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血府逐瘀汤促血管新生中EphB4/ephrinB2信号通路的作用研究
目的:探讨EphB4/ephrinB2信号通路在血府逐瘀汤促血管新生中的作用.方法:运用血清药理学方法,以1.25％、2.5％、5％浓度的血府逐瘀汤含药血清和空白血清干预人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC-12)48h,通过MTT法、Boyden小室迁移法、细胞黏附法、逆转录PCR法分别检测细胞增殖、迁移、黏附、EphB4和EphrinB2基因表达的情况.结果:与同血清含量的对照组比较,5％浓度含药血清对细胞的增殖能力起抑制作用.1.25％、2.5％和5％3个浓度含药血清皆有显著的促内皮细胞迁移和黏附作用,并能抑制EphB4的表达,其中1.25％、2.5％浓度含药血清抑制EphrinB2的表达.结论:血府逐瘀汤通过促内皮细胞迁移和黏附发挥促血管新生作用,且该作用可能与EphB4/EphrinB2通路密切相关.
关键词： 血府逐瘀汤 EphB4/ephrinB2 血管新生 -
雌激素通过调节 EphB4／EphrinB2信号参与破骨细胞分化
目的：研究雌激素通过调节EphB4/EphrinB2信号通路对破骨细胞分化的影响。方法（1）采用RANKL诱导法培养卵巢摘除骨质疏松模型（OVX）组和假手术（Sham）组小鼠的破骨细胞，于第10天提取两组细胞的RNA和蛋白质样品，通过RT-PCR和Westernblot检测细胞EphrinB2表达的变化；（2）采用雌激素及雌激素拮抗剂分别诱导培养RAW264.7破骨细胞，培养第8天提取RNA和蛋白质样品，利用RT-PCR和Westernblot检测细胞EphrinB2表达的变化；（3）在OVX模型组小鼠的破骨细胞培养中添加EphrinB2配体EphB4-Fc片段，通过RT-PCR检测破骨细胞标志物的表达和抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色并计数，观察破骨细胞分化能力的变化。结果卵巢摘除骨质疏松模型组小鼠EphrinB2的表达量低于假手术组（P＜0.01）；雌激素拮抗剂组EphrinB2的表达量低于对照组（P＜0.01），而雌激素组EphrinB2的表达量高于对照组（P＜0.05）；给予EphrinB2的配体EphB4-Fc片段后，OVX组小鼠的破骨细胞标志物表达量降低（P＜0.01，P＜0.001），TRAP染色阳性细胞数减少。结论雌激素可以通过调节破骨细胞EphrinB2的表达影响破骨细胞分化，采用EphB4-Fc片段处理后，OVX组小鼠增强的破骨细胞分化受到抑制。
关键词： 雌激素 破骨细胞 EphB4/ephrinB2 -
sEphB4对糖尿病视网膜病变兔模型视网膜血管内皮细胞EphB4/EphrinB2和VEGF表达的影响
目的 探讨sEphB4对糖尿病视网膜病变兔模型视网膜血管内皮细胞EphB4/EphrinB2和VEGF表达的影响.方法 选8～10周的雄兔8只为实验对象,建立糖尿病视网膜病变兔模型.将所有DR兔的右眼作为药物干预组,为药物干预组,分别予sEphB4200、500、1000μg各50μL玻璃体腔注入.左眼作为对照组,予以生理盐水50μL玻璃体腔注入.每月注射1次,治疗6个月后,应用检测兔眼视网膜及玻璃体增殖膜EphB4、EphrinB2和VEGF的表达.结果 随着sEphB浓度的不断增加,EphB4、EphrinB2、VEGF水平逐渐降低,且均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 sEphB4可抑制糖尿病视网膜病变兔视网膜新生血管内皮细胞EphB4/EphrinB2和VEGF的表达.
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实验性正畸牙移动过程中EphB4/ephrinB2促成骨作用的研究进展
正畸治疗过程中,对牙齿施加相对缓慢而持久的轻力可通过牙周膜组织传导至牙槽骨,从而引起骨改建,达到牙齿移动的目的.机械张力作用于牙周膜成纤维细胞(PDLF)后激活ephrinB2,随后PDLF与邻近PDLF和成骨细胞通过EphB4/ephrinB2相互作用,两者协同促进成骨.本文简要介绍PDLF对张力产生应答后激活EphB4/ephrinB2并促进成骨相关机制的新进展.
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基因转染EphB4对脱落乳牙牙髓干细胞成骨分化的影响
目的:建立过表达EphB4的脱落乳牙牙髓干细胞(stem cells from human exfoliated deciduous teeth,SHED),观察其成骨分化能力的变化.方法:使用酶消化法分离、培养SHED,将第3代SHED分为2组,即病毒介导的EphB4基因转染SHED的实验组和空白荧光载体转染SHED的对照组.通过荧光显微镜、实时荧光定量PCR (real time-PCR)检测转染后SHED细胞中EphB4 mRNA的表达水平,Western印迹法检测转染后EphB4蛋白的表达量.成骨诱导4周后,使用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)试剂盒及茜素红染色测定转染后SHED的ALP活性改变和成骨能力变化.采用SPSS16.0软件包对数据进行统计学分析.结果:实时荧光定量PCR显示,实验组细胞中EphB4基因表达增高约8倍(P＜0.05),Western印迹法显示,实验组细胞中EphB4蛋白表达较对照组显著增高.成骨诱导4周后,ALP检测结果表明,基因转染EphB4,可显著促进SHED的ALP活性(P＜0.05),增高约2倍;茜素红染色显示,转染EphB4后,SHED成骨能力显著增强.结论:基因转染EphB4可显著促进SHED的成骨分化能力,为SHED成为骨组织工程中的种子细胞提供了依据.
关键词： 脱落乳牙牙髓干细胞 基因转染 EphB4/ephrinB2 成骨诱导 细胞分化 -
机械扩张力作用下小鼠腭中缝EphB4和ephrinB2表达的研究
目的 观察小鼠腭中缝在机械扩张力作用的不同阶段EphB4/ephrinB2分布和表达规律.方法 选用6周龄健康雄性C57BL/6小鼠40只,随机分成对照组和实验扩张组,每组各20只.用双眼簧扩弓器施加扩张力(0.56 N)于实验加力组小鼠的腭中缝区.实验组分别于加力后1、3、7、14 d抽取5只小鼠通过石蜡切片免疫组化对EphB4/ephrinB2进行组织定位,观察表达规律并与未施力的对照组比较.结果 扩张组EphB4/ephrinB2表达水平高于对照组,差异具有统计学意义.第3天实验组EphB4/ephrinB2表达水平表达高.结论 对小鼠腭中缝施加扩张力的情况下能够诱导EphB4/ephrinB2的表达增加,说明EphB4/ephrinB2在腭中缝扩张新骨改建过程中具有重要意义.
关键词： 机械扩张力 EphB4/ephrinB2 腭中缝 小鼠
