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三七总皂苷对脑出血大鼠凝血酶及神经功能的影响
目的：研究三七总皂苷对脑出血大鼠凝血酶及神经功能影响。方法：SD雄性大鼠200只随机分为空白组、假手术组、模型组、用药组，每组又有6 h，24 h，48 h，72 h，7天5个时间点。空白组每组5只，其余每组每个时间点10只大鼠。采用尾壳核注入胶原酶肝素生理盐水溶液法建立大鼠脑出血模型，治疗组给予三七总皂苷腹腔注射，每天一次。在相应时间点，采用改良的神经功能缺损评分（ Modified neurological severity score ，mNSS）对实验动物造模后各时间点神经功能缺损进行评价。结果：各时间点模型组mNSS和空白组假手术组比，明显升高，差异有统计学意（P＜0.05），除6 h外，各时间点模型组和用药组比，用药组mNSS明显降低，差异有统计学意义（ P＜0.05）。测定纤维蛋白原含量和纤维蛋白原凝血时间，纤维蛋白原含量和纤维蛋白原凝血时间48 h模型组和用药组差异有统计学意义（ P＜0.05）。结论：脑出血模型组中，6 h开始，mNSS明显增高，到48 h达到高峰，以后逐渐下降，三七总皂苷可以明显下调mNSS评分。纤维蛋白原含量和纤维蛋白原凝血时间在模型组升高，用药组下降，说明三七发挥了发挥了活血行淤作用。
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脑创伤大鼠外周血白细胞线粒体DNA拷贝数与神经功能损伤程度的相关性
目的 探索脑创伤(traumatic brain injury,TBI)后外周血白细胞线粒体DNA拷贝数变化与神经功能损伤程度的相关性.方法 按随机数表法将40只SD大鼠分为4组:对照组(10只)、轻度TBI组(10只)、中度TBI组(10只)、重度TBI组(10只),采用皮质撞击致伤法构建不同损伤程度TBI大鼠模型;TBI后24 h、48 h、72 h进行神经功能评分(mNSS、网屏实验、旷场实验),在每次神经功能评分完成后行眶下静脉丛取血,提取基因组DNA,real-time PCR法测量相对线粒体DNA拷贝数;实验完成后大鼠安乐死,取脑组织做HE染色.结果 脑组织病理HE检测结果实验各组之间均差异有统计学意义(P＜0.05).各组大鼠TBI后外周血线粒体DNA拷贝数在24 h(9.63±3.62)和48 h(9.80±3.58)时升高,在72 h(4.97±2.68)时开始下降(P＜0.05);在大鼠mNSS评分在TBI后24 h(r=0.578,P＜0.05)和48 h(r=0.559,P＜0.05)与线粒体DNA拷贝数均正相关,TBI后72 h(r=0.487,P＞0.05)不相关;网屏实验评分在TBI后24 h(r=0.573,P＜0.05)和48 h(r=0.501,P＜0.05)与线粒体DNA拷贝数均正相关,TBI后72 h(r=0.273,P＞0.05)不相关;旷场实验的水平评分在TBI后24 h(r=-0.662,P＜0.05)和48 h(r=-0.507,P＜0.05)与线粒体DNA拷贝数均负相关,TBI后72 h(r=-0.410,P＞0.05)不相关;旷场实验的垂直评分在TBI后24 h(r=-0.683,P＜0.05)和48 h(r=-0.607,P＜0.05)与线粒体DNA拷贝数均负相关,TBI后72 h不相关(r=-0.141,P＞0.05).结论 TBI早期外周血白细胞线粒体DNA拷贝数与大鼠神经功能损伤程度具有一定相关性,外周血白细胞线粒体DNA拷贝数有可能成为临床评估TBI神经功能损伤程度的一个潜在生物标志物.
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大鼠骨髓基质细胞脑池移植对创伤性脑损伤的治疗效应的研究
目的探索大鼠骨髓基质细胞移植到创伤性脑损伤(TBI)大鼠枕大池后,对局部脑创伤组织NGF和BDNF基因表达以及对大鼠行为恢复的影响.方法从SD大鼠的后肢骨髓分离培养rMSCs.设立单纯脑创伤大鼠组(18只),脑创伤大鼠生理盐水对照组(18只),脑创伤大鼠细胞移植组(18只).分别处理后在第1、2、3周抽提特定脑组织块的总RNA,以半定量RT-PCR方法扩增靶基因(NGF和BDNF)和内参基因(β actin 1和β actin 2)并测定各实验组靶基因相对表达强度,并且各组分别在移植后第24小时、1、2、3周以modified neurological severity score(mNSS)评分法评估各组大鼠的神经运动功能.统计学分析采用配对t检验.结果获得稳定传代的rMSCs.共获得108份PCR产物.在第1、2周,TBI大鼠细胞移植组两个靶基因的相对表达强度都比TBI大鼠生理盐水对照组高,在第3周,各实验组靶基因相对表达强度没有差异(P＜0.05).在移植后第2周和第3周,TBI大鼠细胞移植组的mNSS评分比对照组均低(P＜0.05).结论骨髓基质细胞经蛛网膜下腔移植到TBI大鼠后能在不少于2周的时间内促进局部脑源性神经营养因子的表达,并且能够改善脑创伤大鼠神经感觉运动功能的恢复.
