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人参皂苷Rb1抗单纯疱疹病毒1型感染及保护神经的实验研究
目的 通过研究人参皂苷Rb1(GRb1)抑制单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus,HSV-1)感染导致人星形胶质瘤细胞(U251)凋亡异常及神经生长因子(NGF)mRNA的表达变化,探讨GRb1抗HSV-1感染从而保护神经的作用机制.方法 mTT比色法、流式细胞术检测GRb1对HSV-1感染致U251细胞凋亡异常的抑制作用;应用半定量RT-PCR检测不同处理组NGFmRNA的表达变化.结果 (1)MTT法显示400μg/mL GRb1+HSV-1组在感染24、36、48h的MTT值均高于HSV-1组(P＜0.05);(2)形态学观察HSV-1组细胞感染36h后出现细胞病变效应(CPE),而400μg/mL GRb1+HSV-1组细胞感染36h后融合增多,但大部分细胞为正常形态;(3)流式细胞术显示:400 μg/mL GRb1+HSV-1组凋亡率在感染24、36h均低于HSV-1组(P＜0.05);(4) RT-PCR显示:400 μg/mL GRb1+HSV-1组GRb1组在加药后早期6～12h NGFmRNA表达降低(P＜0.05),但在感染24、36、48h表达增高且明显高于HSV-1组(P＜0.05).结论 适当浓度的GRb1能抑制因HSV-1感染所致细胞凋亡的异常及NGFmRNA的表达变化.推测GRb1可能通过上调NGFmRNA的表达并抑制细胞凋亡,从而起到抗病毒、保护神经的作用.
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白藜芦醇抑制人脑胶质瘤U251细胞增殖及诱导其凋亡的实验研究
目的 研究白藜芦醇对人脑胶质瘤细胞U251细胞生长抑制及诱导细胞凋亡的作用.方法 采用MTT法检测白藜芦醇对U251细胞的增殖活性的影响,采用流式细胞仪检测白藜芦醇对U251细胞早期、晚期凋亡率的影响,用倒置显微镜观察不同浓度的白藜芦醇作用后U251细胞的形态学改变.结果 白藜芦醇对U251脑胶质瘤生长有抑制作用,且具时间及剂量依赖性;白藜芦醇能诱导U251细胞早、晚期凋亡,且具时间及剂量依赖性.结论 白藜芦醇能抑制U251脑胶质瘤的增殖并能诱导细胞凋亡.
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替莫唑胺对人胶质瘤细胞系U251细胞miR125b的影响
目的：探讨替莫唑胺（ TMZ）对人胶质瘤细胞系U251细胞的miRNA125b的表达影响。方法将人胶质瘤细胞系U251细胞分成空白对照组、TMZ组，TMZ组设10、25、50、100、200、400、600μmol/L组。各组分别作用于24、48、72 h后进行实时定量PCR（ Real-time PCR）检测miRNA-125b的表达水平；用MTT比色法检测细胞活力；流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率。结果荧光定量PCR检测结果显示：替莫唑胺作用24 h后， miRNA125b表达变化不明显；48 h后对miR-125b表现出抑制作用， miR-125b对U251细胞的抑制率呈良好的时间-剂量效应关系，其Ic 50为76μmol，初始抑制浓度为50μmol；流式细胞仪检测显示，U251细胞经TMZ作用后出现G2/M期阻滞，但促凋亡作用并不显著。结论在TMZ对胶质瘤细胞治疗过程中，hsa-miR-125b的表达随着治疗剂量而被抑制，miR-125b可以作为TMZ在用药过程中效果的检测以及抗药性反应的参考依据。
