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糖克煎剂对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠TNF-α及GLUT4在组织中表达的影响
目的:研究糖克煎剂对2型糖尿病胰岛素抵抗模型大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及葡萄糖转运体4(GLUT4)在组织中表达的影响,探讨糖克煎剂对胰岛素抵抗的作用机制.方法:用链脲佐菌素(STZ)加高热量饲料的方法复制出大鼠模型,分别用中药复方糖克煎剂和罗格列酮作用于模型大鼠;用胰岛素敏感指数(ISI)衡量胰岛素抵抗程度;用RT-PCR法检测脂肪组织中TNF-α mRNA的表达水平;用免疫组化ABC法观测骨骼肌组织中GLUT4的表达水平,并用电镜观察其在骨骼肌细胞中的分布情况. 结果: 模型组ISI明显低于正常对照组(P＜0.05),治疗组ISI与模型组相比均明显提高(P＜0.05);模型组脂肪组织中TNF-α mRNA的表达明显高于正常对照组和治疗组(P＜0.01);免疫组化发现骨骼肌组织中GLUT4的蛋白表达各组间差异无显著性,但电镜观察显示正常对照组的GLUT4阳性颗粒多靠近骨骼肌细胞膜边缘,而模型组的GLUT4阳性颗粒靠近骨骼肌细胞膜边缘者则明显减少. 结论:糖克煎剂可能通过减少TNF-α和增加GLUT4的转位而非影响其蛋白水平而改善胰岛素抵抗.
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糖克煎剂对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠TNFα及胰岛素信号转导的影响
1 材料与方法1.1 材料Wistar雄性大鼠、基础和高热量饲料均由辽宁中医学院实验动物中心提供;STZ为Sigma公司产品;糖克煎剂由党参、黄连、茯苓等中药组成;罗格列酮为史克必成公司产品;拜安易血糖仪、拜安易血糖试纸为拜耳公司产品;125I-胰岛素放射免疫分析药盒购自中国原子能科学研究院;RT-PCR试剂盒购自大连宝生物公司;TNFα、β-actin引物的合成及Trizol购自上海生工生物公司;Poly(Glu:Tyr 4∶1)购自Sigma公司;γ-32 P-ATP购自亚辉生物医学工程公司;单组分猪胰岛素购自上海生物制药厂;自动电泳凝胶成像分析仪Chemi Imager 5500(UVP公司);P81Whatman滤纸(Whatman公司);LS2000液闪仪(BECKMAN公司).
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糖克煎剂治疗早期糖尿病肾病临床研究
糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病(diabetes mellitus,DM)微血管病变之一,早期表现为尿中排出微量白蛋白,后进展为慢性肾功能不全,严重影响患者的生存质量.早期治疗可控制病情发展,降低病死率.本研究观察糖克煎剂治疗早期DN的临床疗效,现报道如下.
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糖克煎剂对糖尿病大鼠肾组织TGF-β1表达的影响
目的:观察并探讨具有祛痰化瘀作用的中药复方糖克煎剂对实验性糖尿病大鼠肾组织中转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响.方法:雄性Wistar大鼠78只,一组予普通饲料喂养,其余5组予高糖高脂饲料喂养,1个月后经尾静脉1次性注射链脲佐菌素(STZ)造成糖尿病及痰浊血瘀中医证候模型.应用具祛痰化瘀作用的中药复方糖克煎剂分别在造模成功及成模后4周灌胃给药,并设立洛汀新组为西药对照组.检测大鼠肾组织中TGF-β1 mRNA的表达.结果:糖克煎剂可抑制模型大鼠肾皮质TGF-β1mRNA的基因表达,糖克预防组疗效优于糖克治疗组.结论:中药复方糖克煎剂能够预防和治疗大鼠早期糖尿病肾病,其机制可能与抑制组织中TGF-β1的过度表达有关.
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糖克煎剂对大鼠糖尿病肾病早期滤过率影响的实验研究
目的：观察糖克煎剂对大鼠糖尿病肾病早期滤过率影响。方法：用高脂饲料喂养大鼠1个月后经尾静脉1次性注射链脲佐菌素(STZ)造成糖尿病及痰浊血瘀中医证候模型。应用具祛痰化瘀作用的中药糖克煎剂分别在造模成功及成模后1周灌服4周，并设立参芪组，开搏通组为阳性药对照组，造模后及实验结束检测大鼠空腹血糖，实验后检测尿微量白蛋白(AIb)、血脂、血流变、肾小球滤过率等。结果：糖克煎剂有降低血糖、尿微量白蛋白排出作用，改善高粘状态，降低血脂、降低肾小球滤过率，其作用优于对照组。结论：糖克煎剂有防治糖尿病早期肾病的作用。
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糖克煎剂对2型糖尿病模型大鼠胰岛素抵抗的影响
目的:研究糖克煎剂对2型糖尿病模型大鼠胰岛素抵抗的影响,探讨中医药对2型糖尿病的治疗作用.方法:用小剂量链脲佐茵素(STZ)加高热量饲料的方法复制出2型糖尿病大鼠模型,分别用中药复方糖克煎荆和罗格列酮作用于模型大鼠;检测实验大鼠的血糖、空腹胰岛素(FINS),用胰岛素敏感指数(ISI)衡量胰岛素抵抗程度.结果:模型组ISl明显低于正常对照组(P<0.05),治疗组ISI与模型组相比均明显提高(P<0.05).结论:糖克煎剂可通过改善胰岛素抵抗而治疗2型糖尿病模型大鼠.
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糖克煎剂经miR-21/Tgfb1/Smad信号转导延缓糖尿病肾病肾脏纤维化
目的:探讨糖克煎剂对糖尿病肾损伤模型大鼠肾脏miR-21和Smad家族蛋白的影响.方法:选取50只雄性大鼠,随机选取10只作为空白对照组.其余大鼠采用一次性尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)复制痰浊血瘀型糖尿病大鼠(DN)模型,并随机分为模型组、福辛普利钠0.9 mg/kg组、糖克煎剂4.5、18 g/kg剂量组灌胃给药,每日一次.观察各组大鼠的一般情况;监测血糖、体重、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)及24h尿蛋白水平;HE染色,光镜下观察肾组织形态学的改变;Western-blot法分别检测肾脏组织中Tgfb1、Smad3、Smad7、Vegf和Fn1的蛋白表达水平;实时荧光定量PCR检测肾脏组织miR-21、Smad3、Smad7、Fn1基因mRNA的表达;免疫组化法检测Smad3和Smad7蛋白在肾脏组织中分布及表达情况.结果:与模型组比较,糖克煎剂可改善DN大鼠肾指数;降低血糖、BUN、Scr及24h尿蛋白水平;光镜下肾组织病理形态得到显著改善;并可下调Smad3、Fn1的mRNA水平和miR-21表达;下调Smad3、Vegf、Tgfb1和Fn1的蛋白表达;而Smad7的mRNA及蛋白水平则出现不同程度增加.免疫组化结果与Western-blot检测结果相一致.结论:糖克煎剂可通过调控miR-21/Smad信号转导,进而调控DN大鼠肾组织Tgfb1表达,延缓糖尿病肾病肾脏纤维化进程,起到肾脏保护作用有关.
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糖克煎剂对糖尿病肾病大鼠肾脏miR-192信号通路的影响
目的:探讨糖克煎剂对糖尿病肾病大鼠肾脏miR-192信号通路的影响.方法:大鼠一次性尾静脉注射链脲佐菌素30mg/kg建立糖尿病模型,随机分为模型组、糖克煎剂4.5g/kg预防组、糖克煎剂4.5g/kg、18g/kg剂量组、福辛普利钠片组(0.9mg/kg),选取同龄大鼠作为正常对照组.测定血糖、24h尿蛋白、左肾重、肾重/体重比、BUN、Scr、TC、TG水平,HE染色观察肾脏组织病理变化,QRT-PCR法检测肾组织TGF-β1、miR-192、SIP1、Col1a2 mRNA的表达,Western-blot法检测肾脏中TGF-β1、SIP1、Collagen Ⅰ蛋白的表达.结果:与模型组相比,糖克煎剂4.5g/kg预防组、糖克煎剂4.5g/kg、18g/kg剂量组和福辛普利钠片组24h尿蛋白量、左肾重、肾重/体重比、BUN、Scr、TC、TG显著降低,肾小球基底膜增厚、系膜增生等病理损害得到改善,肾脏TGF-β1、miR-192、Col1a2mRNA表达减少,SIP1mRNA及蛋白表达增高,肾脏TGF-β1、Collagen Ⅰ蛋白表达降低,糖克煎剂18g/kg剂量组效果更好.结论:糖克煎剂能够治疗糖尿病肾病,其保护肾脏的机制可能与抑制miR-192信号通路相关.
