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滇重楼皂苷对10种肿瘤细胞株的细胞毒谱及构效关系研究
滇重楼Paris polyphylla Snfith vat.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.为百合科重楼属植物的干燥根茎.重楼味苦,性微寒,有小毒,归肝经,具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊之功效,用于痈疮、咽喉肿痛、毒蛇咬伤、跌打伤痛、惊风抽搐等.已有研究表明,重楼的水、甲醇和乙醇提取物对A549(人肺癌)、MCF-7(人乳腺癌)、HT29(人结肠腺癌)、A498(人肾腺癌)、PACA-2(人胰腺癌)、PC-3(人前列腺癌)等多种人体肿瘤细胞均有抑制作用,甾体皂苷类是其主要活性成分[1].本实验将从滇重楼分离纯化得到的6种皂苷采用MTT检测方法,针对10种不同类型的肿瘤细胞株的细胞毒活性、构效关系进行了比较研究;
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重楼属药用植物叶中主要次生代谢产物积累差异的研究
目的 探讨11种重楼属药用植物叶中主要次生代谢产物积累的差异.方法 采用超高效液相色谱法(UPLC)测定11种重楼属药用植物叶中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ及总皂苷的含量,建立其超高效液相色谱法图谱,并用单因素方差分析、色谱法分析对其叶中主要次生代谢产物积累差异进行研究.结果 11种重楼属药用植物叶中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ及总皂苷含量(P＜0.01)具有极显著差异,只有在阔瓣重楼、五指莲、黑籽重楼、长柱重楼和滇重楼叶中同时检测到重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ;11种重楼属药用植物叶超高效液相色谱法图谱差异较大,主要次生代谢产物种类也存在较大差异,其中阔瓣重楼、五指莲、黑籽重楼、长柱重楼和滇重楼叶超高效液相色谱法图谱相似度均在0.902以上,有16个共有峰,主要次生代谢产物种类差异较小.结论 11种重楼属药用植物叶合成重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ等主要次生代谢产物能力及种类存在较大差异,这可能是重楼属药用植物根茎中主要次生代谢产物含量及种类差异较大的主要原因.
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HPLC含量测定和DNA分子标记技术对重楼属药用植物的鉴定
目的:通过指标成分含量测定与DNA分子标记技术对重楼属药用植物样品进行鉴定,探讨DNA分子鉴定技术在中草药鉴别领域的应用前景.方法:以重楼皂苷I、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ为指标成分,利用HPLC测定指标成分含量,并用单因素方差分析对其根茎中甾体皂苷活性成分的差异进行评价;采用基于聚合酶链式反应(PCR)方法的DNA分子标记技术鉴别样品.结果:重楼属10种药用植物根茎中重楼皂苷I、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ及总皂苷的含量具有极显著差异(P＜0.01),且其主要化学成分种类也存在较大差异;同时ITS2序列与NJ树结果能有效区分重楼属10种药用植物.结论:DNA分子鉴定技术作为含量测定常规方法的补充,具有准确可靠、重复性高等优点,可用于重楼属药用植物的鉴定.
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“一测多评法”测定不同种重楼植物中的4种重楼皂苷含量
目的:建立可用于重楼药材中重楼皂苷工、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的一测多评定量分析方法.方法:分别以重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ作为内参物,计算4种重楼皂苷间的相对校正因子,进而对重楼植物中的重楼皂苷进行定量分析,并将此计算结果与外标实测值进行比较,以评价“一测多评法”的准确性和可行性.结果:以重楼皂苷工作为内参物计算其余3种皂苷含量时,所得到一测多评法的计算结果与外标法无显著差异.结论:所建立的“一测多评法”测定重楼属植物中的4种重楼皂苷准确、快速且耐用性良好,为采用不同的评价方法对重楼植物品质评价提供了科学依据.
