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龙蛭汤含药血清对人脐静脉内皮细胞增殖及自噬的影响
目的 探讨龙蛭汤促人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖的可能作用机制.方法 采用400μmol/L过氧化氢(H2O2)干预人脐静脉内皮细胞4h建立自噬模型,通过CCK-8法观察龙蛭汤含药血清对模型组细胞增殖的影响,观察HUVECs自噬微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)和Bcl-2同源结构域蛋白(Beclin-1)表达. 结果 与正常组比较,空白组细胞增殖OD值及相对增殖率差异无统计学意义(P＞0.05);与空白组和正常组比较,模型组HUVECs增殖OD值及相对增殖率降低,LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达均升高(P＜0.05);与模型组比较,龙蛭汤组HUVECs增殖OD值及相对增殖率及LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达上升(P＜0.05).正常组和空白血清组细胞未见明显变化,模型组细胞胞质内双层膜样结构和空泡数量减少,龙蛭汤组细胞24 h后胞质内双层膜样结构增多,弯曲延展,包裹部分细胞器. 结论 龙蛭汤含药血清对H2O2诱导的HUVECs损伤细胞具有明显保护作用,其能维持细胞形态的完整和促进细胞增殖,其机制可能与上调细胞自噬水平相关.
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龙蛭汤对气虚血瘀证急性脑梗死患者的临床疗效及作用机制研究
目的 观察龙蛭汤治疗气虚血瘀证急性脑梗死(ACI)的疗效并探讨其促血管新生机制,为治疗气虚血瘀证ACI寻找有效方剂并提供理论依据.方法 采用前瞻性研究方法,按随机数字表法将80例气虚血瘀证ACI患者分为试验组和对照组,每组40例.对照组按照美国心脏协会/美国卒中协会(AHA/ASA)推荐的急性缺血卒中患者早期处理指南要求给予常规西医治疗;试验组在常规西医治疗基础上加服自拟方龙蛭汤(组成:生黄芪120 g,当归尾6 g,地龙3 g,赤芍4.5 g,川芎3 g,桃仁3 g,红花3 g,川牛膝6 g,水蛭3 g),疗程为7d.比较两组患者治疗后的临床疗效及治疗前后改良爱丁堡-斯堪的那维亚评分(MESS)及血清低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素-2(Ang-2)水平的变化.结果 试验组治疗后总有效率明显高于对照组[87.5％ (35/40)比60.0％ (24/40),P＜0.05].两组治疗后MESS评分、HIF-1 α均较治疗前显著降低,且试验组的降低程度较对照组更显著[MESS评分(分):6.18±3.84比7.15±5.08,HIF-1 α(pg/L):11.54±20.40比28.13±20.30,均P＜0.05];试验组治疗后VEGF显著下降(ng/L:368.73±85.02比408.62±85.66,P＜0.01)、Ang-2显著升高(ng/L:35.38±7.96比32.19±6.08,P＜0.05);对照组治疗后VEGF显著升高(ng/L:421.25±87.31比370.95±79.00,P＜0.01);Ang-2降低,但差异无统计学意义(ng/L:29.28±21.82比31.83±5.61,P＞0.05).结论 龙蛭汤能有效改善气虚血瘀证ACI患者的神经功能,其机制可能与其促进血管新生有关.
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龙蛭汤方治疗缺血性中风的理论探源
缺血性中风是临床上多发、常见的危重病之一,严重威胁着人类健康.益气活血是缺血性中风的重要治疗原则,清代医家王清任曾以此创立补阳还五汤沿用至今.龙蛭汤正是在补阳还五汤基础上加用水蛭、川牛膝而成,意在增强原方的活血通络之功效,临床收效甚好.龙蛭汤依据中医基础理论及历代医家经验,结合现代病症特点,能得到基础及临床研究结果的支持,值得深入研究.现就龙蛭汤方的组方依据作一探源.
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龙蛭汤促气虚血瘀证急性脑梗死大鼠血管新生的作用及机制研究
目的:探讨自拟方龙蛭汤对气虚血瘀证脑梗死大鼠急性期神经功能缺损评分、血管新生及促血管生成因子HIF-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1 α)、促血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)水平的影响.方法:60只SD大鼠随机分为模型组、对照组和治疗组,每组各20只.3组均采用力竭游泳14天+改良线栓法建立气虚血瘀证脑梗死模型,造模成功后分别予生理盐水、补阳还五汤和龙蛭汤灌胃并比较给药前、第7、14天神经功能缺损评分(zea-longa评分).在第7、14天两时间点取大鼠缺血脑组织采用免疫组织化学法和Western blot法检测CD34、HIF-1α、Ang-2蛋白表达水平,并测定微血管计数(microvessel count,MVC).结果:①给药前3组大鼠zea-longa评分无明显差异(均P＞0.05),第7、14天对照组和治疗组均明显低于模型组(均P＜0.05).②免疫组化结果显示:第7、14天治疗组MVC、HIF-1α、Ang-2均明显高于模型组,且高于对照组(均P＜0.05).③Western blot结果显示:第7、14天,治疗组CD34、Ang-2、HIF-1α均明显高于模型组,且高于对照组(均P＜0.05).结论:龙蛭汤能促进气虚血瘀证脑梗死大鼠急性期神经功能恢复和缺血脑组织血管新生,其机制可能与上调促血管生成因子HIF-1α、Ang-2相关.
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龙蛭汤含药血清对氧化损伤人脐静脉内皮细胞管型形成的影响
目的:探讨龙蛭汤含药血清对氧化损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)管型形成的影响.方法:建立过氧化氢(H2O2)诱导HUVECs氧化损伤模型,采用CCK-8增殖实验、划痕实验和Matrigel实验比较龙蛭汤含药血清(治疗组)和补阳还五汤含药血清(对照组)对氧化损伤的HUVECs的增殖、迁移和管型形成的不同影响.结果:治疗组较对照组细胞具有较高增殖能力、更快迁移速度及迁移距离、形成更多的管形腔及小分支(P＜0.05).此外,24 h后治疗组细胞仍能保持完整的管腔结构和形态,而对照组则不能.结论:龙蛭汤含药血清较补阳还五汤含药血清在促进氧化损伤HUVECs管型形成方面具有更优效果.
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龙蛭汤辅助治疗急性脑梗死48例
笔者2000年元月～2004年元月,应用我院自制的龙蛭汤辅助治疗发病1周内的急性脑梗死患者48例,并与单用常规治疗的35例作对照观察,现将结果报道如下.
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龙蛭汤治疗气虚血瘀型急性脑梗死的临床疗效及其机制探讨
目的 探析龙蛭汤治疗气虚血瘀型急性脑梗死的临床疗效及其可能作用机制.方法 选取88例急性脑梗死患者,按随机数字表法分为观察组与对照组,每组各44例.对照组予以常规西医疗法,观察组在对照组基础上联合龙蛭汤进行治疗.比较两组治疗总有效率、治疗前后中医证候积分(主症积分、次症积分与总积分)、血清低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管生长素-2(Ang-2)水平,记录两组治疗期间不良反应发生情况.结果 观察组治疗总有效率为79.5%,显著高于对照组59.1%(P<0.05).与治疗前比较,两组治疗后的中医证候积分、血清VEGF、HIF-1α水平均降低,而血清Ang-2水平升高(P<0.05);与对照组比较,观察组的中医证候积分、血清VEGF、HIF-1α水平降低,而血清Ang-2水平升高(P<0.05或P<0.01).观察组与对照组不良反应总发生率分别为6.82%与2.27%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 龙蛭汤治疗气虚血瘀型急性脑梗死可益气活血、逐瘀通络,通过调控血管新生因子表达而促血管新生,改善患者症状,安全可靠,值得推广.
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龙蛭汤对大鼠脑梗死模型梗死灶周围组织VEGF及Flk-1 mRNA表达的影响
目的:研究龙蛭汤(自拟方)对脑梗死大鼠梗死灶周围组织血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)及其受体(Fetal Liver Kinase 1,Flk-1)mRNA表达的作用,初步探讨其对脑梗死恢复作用的机制.方法:120只SD雄性大鼠,采用线栓法复制大鼠脑缺血模型,随机分实验组、对照组和空白组.3组分别给予不同处理.于处理后第3,7,14,28天处死大鼠,通过定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测脑梗死灶周围组织中VEGF、Flk-1 mRNA的表达量.结果:3组大鼠VEGF mRNA的表达量从第3天开始均呈下降趋势,实验组3～7 d下降速率略快于对照组和空白组,而7～14 d和14～28 d的下降速率较另两组减缓.3组大鼠Flk-1 mRNA的表达量3～7 d出现暂时升高,7d后逐渐下降.实验组3～7 dFlk-1 mRNA表达量上升的速率略快于对照组和空白组,而7～14 d以及14～28 d的下降速率较另两组下降减缓,3组各时间点比较,差异有统计学意义(P＜0.05).经相关性分析,3组VEGF、Flk-1 mRNA的表达量与时间均具相关性,且实验组与时间的相关性高于对照组和空白组(均P ＜0.05).结论:龙蛭汤有可能通过作用于VEGF和其受体Flk-1基因以促进脑梗死灶周围组织的血管新生,从而达到加快脑梗死的康复进程.
