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微小RNA-324对非小细胞肺癌细胞迁移侵袭及ETS1表达的影响
目的 探讨微小RNA-324(miR-324)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移和侵袭能力及E26转录因子1(ETS1)表达的影响.方法 采用实时荧光定量PCR(QPCR)比较正常支气管上皮细胞16HHE和NSCLC细胞H322中miR-324水平的差异,采用脂质体Lipofectamine 2000法将miR-324抑制物或模拟物分别转染至H322细胞(抑制组和过表达组),以仅转染脂质体的细胞为空转染组;QPCR检测转染48 h后各组的miR-324水平,采用CCK-8法检测各组转染24、48、72 h的增殖情况,采用Transwell法检测各组的迁移和侵袭能力,Western blotting检测各组的ETS1表达情况.结果 QPCR检测结果 显示H322细胞的miR-324水平为0.172±0.023,低于正常支气管上皮细胞16HBE的1.106±0.274,差异有统计学意义(P＜0.05).空转染组、抑制组和过表达组的miR-324水平分别为1.069±0.082、0.287± 0.034和7.114±0.726,与空转染组相比,过表达组的miR-324水平升高而抑制组的miR-324水平降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与空转染组相比,过表达组的增殖率降低而抑制组升高,差异有统计学意义(P＜0.05).Transwell检测结果 显示迁移实验中空转染组、抑制组和过表达组的穿膜细胞数分别为(472.3±35.6)个、(692.1±50.6)个和(341.7±37.5)个,侵袭实验中空转染组、抑制组和过表达组的穿膜细胞数分别为(392.1±40.5)个、(521.6±57.6)个和(228.3±31.6)个,与空转染组相比,抑制组的穿膜细胞数升高而过表达组的穿膜细胞数降低,差异有统计学意义(P＜0.05).转染组、抑制组和过表达组的ETS1蛋白水平为0.56±0.13,0.87±0.23和0.26±0.09,与空转染组相比,抑制组的ETS1水平升高而过表达组的ETS1水平降低(P＜0.05).结论 miR-324在NSCLC细胞中的表达下调并可抑制细胞增殖和侵袭迁移能力,发挥类似抑癌基因的作用,可能通过靶向转录因子ETS1表达来发挥作用.
