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胃泌素和胃动素对人离体食管下括约肌张力的调节机制
目的探讨胃泌素和胃动素对人类食管下括约肌的套索纤维和钩状纤维的作用规律.方法制备人食管下括约肌的套索纤维、钩状纤维以及食管体部和胃底环行肌的肌条,运用离体组织张力测量技术,得出各肌条对胃泌素和胃动素的剂量-反应曲线和大收缩效应值(Emax).结果各类肌条对胃泌素和胃动素产生了规律及强度明显不同的浓度-依赖性收缩.套索纤维对胃泌素的Emax值[(4.91±0.95)mN/mm2]显著高于钩状纤维[(0.72±0.14)mN/mm2].套索纤维和钩状纤维对胃动素均产生较强的收缩反应[(3.61±0.65)mN/mm2和(2.64±0.33)mN/mm2].结论人类食管下括约肌的套索纤维和钩状纤维对胃泌素和胃动素具有明显不同的反应特性.
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乙酰胆碱、蛙皮素和P物质对人食管下括约肌张力调节的细胞内信号转导机制
目的 观察蛋白激酶C(PKC)和钙调蛋白信号转导通路在乙酰胆碱、蛙皮素和P物质对人食管下括约肌钩状纤维和套索纤维张力调节中的作用.方法 应用PKC信号通路特异性阻断剂H7和钙调蛋白信号通路特异性阻断剂CGS9343B,以食管和胃底环形肌作对照,测定抑制套索纤维和钩状纤维肌细胞收缩的情况.结果 乙酰胆碱与蛙皮素和P物质引起的收缩,应用H7(5±1)%、(5±2)%、(6±2)%和无钙培养(4±1)%、(6±1)%、(3±1)%的方法,可以有效阻断钩状纤维的收缩(22±1)%、(23±1)%、(24±1)%;以CGS9343B(3±1)%、(4±2)%、(6±1)%和4mmol/L锶离子处理(5±2)%、(3±1)%、(6±2)%可以有效阻断套索纤维(23±2)%、(24±2)%、(26±1)%的收缩.结论 人食管下括约肌的套索纤维细胞依赖钙调蛋白信号通路和内源性钙离子释放产生大收缩效应.钩状纤维细胞依赖PKC信号通路和外源性钙离子流入产生大收缩效应.
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胆囊收缩素受体对人食管下括约肌套索纤维和钩状纤维的调节机制
目的探讨人食管下括约肌的套索纤维和钩状纤维对CCK-8和胃泌素-17的反应特点,以及胆囊收缩素受体对两者的调节作用.方法运用离体组织张力测量技术,得出套索纤维和钩状纤维对CCK-8和胃泌素-17的大收缩效应值(Emax),以及特异性胆囊收缩素受体拮抗剂对CCK-8的pKB值.结果套索纤维对CCK-8和胃泌素-17产生了较强的浓度依赖性收缩反应[Emax值:(5.18±0.50)mN/mm2和(4.91±0.95)mN/mm2],而钩状纤维的收缩强度[Emax值:(0.73±0.23)mN/mm2和(0.72±0.14)mN/mm2]显著低于套索纤维(P＜0.001;P＜0.01).CR1409和CR2945对CCK-8引发的套索纤维收缩均产生了浓度依赖性抑制作用,前者的pKB值(7.51±0.11)大于后者(7.15±0.11)(P＜0.05).结论套索纤维对CCK-8和胃泌素-17刺激的收缩强度显著大于钩状纤维,CCKA受体在其中发挥着更为重要的作用.
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血管活性肠肽介导人食管下括约肌舒张的实验研究
目的 研究血管活性肠肽(VIP)对人食管下括约肌(LES)套索纤维和钩状纤维的作用及其差异,探索VIP是否属于非肾上腺非胆碱能(NANC)神经递质. 方法 选取2010年3～8月在河北医科大学第四医院因高位食管中段癌行食管大部切除术患者30例,其中男14例,女16例；年龄(58.0±61)岁.选LES标本,分离钩状纤维和套索纤维,做外源性VIP对套索纤维和钩状纤维的浓度效应曲线,比较分别在电场刺激(EFS)和外源性VIP作用下,VIP (10-28)对LES的不同影响. 结果 在LES离体实验条件下,外源性VIP在不同浓度下可使套索纤维和钩状纤维产生浓度依赖性舒张反应,在相同VIP浓度下套索纤维和钩状纤维舒张变化的差异有统计学意义(P＜0.05),套索纤维的舒张作用大于钩状纤维.VIP(IO-28)能够短暂一过性抑制外源性VIP的作用.VIP(1 0-28)对EFS作用后的套索纤维和钩状纤维均产生了短暂一过性的抑制作用. 结论 EFS诱导钩状纤维和套索纤维的舒张与VIP有关,实验结果支持VIP是人LES内NANC神经递质之一.
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平滑肌功能调节相关性 G 蛋白偶联受体在人食管下括约肌上的表达
人食管下括约肌（Lower esophageal sphincter，LES）是位于人食管胃结合部约2－3cm 宽的特殊增厚环形肌。一般认为人 LES 是由胃小弯侧的半环形钩状纤维和大弯侧的斜行套索纤维共同构成，二者与膈肌脚一起，形成了高压带，从而维持 LES 的关闭状态，形成一种类似单向阀门的结构［1］。
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人食管下括约肌毒蕈碱受体的表达
目的:研究毒蕈碱受体亚型在人食管下括约肌(LES)套索纤维和钩状纤维的表达,对LES胆碱能收缩机制作进一步分析.方法:选取高位食管中段癌,行食管大部切除术患者12例,取食管胃接合部标本分离套索纤维和钩状纤维.分别应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印记(Western Blot)检测5种M受体亚型在两种肌纤维中mRNA和蛋白的表达.结果:不同M受体亚型mRNA在两种肌纤维的表达有统计学差异(P<0.05),从数据观察5种受体亚型mRNA表达从强到弱顺序依次为M2,h13,M1,M4,M5;同一受体mRNA在两种肌纤维间表达无统计学差异;不同M受体亚型蛋白在两种肌纤维表达有统计学差异(P<0.05),5种受体亚型蛋白表达强弱同mRNA;同一受体在两种肌纤维间蛋白表达无差异.结论:5种M受体亚型mRNA和蛋白在两种肌纤维均有表达,M2受体表达量高,其它依次是M3,M1,M4和M5受体;相同受体在两种肌纤维间mRNA和蛋白的表达相同.
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内皮素受体在人食管下括约肌上的分布及其作用
目的 通过检测各内皮素受体(ETR)亚型在人食管下括约肌(LES)上,特别是套索纤维和钩状纤维上的分布规律,探讨内皮素对LES收缩和舒张功能的作用.方法 在罹患食管中上段癌患者的术后标本上,取LES的套索纤维和钩状纤维,并分别以食管下段和胃底部的环形肌肉作为对照.采用蛋白印迹法(Western Blot)、RT-PCR和半定量PCR(semi-qPCR)分析ETR在人LES上的分布规律.结果 ETR的A亚型(ETA)和B亚型(ETB)被确认都存在于LES上.ETR两个受体亚型的蛋白质和mRNA表达水平比较,差异均有统计学意义(F=533.841,P<0.01;F=72.291,P<0.01).ETA显著高于ETB表达量(约为5:1),差异有统计学意义;而同一受体亚型在钩状纤维(C)、套索纤维(S)、食管下端环形肌(E)、胃底环形肌(G)4个位点上的表达量比较差异无统计学意义(F=0.398,P=0.5329).结论 ET受体,特别是ETA受体亚型在人LES的舒张、收缩功能调节中发挥着重要作用,是食管运动障碍性疾病治疗的靶向受体.
