首页 > 文献资料
-
梅毒螺旋体纤连蛋白结合蛋白Tp0136前炎症活性的研究
目的：初步研究梅毒螺旋体纤连蛋白结合蛋白Tp0136潜在的前炎症活性。方法构建重组质粒pET-28a/Tp0136并诱导其表达目的蛋白；将不同浓度(1、2、5、10μg/mL)的rTp0136分别刺激THP-1源性巨噬细胞,ELISA法分别检测其产生前炎症细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的水平；并同时用二硫代氨基甲酸吡咯烷( PDTC)预先处理巨噬细胞,检测相应细胞因子分泌量。结果成功构建了pET-28a/Tp0136重组质粒,并诱导表达和纯化出rTp0136；重组蛋白能诱导巨噬细胞产生IL-1β、IL-6和TNF-α,并且呈浓度和时间依赖性；重组蛋白刺激经PDTC预处理后的巨噬细胞,其 IL-1β、IL-6和 TNF-α的分泌水平分别降至32％、35％和27％。结论rTp0136可诱导巨噬细胞产生前炎症细胞因子,该过程可能受NF-κB调控。
关键词： 梅毒螺旋体 纤连蛋白结合蛋白 Tp0136 前炎症细胞因子 核因子kappa B -
梅毒螺旋体重组蛋白Tp0663前炎症活性的研究
目的 探讨梅毒螺旋体(Tp)重组Tp0663蛋白(rTp0663)潜在的前炎症活性并初步探讨可能参与激活的信号分子,为阐明Tp的致病机制提供依据.方法 体外以不同剂量rTp0663以不同时间刺激THP-1细胞源性人巨噬细胞,ELISA分别检测其产生前炎症细胞因子IL-1 β和IL-6的水平；以rTp0663刺激经抗TLR2、抗CD14、抗TLR2与抗CD14联合、NF-κB特异性抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)处理后的巨噬细胞,检测其释放IL-1 β和IL-6的水平.结果 rTp0663在一定范围内内以剂量和时间依赖方式显著诱导巨噬细胞产生IL-1 β和IL-6,在3μg/mL刺激剂量和刺激24 h时达到高峰；Tp0663刺激经抗TLR2、抗CD14、抗TLR2与抗CD14联合、PDTC预处理后的巨噬细胞释放IL-1 β水平分别下降至63.0％、69.0％、51.3％和15.8％,IL-6分别降至66.0％、71.0％、54.3％和18.7％.结论 rTp0663可通过TLR2和CD14激活NF-κB诱导THP-1源性人巨噬细胞产生前炎症细胞因子,Tp0663可能是Tp的一个重要的致病因子.
关键词： 梅毒螺旋体 Tp0663 前炎症细胞因子 核因子kappa B -
苓桂术甘汤调节心室重构模型大鼠心肌组织NF-κB信号通路的分子机制研究
目的:观察苓桂术甘汤对心室重构大鼠心肌组织NF-κB信号通路相关分子表达的影响,探讨其抑制心室重构的分子机制.方法:采用冠脉结扎复制心梗后心室重构大鼠模型,造模2 w后,药物连续干预4 w,采用Western blot法检测模型大鼠心肌组织NF-κBp65、IKK-β、IκB-α及p-IκBα的蛋白表达,采用ELISA法检测大鼠血清中TNF-α、IL-1β及IL-6的含量,采用HE及Masson染色观察大鼠心肌组织病理学变化.结果:心室重构模型大鼠出现明显的心肌细胞损伤及间质纤维化等病理变化,与假手术组比较,心肌组织NF-κBp65、p-IκBα蛋白表达显著升高,IKK-β、IκB-α蛋白表达显著降低,血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量显著升高(P＜0.01).与模型组比较,苓桂术甘汤各剂量干预4w后,可显著改善模型大鼠心肌组织损伤,抑制NF-κBp65、p-IκBα蛋白表达、上调IKK-β、IκB-α蛋白表达,降低血清TNF-α、IL-1β及IL-6含量(P＜0.05或P＜0.01).结论:苓桂术甘汤改善心肌组织损伤、抵制心室重构的作用机制与抑制心肌组织NF-κB信号通路过度激活有关.
关键词： 苓桂术甘汤 心室重构 核因子kappa B 分子机制 -
氧控制性再灌注抗犬体外循环肺缺血再灌注早期损伤
[目的]探讨氧控制性再灌注(OCR)对体外循环肺缺血再灌注(I/R)早期损伤的作用.[方法]14只健康犬随机分为对照组(I/R,n=7)和实验组(OCR,n=7).对照组全程FiO2 80%;实验组在主动脉开放即刻调整FiO2至40%,随后每5 min依次上调10%,后达80%,其余时段均维持FiO2 80%.检测动脉血气,观察两组犬在麻醉后、主动脉开放前、开放后5、10、15、20、25 min以及停机前动脉血氧分压的变化.在开胸后即刻(T1)、主动脉开放25 min(T2)、主动脉开放90 min(T3)分别留取血液标本及肺标本.酶联免疫吸附法检测血清白介素6和肿瘤坏死因子α含量;检测肺组织干湿重比;比色法检测肺组织髓过氧化物酶活性、丙二醛含量:Western Blot检测肺组织核因子kappa B蛋白含量;光镜观察并盲法评分比较肺组织病理学变化.[结果]实验组动脉血氧分压在主动脉开放后5、10、15、20 min均明显低于对照组(P<0.05).两组相比,实验组血清白介素6和肿瘤坏死因子α含量在T2和T3时点较对照组降低(P<0.05).实验组肺组织干湿重比、髓过氧化物酶活性、丙二醛含量和核因子kappa B蛋白表达在T2和T3时点较对照组降低(P<0.05).实验组肺损伤评分在T2和T3时点低于对照组(P<0.05).[结论]氧控制性再灌注可抑制体外循环肺缺血再灌注早期炎性细胞浸润,抑制核因子kappaB蛋白表达.提示氧控制性再灌注对体外循环肺缺血再灌注早期损伤具有一定的保护作用.
-
益气养阴法对2型糖尿病动脉粥样硬化患者白介素-6核因子Kappa B表达及中医证候疗效影响的临床研究
目的:本研究旨在通过观察益气养阴方对2型糖尿病动脉粥样硬化(AS)患者在白介素-6(IL-6)、核因子Kappa B(NF-kB)表达水平及中医证候疗效的影响,探讨益气养阴法在2型糖尿病AS患者中的临床疗效,为中医药防治2型糖尿病患者AS的进展寻找有效的研究方向,以减少急性心血管事件的发生.方法:采用随机对照方法,将63例中医辨证为气阴两虚型2型糖尿病AS患者随机分为治疗组和对照组.治疗组在常规治疗基础上加用益气养阴方,对照组予以常规治疗.六周后观察白介素-6(IL-6)、核因子KappaB (NF-kB)表达水平及中医证候疗效影响的变化.结果:治疗组治疗后白介素-6(IL-6)、核因子KappaB (NF-kB)表达水平明显降低(P＜0.05),对照组治疗后白介素-6(IL-6)、核因子KappaB (NF-kB)表达水平较前降低,无统计学意义(P＞0.05),但治疗后两组在白介素-6(IL-6)、核因子KappaB (NF-kB)表达方面经统计学分析有显著性差异(P＜0.05).结论:治疗后治疗组总有效率93.75％;对照组总有效率89.66％;治疗组与对照组有效率经x2检验P=0.038,两组差异均有显著性意义(P＜0.05).
关键词： 益气养阴方 2型糖尿病 动脉粥样硬化 白介素-6 核因子kappa B -
NF-kappa B和AP-1在非小细胞肺癌中的表达
背景与目的核因子kappa B(NF-kappa B)和激活蛋白1(AP-1)在细胞凋亡和增生过程中所起的作用逐渐被人们所认知,在肿瘤的形成过程中也扮演着重要的角色.本研究分析了NF-kappa B、AP-1在非小细胞肺癌中的表达,以明确二者之间的相互关系,并进一步研究二者对周期蛋白cyclin D1和caspase 3在非小细胞肺癌中表达的影响.方法应用Western blot检测NF-kappa B、AP-1、cyclin D1和caspase 3在非小细胞肺癌中的蛋白表达,应用RT-PCR检测不同NF-kappa B和AP-1表达的肺癌组织中cyclin D1和caspase 3的mRNA表达.应用相关分析判断NF-kappa B和AP-1的相关性.结果在45例非小细胞肺癌患者中,NF-kappa B和AP-1在肺癌组织中的表达均高于癌旁肺组织中的表达(0.6047比0.2798,P<0.01).在NF-kappa B和AP-1较高表达的肺癌组织中,cyclin D1蛋白表达和mRNA表达均增加(P<0.01),而caspase 3的蛋白表达和mRNA表达减少(P<0.01).相关分析显示NF-kappa B和AP-1有明显的相关性(r=0.800,P<0.01).结论 NF-kappa B和AP-1作为转录因子可能在非小细胞肺癌的形成和发展中起重要作用.
关键词： 核因子kappa B 激活蛋白1 非小细胞肺癌 -
布拉氏酵母菌联合早期干预对高胆红素血症仔鼠脑组织NF-kB表达和学习记忆功能的影响
目的 分析布拉氏酵母菌联合早期干预对高胆红素血症仔鼠脑组织NF-kB表达和学习记忆功能的影响.方法 将足月7日龄SD大鼠88只随机分为对照组(NS组)和试验组(T1、T2、T3组),每组22只.试验组于7日龄和10日龄分别腹腔注射胆红素50 μg/g,对照组注射等量生理盐水.于末次注射12 h后,各组随机选取6只,测定血清胆红素和脑组织胆红素含量.剩余仔鼠,T1组单纯给予布拉氏酵母菌,T2组给予布拉氏酵母菌和早期干预,T3组不干预,至28日龄.HE染色和免疫组化观察NF-kB表达情况,Morris水迷宫评测仔鼠逃避潜伏时间和穿过目标象限次数.结果 10日龄NS组血清胆红素和脑组织胆红素浓度显著低于试验组(P<0.01),试验组间差异无统计学意义(P＞0.05);28日龄NS组显著低于T1、T2、T3组(P＜0.05),T2组显著低于T1、T3组(P＜0.05).HE染色:NS组神经元结构完整,T1、T2、T3组均观察到神经元数量减少,不同程度的胆红素沉积.免疫组化:NS组NF-kB阳性细胞数明显少于T1、T2、T3组(P＜0.01),T2组明显少于T1组及T3组(P＜0.05).NS组逃避潜伏时间和穿过目标象限次数显著优于T1、T2、T3组(P＜0.05),T2组显著优于T1组及T3组(P＜0.05).结论 布拉氏酵母菌联合早期干预可有效地减少高胆红素血症仔鼠脑组织NF-kB表达,改善学习记忆功能.
