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女儿茶HPLC指纹图谱及清除自由基活性谱效关系
目的:研究女儿茶Rhamnus heterophylla HPLC指纹图谱与其清除自由基活性的关系.方法:采用高效液相色谱法建立8批不同产地、采收期女儿茶指纹图谱,在传统相似度评价基础上,采用Origin Pro 2017软件进行层次聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)和主成分分析(principal component analysis,PCA)对其指纹图谱中的共有峰进行评价;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法研究其清除自由基活性;偏小二乘回归分析(partial least squares regression,PLSR)和灰色关联度分析(grey relational analysis,GRA)研究谱效关系.结果:建立了8批女儿茶HPLC指纹图谱,确定了11个共有峰,相似度在0.948～0.976.采用对照品比对方法指认了其中6个峰:x1为原儿茶酸,x2为木犀革苷,x5为槲皮素,x8为山柰酚,x10为大黄素8-O-α-L-鼠李糖苷,x11为大黄素.样本可聚为4类.8批女儿茶均有不同程度清除自由基活性.灰色关联度分析结果显示共有峰与清除自由基活性的关联度大小为x11＞x10＞x8＞x1＞x9＞x4＞x3＞x2＞x6＞x5＞x7.偏小二乘回归分析建立的回归方程为Y=99.769 17-0.357 49x1-0.001 36x2-0.002 65x3+0.059 63x4+0.011 81x6 +0.010 63x7-0.006 99x8-0.009 14x9 +0.054 27x10 +0.022 75x11.结论:女儿茶清除自由基活性是多组分联合效应的结果.
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均匀设计-偏小二乘回归结合因子分析探索大黄-厚朴组分配伍的规律
目的:采用均匀设计和偏小二乘回归结合因子分析考察大黄-厚朴中大黄素、芦荟大黄素、厚朴酚及和厚朴酚4种成分的组方配伍规律.方法:健康雄性SD大鼠160只,随机分为8个组,依次为假手术组、模型组及四因素六水平均匀设计的6个配方组.胰胆管内逆行注射3.5％牛磺胆酸钠法建立急性胰腺炎大鼠模型.术后6,24 h分别检测血清淀粉酶(AMS),胰脂肪酶(PL),白细胞介素-6(IL-6),IL-10,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量变化.偏小二乘回归分析探索各因素对各药效指标的影响规律,因子分析抽提多项指标中的公共因子.结果:各组分对急性胰腺炎病症的贡献度排序为厚朴酚＞和厚朴酚＞大黄素＞芦荟大黄素.因子分析抽提出隐藏在多项指标后的公共因子为胰腺损伤因子(AMS,IL-6和TNF-α)和炎症因子(PL和IL-10).结论:采用均匀试验设计、偏小二乘回归结合因子分析可有效地分析组分配伍中多因素与多效应成分之间的关联规律,为临床病症的治疗提供方-症更为对应的组分配方.
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酒女贞子抗氧化谱效关系研究
目的 对酒女贞子特征图谱与抗氧化活性的相关性进行研究,确定酒女贞子抗氧化活性物质基础.方法 运用HPLC测定经典恒温加速试验处理的酒女贞子的特征图谱,并通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2'-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐(ABTS)和FRAP法测定其抗氧化活性,运用偏小二乘回归分析法进行数据分析,探究酒女贞子量化特征图谱和抗氧化活性的相关性,筛选活性化合物相关色谱峰.结果 从17个匹配特征图谱中筛选出峰1、峰3、峰8、峰10、峰14和峰15与酒女贞子清除DPPH自由基、ABTS自由基能力呈显著正相关;峰3、峰8、峰12和峰13与酒女贞子还原Fe3+能力显著正相关.其中峰3和峰8与酒女贞子清除DPPH自由基、ABTS自由基和还原Fe3能力均正相关.并确定了峰3为红景天苷、峰12为木犀草苷、峰13为特女贞苷、峰14为橄榄苦苷、峰15为女贞苷、峰17为木犀草素.结论 酒女贞子药效不是由特女贞苷和红景天苷等个别指标成分的含量而决定.全面分析与药效相关的化合物群组的含量才能真实反映酒女贞子的质量.
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基于偏小二乘回归分析的钩藤总碱和莱菔子总碱组分配伍优化研究
目的 以钩藤总碱和莱菔子总碱有效组分的降血压效应为研究对象,探索中药组分配伍及优化设计的研究方法.方法 按照“正交设计-药效测定-偏小二乘回归建模”的程序,以收缩压为指标,采用正交设计优化钩藤总碱和莱菔子总碱的配比,对其数据进行极差分析、方差分析、多元回归分析和偏小二乘回归分析.结果 根据多元回归分析和偏小二乘回归分析,考虑经济成本,钩藤总碱和莱菔子总碱的佳配比为钩藤总碱25μg/g配伍莱菔子总碱30 μg/g.结论 钩藤总碱和莱菔子总碱的组分配伍能够有效降低血压.采用正交设计结合偏小二乘回归分析的方法,能够消除各因素的交互作用,非常适用于中药的组分配伍及优化设计.
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偏小二乘回归分析在医学中的正确应用
偏小二乘法是由瑞典经济计量学家Herman Wold于1966年首次提出.1983年由伍德(S.Wold)、阿巴诺(C.Albano)等人提出了一种新型多元统计分析方法--偏小二乘回归(partial least-squares regression,简称PLS)[1],密西根大学的弗耐尔(Fornell)教授称偏小二乘回归为第二代回归分析方法.
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大承气汤配伍治疗急性胰腺炎的实验研究
目的:寻找大承气汤治疗急性胰腺炎的佳药味配伍与药味重要性.方法:构建大鼠急性胰腺炎模型,利用均匀设计法得到大承气汤的10个配伍,检测血清Ca2+、血清淀粉酶、白介素-6、白介素-10、淋巴细胞功能关联抗原la、胰脂肪酶、肺脏指数,进行因子分析,寻找其中起支配作用的因子.对药味以检测指标进行偏小二乘回归分析,寻找大承气汤治疗急性胰腺炎的佳药味及配伍.结果:因子分析发现,所测指标可分为炎症因子和脏器因子两类.在大承气汤中,厚朴为主要药味,大黄次之,其佳配伍为大黄:厚朴=8.85:11.80(g生药·kg-1).结论:大承气汤治疗急性胰腺炎应重用厚朴和大黄.
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薏苡仁水溶性蛋白提取工艺的优化
目的:优化薏苡仁水溶性蛋白提取工艺.方法:用半胱氨酸盐酸盐溶液在碱性条件下提取薏苡仁蛋白,对影响蛋白提取的因素进行单因素考察.结合单因素考察结果,选取浸提温度、浸提pH、料液比、浸提时间设计4因素3水平的正交试验,分析各因素对结果的影响及因素间交互作用.结果:薏苡仁水溶性蛋白佳提取工艺为:浸提温度40 ℃,浸提pH 10,料液比1∶20,浸提时间4h.温度与料液比、温度与时间的交互作用会降低蛋白浸提率.结论:优化后的提取工艺经济简单,稳定可行.
