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养阴活胃合剂对CAG大鼠胃黏膜细胞TLRs及相关信号转导通路的影响
目的:观察养阴活胃合剂对CAG大鼠胃黏膜细胞TLRs及其信号转导通路的影响,揭示养阴活胃合剂治疗CAG的治疗途径与作用靶点,分别从分子水平、蛋白水平阐述养阴活胃合剂治疗CAG的作用机制,并通过测定炎症因子的变化情况观察养阴活胃合剂在抗炎方面的作用.方法:将实验动物随机分为6组:空白对照组、模型组、阳性药物对照组及中药低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组16只.除空白对照组常规饲养、自由进食水之外,其余5组将2 g水杨酸钠加入100 mL的30％乙醇溶液中,给大鼠灌胃,1次/d,3 mL/次,配合隔日喂食不禁水法建立大鼠萎缩性胃炎模型,模型复制成功后中药治疗低、中、高剂量组分别喂饲养阴活胃合剂水煎剂0.74g/kg·d、1.48g/kg·d和2.22g/kg·d.12周后测定血清中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-β(IFN-β)诱导型一氧化氮合成酶(NOS2)四种炎症因子含量,测定TLRs及其下游转导元件mRNA及蛋白的含量.结果:养阴活胃合剂能够改善大鼠胃黏膜病理状态,使病变胃黏膜趋于正常.与空白对照组比较,各组炎症因子及TLRs及其下游信号转导元件蛋白及mRNA含量均明显升高(P＜0.05),证明模型复制成功.与模型组相比,中药高剂量组TNF-α、IL-6、NOS2含量均明显降低,阳性药物对照组及各中药剂量组对TLRs及其下游信号转导元件蛋白及mRNA含量均有不同程度的降低,差异有统计学意义(P＜0.05).而各养阴活胃剂量组之间比较,中药中剂量组IFN-β降低,中药高剂量组TLRs及其下游信号转导元件蛋白及mRNA含量均有不同程度下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:1)养阴活胃合剂可以通过调控TLR样受体及其下游转导元件基因及蛋白水平,降低因TLRs通路激活所释放的炎症因子对胃黏膜的损伤,从而达到治疗慢性萎缩性胃炎的目的.2)养阴活胃合剂可降低慢性萎缩性胃炎大鼠血清中炎症因子水平,而抑制炎性反应可能有助于慢性萎缩性胃炎病情的改善.
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肺炎克雷伯菌生物膜对小鼠腹腔巨噬细胞TLRs受体表达的影响
目的 研究肺炎克雷伯菌生物膜对小鼠腹腔巨噬细胞TLRs受体表达的影响,探索机体抗生物膜(biofilm,BF)感染免疫的特点.方法 将雄性昆明种小鼠40只随机分成2组,一组腹腔植入体外形成肺炎克雷伯菌生物膜的硅胶片,建立留置性医疗装置BF感染模型实验组,另一组植入与实验组同等量的浮游菌作为对照组.实时定量PCR分析2组巨噬细胞TLRs mRNA的表达水平,流式细胞仪检测分析蛋白的表达水平.结果 实验生物膜组巨噬细胞TLR3、TLR4 mRNA相对表达量是对照浮游菌组的0.23和0.24倍;实验组TLR2、TLR4蛋白表达率分别是(23.27±2.73)%和(15.83±2.04)%,明显低于对照组的(33.42±3.72)%、(21.75±1.25)%(P＜0.05).结论 与浮游菌相比,BF能下调小鼠腹腔巨噬细胞TLR2、TLR4表达,从而影响机体的免疫功能,这可能是BF相对浮游菌更容易逃脱机体免疫防御系统、引起慢性感染的机制之一.
