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芍药内酯苷对大鼠坐骨神经雪旺细胞的保护作用研究
目的:探讨糖痹康颗粒中主要成分芍药内酯苷对大鼠坐骨神经雪旺细胞(Schwann Cells,SCs)的影响作用.方法:本实验通过不同浓度的葡萄糖对大鼠坐骨神经雪旺细胞的影响的研究,建立了以150 mmol·L-1D-葡萄糖,培养时间为48 h的细胞氧化应激模型,通过设立芍药内酯苷高中低组(100 μM、20μM、4μM),模型组,维生素C组(100μM),正常组,利用流式细胞仪定量检测细胞内ROS含量和荧光显微镜定性观察细胞内ROS状态以及CCK-8检测细胞活性.结果:采用CCK-8法检测细胞增殖情况,48 h后,模型组与正常组有明显的差异P＜0.01;芍药内酯苷给药组与模型组相比,P＜0.01;芍药内酯苷可以促进雪旺细胞增殖.通过检测ROS荧光含量,发现芍药内酯苷100、20、4μM与模型组(Glu 150 mM)相比,各组P＜0.01,表明芍药内酯苷可以减轻雪旺细胞内ROS,缓解氧化应激状态.结论:芍药内酯苷可以通过增加雪旺细胞增殖,改善氧化应激状态对雪旺细胞产生保护作用.
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UPLC-ESI-MSn法测定糖痹康颗粒入血成分研究
目的:通过UPLC-ESI-MSn方法定性分析糖痹康颗粒(TBK)的入血成分,初步阐明糖痹康颗粒的药效物质基础.方法:采用UPLC-LTQ-Orbitrap高分辨液质联用仪,在电喷雾离子源的正、负离子模式下,对空白血清、糖痹康颗粒经大鼠给药后的含药血清进行检测.根据离子碎片信息,偶电子规律,氮规则等并结合相应参考文献,定性分析并鉴定入血成分.结果:糖痹康颗粒灌胃给药后,在大鼠血清中发现15个入血成分,其中13个是以原型成分被吸收,其余2个可能为代谢产物.结论:糖痹康入血成分是各组方药味配伍后共同作用的结果,在大鼠血清中,多数成分已经被大鼠代谢吸收,少数以原型成分吸收.本实验为糖痹康颗粒的药效物质基础和体内代谢研究提供参考.
关键词： 糖痹康颗粒 UPLC-ESI-MSn 入血成分 药效物质基础 -
糖痹康颗粒HPLC指纹图谱研究
目的 建立糖痹康颗粒HPLC指纹图谱,科学评价并有效控制其质量,确保其生产的稳定性.方法 采用德国默克RP-18 endcapped色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸水为流动相梯度洗脱,柱温40℃,流速1 mL/min,检测波长240 nm,进样量20μL.采用国家药典委员会《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版》对10批糖痹康颗粒制剂进行相似度评价,并对处方中的9味药进行相关性分析.结果 以汉黄芩苷为参照峰,初步建立糖痹康颗粒HPLC指纹图谱,10批糖痹康颗粒制剂的HPLC指纹图谱相似度在0.90以上,标示出25个共有色谱峰,其中18个归属到方中各药材.结论 该方法分离效果好、准确、简单,可为糖痹康颗粒质量评价提供参考.
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HPLC-DAD法同时测定糖痹康中6种主要活性成分
目的 研究糖痹康颗粒6种活性成分的含量同时测定的方法.方法 采用HPLC-DAD法测定糖痹康颗粒中6种活性成分的含量,C18色谱柱(150 mm,4.6 mm,5μm),0.1％甲酸与水-0.1％甲酸与乙腈(18％～60％)梯度洗脱;检测λ为多波长检测分别是:196、201、202、204、276、228 nm;用标准曲线法测定.结果 6种活性成分在5 ～ 600 μg/mL范围内线性关系良好,回归方程分别为:芍药苷:Y=227 988X+182,R2 =0.999 1;毛蕊异黄酮葡萄糖苷:Y =417 929 X-213,R2=0.999 7;特女贞苷:Y=199 569X-312,∥=0.998 3;迷迭香酸:Y=364 936X+152,R2 =0.998 1;黄芩苷:Y=64 131 X+ 362,R2=0.999 4;小檗碱:y=87 882X+ 111,R2 =0.999 5.6种活性成分的加样回收率分别为:芍药苷:101.44％(RSD =0.48％);毛蕊异黄酮葡萄糖苷:99.99％(RSD=0.43％);特女贞苷102.07％(RSD=0.57％);迷迭香酸:98.38％ (RSD=0.46％);黄芩苷:102.71％(RSD=0.485％);小檗碱:99.54％ (RSD =0.77％).结论 所建立含量测定方法简便、快捷、可靠,可用于糖痹康颗粒的质量控制.
