele of Cul4A. We have therefore used a mouse model to demonstrate for the ifrst time that Cul4A is oncogenicin vivo. With this model, staining of PR-Set7 in the preneoplastic and tumor lesions in AdenoCre-induced mouse lungs was performed. Meanwhile we identiifed higher protein level changes of γ-tubulin and pericentrin by IHC.Results hTe level of PR-Set7 down-regulated in the preneoplastic and adenocarcinomous lesions following over-expression of Cul4A. We also identiifed higher levels of the proteins pericentrin and γ-tubulin in Cul4A mouse lungs induced by AdenoCre.Conclusion PR-Set7 is a direct target of Cul4A for degradation and involved in the formation of lung tumors in the conditional Cul4A transgenic mouse model.

CUL4A促进人胃癌细胞增殖、侵袭和转移的机制

目的:探讨CUL4A基因在胃癌增殖、侵袭和转移中的机制.方法:siRNA干扰胃癌SCG-7901细胞中CUL4A基因的表达;CCK-8法检测各组细胞的增殖情况;Transwell小室观察各组细胞的侵袭能力;Annex-in-V-FITC/PI法检测各组细胞的凋亡情况,分析CUL4A对细胞凋亡的影响;Real time-PCR分析上皮间质转化(EMT)相关基因的表达情况.结果:siRNA有效干扰了胃癌SCG-7901细胞中CUL4A基因的表达(P＜0.05);干扰CUL4A基因有效抑制了胃癌细胞的增殖(P＜0.05);Transwell小室结果显示,干扰CUL4A基因阻碍了SCG-7901细胞的侵袭能力(P＜0.05);细胞凋亡结果显示,干扰CUL4A基因促进了细胞的凋亡(P＜ 0.05);Real time-PCR结果显示,干扰CUL4A基因后Snail mRNA和ZEB1 mRNA的表达降低(P＜0.05),E-cadherin mRNA的表达升高(P＜0.05).结论:CUL4A基因促进胃癌细胞的增殖,抑制凋亡和侵袭,且影响了EMT相关基因的表达.

过表达CUL4A对肺腺癌A549细胞生物学功能的影响

目的:探究CUL4A对人肺腺癌细胞株A549生物学行为的影响.方法:通过慢病毒感染的方法,构建CUL4A过表达的A549细胞株,通过体外平板克隆和Transwell实验检测A549细胞株的增殖、迁移和侵袭能力.结果:通过RT-PCR和Western-blotting证实CUL4A过表达的A549细胞株构建成功.与对照组的细胞相比,上调CUL4A的表达能够促进 A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力.结论:我们的研究结果强调了CUL4A在人肺腺癌细胞株A549中的重要性,并提示CUL4A不仅可能与肺癌的发生和转移有关,而且可能成为肺癌潜在的治疗靶点以及生物标志物.