首页 > 文献资料
-
HPLC-ELSD测定地黄不同炮制品中单糖含量
目的:建立HPLC-ELSD测定地黄不同炮制品中单糖含量方法,研究不同炮制方法对熟地黄单糖含量的影响.方法:采用高效液相色谱法,以蒸发光散射检测器进行检测,Prevail carbohydrate ES色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(75∶25),流速0.8 mL· min-1,柱温30℃,ELSD条件漂移管温度65℃,空气流速2.5 L·min-1,增益1.结果:D-葡萄糖平均回收率为98.24％,RSD 2.18％；D-果糖平均回收率为98.37％,RSD 2.11％；生地、炆制地黄、清蒸地黄、酒炖地黄中单糖含量分别为1.62％,(27.22±2.74)％,(9.63±2.05)％,(16.97±2.62)％.结论:该方法操作简便,可靠稳定,结果准确；地黄炮制品中单糖含量远远高于生地黄,炆制地黄中单糖含量高于其他两种炮制方法,为阐明其炮制机理提供实验依据.
关键词： 高效液相色谱-蒸发光散射检测法 熟地黄 炆制法 D-葡萄糖 D-果糖 -
高脂血症促使大鼠急性胰腺炎胰腺腺泡由凋亡趋向坏死
目的 通过建立高脂血症性急性胰腺炎大鼠模型,探讨高脂血症可能加重急性胰腺炎病程的机制.方法 D-果糖饮食诱导SD大鼠的产生高脂血症,在此基础上通过腹腔注射蛙皮素诱导急性胰腺炎,并且设立正常组、高脂血症组和急性胰腺炎组作为对照.8周后,取大鼠血浆检测血糖、血脂和游离脂肪酸等指标;收集大鼠胰腺以及胰周组织,检测组织匀浆中ADP与ATP比值,通过Western blot法检测组织中caspase-3和caspase-8等蛋白以及其底物的表达情况,对组织切片进行HE染色并通过TUNEL法分析组织凋亡和坏死的情况.结果 高脂血症性急性胰腺炎大鼠的血浆中血脂、游离脂肪酸等指标偏高;caspase-3和caspase-8活性片断表达下调,而其底物蛋白降解较少;TUNEL分析阳性率偏低,以上提示胰腺组织凋亡蛋白活性受到一定的抑制;另外,ADP与ATP比值相对较高,提示胰腺组织更易产生坏死反应.结论 笔者推测高脂血症可能通过促进大鼠胰腺组织由凋亡趋向坏死,从而加重急性胰腺炎病变程度.
-
麦芽炒制过程中炒制温度和时间对糖类成分的影响
目的 建立麦芽中D-果糖、D-葡萄糖、蔗糖、D-麦芽糖4种糖类成分高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)检测方法,探索麦芽炒制过程中还原糖和非还原糖的动态变化规律,为阐明麦芽消食作用机制提供科学依据.方法 收集不同炒制温度、不同炒制时间的麦芽,采用HPLC-ELSD方法测定生麦芽、炒麦芽样品中D-果糖、D-葡萄糖、蔗糖、D-麦芽糖4种糖类成分的量,采用聚类分析(HCA)法、偏小二乘判别分析(PLS-DA)法分析炒制过程中各成分的动态变化规律.结果 麦芽中D-果糖、D-葡萄糖、D-麦芽糖3种还原糖的量随温度增加整体表现为下降趋势,而非还原糖蔗糖表现为先升高后降低的趋势;HCA可将不同温度下炒制的麦芽分为3类,PLS-DA表明炒制温度主要影响蔗糖的量,而对还原糖D-果糖、D-葡萄糖、D-麦芽糖影响较小且程度相当;随着炒制时间的延长,4种糖的量均呈降低趋势,16 min后基本不再变化.HCA可将不同炒制时间的麦芽分为4类;标准化A420值随炒制时间的增加而增加,在16min基本达到峰值.结论 麦芽在炒制过程中还原糖、非还原糖与氨基酸等成分直接或间接发生美拉德(Maillard)反应而导致其量的下降,其产物可能与麦芽消食作用有关.
-
托吡酯合成工艺研究
目的 合成托吡酯并对工艺进行研究.方法 以D-果糖为起始原料,在浓硫酸的催化下,与丙酮缩合生成双丙酮果糖,再同氯磺酸异氰酸酯反应采用“一锅法”制备,得到托吡酯.结果 本工艺总收率为43.3％.结论 工艺改进后,简化了操作过程,提高了托吡酯的收率.
-
果糖制备的糖基化终末产物对大鼠离体血管环舒张功能的损伤作用及氯沙坦的保护机制
目的 观察果糖制备的糖基化终末产物对大鼠离体血管环内皮依赖性舒张反应的损伤以及氯沙坦的保护作用和机制.方法 用果糖和牛血清白蛋白(BSA)共同孵育制备AGEs；用离体血管环灌流的方法,观察不同浓度氯沙坦对AGEs引起的血管内皮依赖性舒张反应的保护作用；检测血管环中eNOS和AKT的磷酸化表达及NO含量.结果 果糖和BSA共同孵育6d后可得到AGEs,且AGEs可引起血管环对乙酰胆碱诱导的舒张反应下降；10 μmol/L和50μmol/L的氯沙坦均可改善内皮依赖的舒张反应.AGEs还明显降低血管环中NO含量和eNOS及AKT磷酸化水平,氯沙坦可恢复上述指标.结论 果糖制备的AGEs能降低血管环内皮依赖性舒张反应,而氯沙坦则具有保护作用,其机制与阻断血管内皮细胞AT1受体、活化AKT激酶而改善内皮eNOS活性和降低NO生成有关.
-
HPLC-ELSD法同时测定生白术中的D-果糖、D-葡萄糖和蔗糖
目的 建立HPLC-ELSD法同时测定生白术中D-果糖、D-葡萄糖和蔗糖的含有量,并对不同产地(浙江、安徽和湖北省)及批次药材中的这3种成分进行分析.方法 生白术提取物的分析采用Waters XBridgeTM Amide色谱柱(4.6mm×250mm,3.5 μm);流动相为乙腈-水(80:20);体积流量1.0 mL/min;柱温40 ℃.质谱测定采用电喷雾离子源(ESI)的飞行时间质谱(TOF/MS);负离子模式;质量扫描范围m/z 50～ 800.结果 D-果糖在7.943～18.53 μg、D-葡萄糖在0.583 5 ～1.362μg、蔗糖在1.415 ～3.302 μg范围内均呈良好的线性关系(r＞0.998),其平均回收率分别为101.4％、100.1％、102.0％,RSD分别为1.3％、1.8％、1.3％(n=9).在10批生白术药材中,D-果糖含有量为9.946～45.83 mg/g、D-葡萄糖为1.198～7.743 mg/g、蔗糖为5.231 ～ 15.76 mg/g.结论 不同产地及批次生白术中的含有量依次为D-果糖＞蔗糖＞D-葡萄糖,并且差异较明显.
-
氨基胍抑制高果糖诱导脑血管平滑肌细胞增殖的作用和机制
目的 研究氨基胍对高果糖诱导的大鼠脑基底动脉血管平滑肌细胞增殖的影响和机制.方法 原代培养大鼠脑基底动脉血管平滑肌细胞,用CCK8法测定不同浓度(50、100 μmol/L)氨基胍对15和30 mmol/L果糖预诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响.western blotting方法检测高果糖刺激后AKT以及JNK激酶表达的变化；以及检测不同浓度氨基胍预处理后对上述指标的影响.结果 高果糖(30 mmol/L)显著促进大鼠脑基底动脉血管平滑肌细胞增殖(0.768±0.032比0.374±0.054,P＜0.01),在给予不同浓度(50、100μmol/L)氨基胍后,平滑肌细胞增殖明显下降(0.584±0.063和0.387±0.031比0.768±0.032,P＜0.01).高果糖还明显刺激AKT以及JNK蛋白的表达,而给予氨基胍后可有效抑制上述蛋白表达.结论 高果糖可诱导脑基底动脉血管平滑肌细胞增殖,而氨基胍可能通过抑制MAPK以及PI3K信号途径改善高果糖对平滑肌的增殖作用.
