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Aβ25-35刺激对海马神经细胞株NG108-15Toll样受体3、4表达的影响
目的:研究Aβ刺激对小鼠神经细胞株NG108-15 Toll样受体(TLR)3、TLR4 mRNA表达的影响.方法:Aβ刺激NG108-15细胞,24 h后,取细胞培养上清液,ELISA法测定炎症因子TNF-α、IFN-β含量,荧光定量PCR法测定TLR3、TLR4mRNA表达量的变化.结果:Aβ诱导NG108-15细胞分泌TNF-α、IFN-β的量较正常对照组明显增多(均P<0.01);Aβ可诱导NG108-15细胞TLR3、TLR4 mRNA表达增强,与空白对照组相比,均P<0.01.结论:Aβ刺激可体外诱导NG108-15细胞TNF-α、IFN-β分泌增多,诱导TLR3、TLR4 mRNA表达增强,提示Aβ致阿尔茨海默病(AD)作用可能与免疫性炎症及TLRs信号转导通路有关.
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左旋硝基精氨酸甲酯和地佐环平和硝苯地平对吗啡致NG108-15细胞内钙浓度变化的影响
目的探讨一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂地佐环平(MK-801)和钙通道阻滞剂硝苯地平对吗啡作用的影响是否与细胞[Ca2+];有关.方法体外培养NG108-15细胞,用荧光指示剂Fura2-AM负载,荧光分光光度计动态测定细胞[Ca2+]i.结果吗啡、MK801 10 μmol·L-1、硝苯地平1,2和3μmol·L-1急性处理能降低由NMDA刺激(模拟兴奋性刺激)所致的细胞[Ca2+]i升高.MK-801 10μmol·L-1和硝苯地平3μmol·L-1与吗啡合用均能完全对抗NMDA的作用.吗啡处理细胞48 h后,再用纳洛酮处理,细胞[Ca2+]i可增加约39%,L-NAME,MK-801和硝苯地平与吗啡合用均能降低纳洛酮引起的细胞[Ca2+]i的升高.结论MK-801,L-NAME和硝苯地平对吗啡调节的作用均与胞内Ca2+浓度的变化密切相关.
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高效液相色谱法测定大鼠脑和NG108-15细胞内胍丁胺含量
目的建立测定大鼠不同脑区和NG108-15细胞内源性胍丁胺含量的方法.方法用高效液相色谱荧光检测法测定大鼠不同脑区(包括皮层、海马、丘脑、纹状体和小脑)及NG108-15细胞内胍丁胺含量.结果正常大鼠不同脑区胍丁胺的含量范围为0.8~1.71 μg*g-1湿脑组织;NG108-15细胞内含量为0.044 mg*g-1蛋白.结论此法适于常规测定动物脑组织及培养细胞内的胍丁胺含量.