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固本防哮饮含药血清对IL-4刺激的人胚肺成纤维细胞中ADAM33、ETS1表达的影响
目的:研究固本防哮饮含药血清对白细胞介素-4(IL-4)刺激的人胚肺成纤维细胞(MRC-5)中解整合素金属蛋白酶(ADAM)33和E26转录因子(ETS)1表达的影响,探讨其可能的抗哮喘作用机制.方法:制备固本防哮饮含药血清,以IL-4刺激MRC-5细胞,采用固本防哮饮含药血清进行干预,24h后收集细胞,Real-timeRT-PCR法检测各组细胞中ADAM33、ETS1 mRNA的表达;Western Blot法检测各组细胞中ADAM33、ETS1蛋白的表达;免疫荧光技术检测ADAM33和ETS1在细胞亚结构的定位及相对表达.结果:固本防哮饮含药血清能显著降低IL-4刺激的MRC-5细胞中ADAM33、ETS1 mRNA的高表达(P＜0.01),且孟鲁司特钠含药血清对ADAM33 mRNA的下调作用显著优于固本防哮饮组(P＜0.01),固本防哮饮含药血清对ETS1 mRNA的下调作用优于孟鲁司特钠组(P＜0.05).固本防哮饮含药血清能降低IL-4刺激的MRC-5细胞中ADAM33蛋白的高表达(P＜0.05)和ETS1蛋白的高表达(P＜0.01).ADAM33、ETS1蛋白主要在细胞膜和细胞质中表达,而固本防哮饮含药血清能显著降低IL-4刺激的MRC-5细胞中ADAM33、ETS1平均荧光强度(P＜0.01).结论:固本防哮饮可通过调控ADAM33、ETS1的表达,减轻气道高反应性以及气道重塑,防治支气管哮喘.
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原发性高血压患者动脉血管组织E26转录因子1及单核细胞趋化蛋白1的表达和临床意义
目的 观察E26转录因子1(Ets-1)及其下游靶基因的表达产物单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)在原发性高血压患者动脉血管组织中的表达,探讨其在原发性高血压患者血管重构中的作用.方法 收集2010-07-12安徽医科大学第三附属医院(合肥市第一人民医院)原发性高血压患者(高血压组,n=17)及正常血压者(正常血压组,n=16)手术废弃组织中的动脉血管,采用免疫组织化学法结合图像信号分析技术及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测动脉血管组织中Ets-1、MCP-1蛋白及mRNA的表达.结果 高血压组动脉血管组织中Ets-1[肠系膜动脉(186.4±2.4)比(102.8±1.9)；肋间动脉(153.4±2.0)比(101.2±1.6)]、MCP-1[肠系膜动脉(115.3±1.0)比(83.2±0.7)；肋间动脉(122.4±0.8)比(70.1±0.6)]蛋白及mRNA的表达明显高于正常血压组(均P＜0.05)；Pearson相关分析显示,高血压组动脉血管组织Ets-1与MCP-1 mRNA表达呈正相关(肠系膜动脉,r=0.87;肋间动脉,r=0.83,均P＜0.01).结论 与正常血压者相比,Ets-1和MCP-1在原发性高血压患者血管组织中的表达明显上调,两者的表达呈正相关.提示Ets-1、MCP-1在原发性高血压血管重构可能起重要作用.
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微小RNA-324对非小细胞肺癌细胞迁移侵袭及ETS1表达的影响
目的 探讨微小RNA-324(miR-324)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移和侵袭能力及E26转录因子1(ETS1)表达的影响.方法 采用实时荧光定量PCR(QPCR)比较正常支气管上皮细胞16HHE和NSCLC细胞H322中miR-324水平的差异,采用脂质体Lipofectamine 2000法将miR-324抑制物或模拟物分别转染至H322细胞(抑制组和过表达组),以仅转染脂质体的细胞为空转染组;QPCR检测转染48 h后各组的miR-324水平,采用CCK-8法检测各组转染24、48、72 h的增殖情况,采用Transwell法检测各组的迁移和侵袭能力,Western blotting检测各组的ETS1表达情况.结果 QPCR检测结果 显示H322细胞的miR-324水平为0.172±0.023,低于正常支气管上皮细胞16HBE的1.106±0.274,差异有统计学意义(P＜0.05).空转染组、抑制组和过表达组的miR-324水平分别为1.069±0.082、0.287± 0.034和7.114±0.726,与空转染组相比,过表达组的miR-324水平升高而抑制组的miR-324水平降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与空转染组相比,过表达组的增殖率降低而抑制组升高,差异有统计学意义(P＜0.05).Transwell检测结果 显示迁移实验中空转染组、抑制组和过表达组的穿膜细胞数分别为(472.3±35.6)个、(692.1±50.6)个和(341.7±37.5)个,侵袭实验中空转染组、抑制组和过表达组的穿膜细胞数分别为(392.1±40.5)个、(521.6±57.6)个和(228.3±31.6)个,与空转染组相比,抑制组的穿膜细胞数升高而过表达组的穿膜细胞数降低,差异有统计学意义(P＜0.05).转染组、抑制组和过表达组的ETS1蛋白水平为0.56±0.13,0.87±0.23和0.26±0.09,与空转染组相比,抑制组的ETS1水平升高而过表达组的ETS1水平降低(P＜0.05).结论 miR-324在NSCLC细胞中的表达下调并可抑制细胞增殖和侵袭迁移能力,发挥类似抑癌基因的作用,可能通过靶向转录因子ETS1表达来发挥作用.
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ORMDL3和Ets-1基因在反复喘息患儿外周血中的表达
目的 研究血清类黏蛋白1样蛋白3 (ORMDL3)和E26转录因子1(Ets-1)基因在反复喘息患儿外周血中的表达以及两者的相关性.方法 采用RT-PCR法检测非过敏性正常对照婴幼儿(A组,24例)和反复喘息患儿(B组,25例)外周血中ORMDL3和Ets-1 mRNA表达水平.结果 B组外周血ORMDL3和Ets-1 mRNA表达水平高于A组(P＜0.05);ORMDL3与Ets-1基因表达水平呈正相关(r=0.7704,P＜0.05).结论 ORMDL3和Ets-1基因的表达水平与患儿的反复喘息密切相关.
关键词： 血清类黏蛋白1样蛋白3 E26转录因子1 反复喘息 -
ETS-1、p53、VEGF、EGFR、HER-2、COX-2在胰腺癌中的表达
目的 研究胰腺癌组织中E26转录因子1(ETS-1)、p53、血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子受体(EGFR)、人类表皮生长因子受体2(HER-2)和环氧化酶2(COX-2)的蛋白表达及其与胰腺癌临床病理学特征的相关性.方法 收集40例胰腺癌患者组织标本,免疫组化SP法检测肿瘤组织中各蛋白表达水平.分析ETS-1蛋白表达与患者临床病理学特征的相关性和ETS-1蛋白表达与p53、VEGF、EGFR、HER-2、COX-2蛋白表达之间的相关性.结果 ETS-1、p53、VEGF、EGFR、HER-2、COX-2蛋白在胰腺癌组织中阳性表达率分别为65.0％、60.0％、37.5％、62.5％、37.5％、55.0％.ETS-1蛋白表达水平越高,脉管内癌栓发生率越高,肿瘤分期越晚(P＜0.05).胰腺癌中ETS-1蛋白呈高表达时,p53、COX-2蛋白也呈高表达状态(P＜0.05).结论 胰腺癌组织中存在 ETS-1、p53、VEGF、EGFR、HER-2、COX-2蛋白表达.ETS-1 高表达的胰腺癌患者肿瘤分期晚,预后差.ETS-1蛋白高表达促胰腺癌发生发展机制可能与p53、COX-2蛋白高表达相关.
