首页 > 文献资料
-
丹参促进人脱落乳牙牙髓干细胞神经分化的研究
目的 探讨中药丹参对人脱落乳牙牙髓干细胞(SHED)神经分化功能的影响.方法 利用不同浓度的丹参注射液和神经诱导培养基诱导SHED分化为神经元样细胞.通过观察SHED经诱导后细胞的形态变化和采用Real-Time PCR方法检测神经元标记蛋白Nestin、早期神经元标记蛋白Ⅲ-Tubulin、神经细胞粘附因子NCAM、神经分化因子NeuroD、辅助T淋巴细胞因子TH、NEF等的表达,来鉴定神经元样细胞.结果 丹参注射液诱导后SHED胞体收缩,突起伸出,形似神经元;Real-TimePCR结果显示丹参注射液促进神经元标记蛋白Nestin、早期神经元标记蛋白Ⅲ-Tubulin、神经细胞粘附因子NCAM、神经分化因子NeuroD、NEF的表达.丹参注射液联合神经培养基诱导SHED神经分化的佳丹参注射液浓度为50mg/ml.结论 中药丹参在一定浓度范围内可促进SHED向神经元样细胞分化.
-
丹参注射液促进人脱落乳牙牙髓干细胞成骨/成牙分化的实验研究
目的 探讨中药丹参对人脱落乳牙牙髓干细胞(SHEDs)成骨/成牙分化功能的影响.方法 利用50mg/ml的丹参注射液作用于SHEDs细胞,利用成骨/成牙分化诱导培养基诱导SHEDs定向分化.通过检测ALP活性、茜素红染色、钙离子定量分析、成骨/成牙分化相关基因的表达研究 SHEDs 体外成骨/成牙分化能力.Western Blot检测AKT信号分子的表达.结果 50mg/ml的丹参注射液促进SHEDs细胞ALP活性,体外矿化能力及成骨/成牙分化相关基因骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)、牙本质涎磷蛋白(Dentin sialophosphoprotein,DSPP)的表达.50mg/ml的丹参注射液促进磷酸化AKT的表达.结论 50mg/ml的丹参注射液具有促进SHEDs细胞体外成骨/成牙分化的潜能,其作用可能与激活AKT信号通路相关.
-
基因转染EphB4对脱落乳牙牙髓干细胞成骨分化的影响
目的:建立过表达EphB4的脱落乳牙牙髓干细胞(stem cells from human exfoliated deciduous teeth,SHED),观察其成骨分化能力的变化.方法:使用酶消化法分离、培养SHED,将第3代SHED分为2组,即病毒介导的EphB4基因转染SHED的实验组和空白荧光载体转染SHED的对照组.通过荧光显微镜、实时荧光定量PCR (real time-PCR)检测转染后SHED细胞中EphB4 mRNA的表达水平,Western印迹法检测转染后EphB4蛋白的表达量.成骨诱导4周后,使用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)试剂盒及茜素红染色测定转染后SHED的ALP活性改变和成骨能力变化.采用SPSS16.0软件包对数据进行统计学分析.结果:实时荧光定量PCR显示,实验组细胞中EphB4基因表达增高约8倍(P＜0.05),Western印迹法显示,实验组细胞中EphB4蛋白表达较对照组显著增高.成骨诱导4周后,ALP检测结果表明,基因转染EphB4,可显著促进SHED的ALP活性(P＜0.05),增高约2倍;茜素红染色显示,转染EphB4后,SHED成骨能力显著增强.结论:基因转染EphB4可显著促进SHED的成骨分化能力,为SHED成为骨组织工程中的种子细胞提供了依据.
关键词： 脱落乳牙牙髓干细胞 基因转染 EphB4/ephrinB2 成骨诱导 细胞分化 -
脱落乳牙牙髓干细胞的生物学特性
在乳恒牙交替过程中，乳牙不断脱落，即脱落乳牙牙髓干细胞（SHED）获取容易，且SHED较骨髓间质干细胞和牙髓干细胞有更强的细胞增殖能力。SHED含有的成纤维细胞生长因子、转化生长因子-β、结缔组织生长因子、神经生长因子、骨形态发生蛋白等促进SHED增殖。SHED可向成牙本质细胞、神经细胞、软骨细胞、脂肪细胞和肝细胞向分化及诱导宿主细胞分化为成骨细胞，还有免疫调节和促进伤口愈合功能，是理想的骨组织工程和皮肤组织工程种子细胞。有鉴于此，SHED在治疗牙体缺失、骨缺损，神经系统疾病和免疫系统疾病，皮肤外伤和肝脏疾病方面有着广泛的应用前景。
