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118株单核细胞增生李斯特菌的毒力基因检测
目的 了解中国单核细胞增生李斯特菌(Lm)的毒力基因分布情况.方法 对Lm的6个毒力基因(hly、prfA、plcB、inlA、actA、iap)分别设计聚合酶链反应(PCR)引物,建立PCR检测方法.对hly、plcB、iap 3个基因的PCR方法进行了特异性试验.结果 对国内多个地区多种来源的118株Lm进行了PCR检测,结果表明除2株菌不含prfA基因外,其他菌株均包含6个毒力基因.PCR引物特异性试验结果表明hly、plcB、iap3个基因的PCR引物特异性良好,可用于Lm的鉴定.结论 Lm普遍具有毒力基因,具有潜在的爆发风险,应加强对其监测.
关键词： 单核细胞增生李斯特氏菌 毒力基因 PCR -
2001年中国食源性致病菌及其耐药性主动监测研究
目的旨在监测中国食源性致病菌及其耐药性.方法中国疾病预防控制中心营养与食品安全所建立的全国食品污染物监测网的食源性致病菌监测部分,2001年在全国11个省市设点采样并检测了七大类(生肉、熟肉、生奶、冰激淋、酸奶、水产品和蔬菜)共4034份样品.结果沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7和单核细胞增生李斯特氏菌,总阳性率5.50%.其中沙门氏菌3.32%,单核细胞增生李斯特氏菌1.29%,大肠杆菌O157:H7 0.82%.生肉的污染情况为严重,阳性率12.96%.共分离出沙门氏菌137株,德比沙门氏菌、阿贡纳沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、里定沙门氏菌、鸭沙门氏菌、明斯特沙门氏菌及鼠伤寒沙门氏菌7种血清型占80%.结论沙门氏菌的血清型分布和耐药性各个省不同.自生、熟肉中分离到O157:H7的强毒株.对分离的沙门氏菌、大肠杆菌检测了14种抗生素的耐药性,结果表明沙门氏菌和大肠杆菌中都有多重耐药株.
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PCR-焦磷酸测序检测单核细胞增生李斯特氏菌研究
目的 建立结合PCR-焦磷酸测序检测单核细胞增生李斯特氏菌的方法.方法 根据单核细胞增生李斯特氏菌的hly基因设计扩增引物和测序引物,特异地扩增目的片段,再制备单链模板,在测序引物引导下进行焦磷酸测序,通过测序结果与GenBank中的hly基因序列的比对进行鉴定.结果 扩增引物和测序引物表现出良好的特异性,16株单核细胞增生李斯特氏菌菌株均扩增出大小249 bp的DNA片段,焦磷酸测序结果与hly基因序列100％匹配,而阴性对照菌株均未扩增出DNA条带,焦磷酸测序结果为阴性.结论 建立的方法特异性高,是快速从DNA序列水平上检测单核细胞增生李斯特氏菌的有效手段.
关键词： PCR-焦磷酸测序 单核细胞增生李斯特氏菌 DNA碱基序列 hly基因 -
2017年惠州市惠阳区重点品种食品安全状况监测分析
目的 分析惠州市惠阳区重点品种食品中主要食源性致病微生物检出情况,为预防与控制食源性疾病提供基础数据.方法 选取2017年1～10月惠州市惠阳区9个地区为检测范围,按照随机采样原则和食源性致病菌监测样本采样要求采集十五类食品共135份样品,比较135份样品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌三种致病菌的检出率,比较不同类别食品中三种致病菌检出情况,与不同地区致病菌阳性样品检出率情况.结果 共检出阳性食源性致病菌11株,总体检出率为8.15％,其中沙门氏菌检出3株、金黄色葡萄球菌为2株、单核细胞增生李斯特氏菌为6株;所有采样食品中烤鸡小腿(3.70％)、鸭掌(2.22％)食源性致病菌检测率高;惠州市惠阳区各个地区均有食源性致病菌检出,其中检出率高的是永湖地区.结论 惠州市惠阳区各个地区各类重点品种食品存在不同程度的食源性致病菌污染,食品安全监管部门应就高污染风险食品加强食品安全监督管理.
关键词： 食源性致病菌 食品安全 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌 单核细胞增生李斯特氏菌 -
2012年张家港口岸进境冷冻猪肉制品中单核细胞增生李斯特氏菌污染调查
目的 了解进境冷冻猪肉制品单增李斯特菌污染状况,建立流行病学监测网,以便制定良好的预防控制措施,更有效地预防和控制由该菌引起的食源性疾病和疫情的发生.方法 mini VIDAS快速筛选、显色平板分离、API Listeria鉴定结合国标法进行单增李斯特菌检测.结果 2012年共检测冷冻猪肉制品171批,检出单增李斯特菌14株,阳性率为8.19％(14/171).结论 单增李斯特菌污染较为严重,应加强对冷藏生畜、肉类食品的卫生管理.
关键词： 冷冻猪肉 单核细胞增生李斯特氏菌 污染 调查 -
69株食源性致病菌单核细胞增生李斯特氏菌的分子血清分型、二元基因分型与多位点序列分型研究
目的 对多种分子分型方法在单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,Lm)分型中的应用进行分析和比较,确定适合于不同实验室的分型检测方法,并进一步掌握食源性Lm的病原特征.方法 采用分子血清分型、二元基因分型与多位点序列分型方法对分离自食品的69株Lm进行分型检测,并对结果进行分析.结果 69株Lm食品分离株中,1/2a型菌株有29株,1/2b型有19株,1/2c型有7株,4b型有14株.二元基因分型法将69株Lm食品分离株分为19个二元基因型(Binary type,BT型),DI值为91.60％;主要的BT型为BT146、BT254、BT222、BT82、BT159和BT190.多位点序列分型法将69株Lm食品分离株分为16个序列型(Sequencing type,ST型),DI值为89.98％;主要的ST型为ST8、ST87、ST2、ST1、ST3和ST9.结论 分子血清学方法和二元基因分型方法具有操作简便、检测结果易于分析、较快提供检测结果的优点,可作为实验室的一线技术用以对李斯特氏菌病暴发的发现和确认.
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PFGE分型方法在食源性单核细胞增生李斯特氏菌分型中的应用
目的 了解河北省食源性单核细胞增生李斯特氏菌(Lm)脉冲场凝胶电泳(Pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)基因分型分布特征,建立分子分型数据库,为Lm分子流行病学研究提供资料.方法 分别以Apa Ⅰ和Asc Ⅰ两种内切酶对食品中分离的57株Lm进行PFGE基因分型检测,并以BioNumerics Version 6.6软件绘制进化树.结果 57株食源性Lm经ApaⅠ和Asc Ⅰ双酶切后,可产生32个基因型别(PFGE types,PT),分辨率为0.9 516.优势型别为PT11、PT12、PT5和PT10型.结论 河北省食品中污染的Ln菌型分散,来源于不同的克隆株.
关键词： 单核细胞增生李斯特氏菌 脉冲场凝胶电泳 基因分型 -
广州市某灌肠食品厂单核细胞增生李斯特氏菌污染监测
目的 了解预包装熟肉制品生产加工过程中单核细胞增生李斯特氏菌的污染状况,确定熟肉制品生产过程各个环节中该菌的分布情况和可能污染源.方法 2015年6月和9月各采样一次,采样在工厂各个车间进行,对操作人员、生产环境以及原辅料、中间产品、成品进行采样.依据国标方法检测单核细胞增生李斯特氏菌.结果 在采集的119份样品中,单核细胞增生李斯特氏菌的检出率为21.85％,不同车间样品的检出率差异有统计学意义(x2=16.811,P＜0.05),而不同种类样品的检出率差异无统计学意义(x2=0.112,P＞0.05).结论 在灌肠食品的原辅料中单核细胞增生李斯特氏菌检出率高,生产过程中应注意消毒,防止发生食源性疾病.
关键词： 单核细胞增生李斯特氏菌 食品 食品安全 -
单核细胞增生李斯特氏菌多位点序列分型
目的 了解河北省食源性单核细胞增生李斯特氏菌(Lm)的基因序列型(ST)分布特征,为Lm分子流行病学研究提供资料.方法 参考www.pasteur.fr/mlst网站建立的用于Lm分子分型检测的多位点序列分型方法(MLST),对分离自河北省的69株食源性Lm进行分型检测及分析,采用Start2和BURST对检测结果进行分析,绘制SplitsTree进化树.结果 69株Lm可分为16个基因序列型,辛普森指数(DI)为89.98％,发现新型ST705;河北省的优势ST型为ST8、ST87、ST2、ST1、ST3和ST9.结论 河北省优势的ST型型别相对较多,各ST型分布较分散,遗传具有多样性.
关键词： 多位点序列分型 单核细胞增生李斯特氏菌 基因序列型 -
黑龙江省食品中单核细胞增生李斯特氏菌污染监测
目的 为掌握黑龙江省食品中单核细胞增生李斯特氏菌污染状况,构建食品中单核细胞增生李斯特氏菌污染数据库.方法 在黑龙江省选取6个具有代表性城市建立监测哨点,定期对6类食品进行采样,检验采用增菌液(LB1、LB2)增菌后,用科玛嘉显色培养基分离,再做相应的生化及API Listeria快速反应板鉴定.结果 加检测6类760份食品样品,检出单核细胞增生李斯特氏菌(L.m)43株,检出率为5.66%.结论 黑龙江省食品均不同程度受到L.m的污染,尤以生畜禽肉、非定型包装熟肉污染严重,淡水产品次之,生食蔬菜少见.
关键词： 单核细胞增生李斯特氏菌 食品 污染 监测 -
食品中单核细胞增生李斯特氏菌快速检测方法研究
[目的]建立一种快速准确检验食品中单核细胞增生李斯特氏菌的方法. [方法]以miniVIDAS仪结合API系统,将该法与传统方法进行比较. [结果]该方法能检出＜10个/mL模拟样品中的单核细胞增生李斯特氏菌,与食品中常见的细菌无交叉反应,能对非单核细胞增生李斯特氏菌作出正确鉴定.在4天内能作完全鉴定结果.对226份实样的检测,检出率为11.5%. [结论]以miniVIDAS仪结合API系统建立的方法具有特异性好、灵敏度高、快速简便的特点,是一种较好的检测单核细胞增生李斯特氏菌的方法.
关键词： 单核细胞增生李斯特氏菌 检测 方法 -
防治食品李斯特菌污染的方法及措施
单核细胞增生性李斯特菌(Lister monocytogenes,LM)是国际上较为关注的一种食源性致病菌.本文主要阐述防治食品李斯特菌污染的方法及措施.
关键词： 食品卫生 单核细胞增生李斯特氏菌 污染 -
黄芩苷对单核细胞增生李斯特氏菌的体外抑菌作用研究
目的：研究黄芩苷对单核细胞增生李斯特氏菌的体外抑菌作用。方法采用倍比稀释法研究黄芩苷对单核细胞增生李斯特氏菌的体外抑菌作用；用管碟法研究黄芩苷浓度对抑菌效果的影响；涂布平板法研究黄芩苷对单核细胞增生李斯特氏菌体外抑制率。结果黄芩苷对单核细胞增生李斯特氏菌低抑菌浓度为0．0625 g·L －1，浓度为0．5 g·L －1时的抑菌率为（57．0±4．6）％。结论黄芩苷对单核细胞增生李斯特氏菌在体外有明显的抑制作用，其抑菌效果在一定范围内随浓度增加而增强。
关键词： 黄芩苷 单核细胞增生李斯特氏菌 最低抑菌浓度 抑菌率 -
基于全自动毛细管电泳技术建立的单核细胞增生李斯特氏菌MLVA分型方法
目的 建立针对食品来源的单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,Lm)分离株的多位点串联重复序列分型(Multiple-Locus Variable number tandem repeat Analysis,MLVA)方法,为暴发确认和溯源检测提供实验室支持.方法 对2005-2014年间分离自食品的91株Lm进行14个可变数目串联重复序列(Variable Number of Tandem Repeats,VNTR)位点的检测,评估优检测位点组合并分析检测结果.结果 通过采用软件分析,由LMV1、LMV2、LMV7、Lm10、Lm11、Lm23、LM-TR6、TR3和Lm15等9个VNTR位点组成的位点组合为优MLVA检测位点,可以将91株Lm分离株分为70个型别,分型能力达到0.987 1.结论 本研究建立的基于全自动毛细管电泳的由9个检测位点组成的Lm的MLVA分型方法,具有操作简便、快速、结果客观、操作标准化、易于在不同实验室间比较的优势,可作为一线检测方法用于李斯特菌病的暴发确认和溯源检测.
关键词： 单核细胞增生李斯特氏菌 多位点串联重复序列分型 毛细管电泳 -
用PCR检测六类食品中单核细胞增生李斯特氏菌
目的调查福建省食品中李斯特氏菌的污染状况.方法用GB4789.30-94单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes简称Lm)的检验方法分离菌株,用PCR检测李斯特氏菌的两种致病因子.结果从福建采集265份样品中分离出17株李斯特氏菌,其中,2株Lm含有李氏溶血素O(Listerialysin O,Hly)和内化素基因(Internalin.Inl),15株英诺克李斯特氏菌(Listeria.innocua)中8株含有内化素基因,7株两种基因均为阴性.结论从生鸡肉和生牛肉检出2株Lm,表明我省存在李斯特氏菌病的可能性,有必要进行深入研究.
关键词： 食品 单核细胞增生李斯特氏菌 聚合酶链反应 -
2003～2007年山东省集贸市场食品李斯特氏菌污染状况调查
[目的]了解山东省市售食品单核细胞增生李斯特氏菌污染状况.[方法]2003～2007年夏秋季,在山东省部分地区集贸市场、超市采样检测.[结果]2003～2007年.合计检测各种食品1502份,检出单增李斯特氏菌133份,检出率为8.85%.单增李斯特氏菌检出率.生鸡肉为9.54%.生羊肉为3.35%,生牛肉为14.47%,生猪肉为24,85%,散装熟肉为6.84%,生食蔬菜为1.34%(P<0.01);2003年为5.13%,2004年为3.63%,2005年为19-22%,2006年为3.52%,2007年为12.86%(P<0.01);济南市为9.34%,烟台市为3.77%.菏泽市为11.01%.莱芜市为7.51%.德州市为11 20%.潍坊市为4.61%(P>0.05).小鼠毒力试验显示检出的菌株均具有较强的致病性.[结论]山东省部分地区集贸市场食品摊点销售的食品李斯特氏菌污染较为严重.
关键词： 食品 单核细胞增生李斯特氏菌 污染 -
环境因子对单核细胞增生李斯特氏菌生长的影响
目的研究不同的pH值和水活度对单核细胞增生李斯特氏菌的生长的影响.方法将单核细胞增生李斯特氏菌株(Listeria Monoytogenes,LM)加人TSB-YE增菌液中,20℃培养,加入NaOH、乙酸、NaCl调节TSB-YE增菌液,使其pH值分别为9.0,5.6,水活度(αw)为0.950.结果单核细胞增生李斯特氏菌能迅速战胜碱性压力,但其对酸性压力和低αw压力敏感,在酸性或实验条件下,单核细胞增生李斯特氏菌生长过程中延滞时间和代时与标准条件相比明显延长.结论低pH值和低αw明显抑制单核细胞增生李斯特氏菌的生长.
关键词： 单核细胞增生李斯特氏菌 延滞时间 代时 pH值 水活度 -
全自动微生物磁珠分选系统检测单核细胞增生李斯特菌效果研究
目的:研究全自动微生物磁珠分选系统对食品中单增李斯特氏菌的检测效果.方法:取400份自然样品,用磁珠分选系统和国标法对样品进行对比检测.结果:全自动微生物磁珠分选系统相较国标法对自然样品中单核细胞增生李斯特氏菌阳性检出率有一定程度提高.结论:全自动微生物磁珠分选系统简单易用,标准化程度高,可以和国标检测方法相结合以提高单增李斯特氏菌的检出率.
关键词： 全自动微生物磁珠分选系统 单核细胞增生李斯特氏菌 -
恩施市豆制品单核细胞增生李斯特氏菌污染状况调查
目的 了解恩施市市售豆制品单核细胞增生李斯特氏菌污染状况,为该市的食源性疾病和食物中毒监测提供科学依据.方法 全年二次分别对恩施市4大农贸市场和4家大型连锁超市出售的豆制品进行随机抽样,共采集样品62份,用国家标准方法进行检测.结果 从62份豆制品中检出单核细胞增生李斯特氏菌5株,总的检出率为8.1％.结论 恩施市市售豆制品受到不同程度的单核细胞增生李斯特氏菌污染,地方主管机构应加强豆制品生产加工、运输等环节的安全监督监测力度.
关键词： 豆制品 单核细胞增生李斯特氏菌 恩施 -
深圳市东门菜肉市场单核细胞增生李斯特氏菌污染状况分析
目的通过对深圳市东门菜肉市场单核细胞增生李斯特氏菌污染状况的调查,加大对冷藏食品中威胁人类健康单核细胞增生李斯特氏菌的重视.方法根据中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验总则单核细胞增生李斯特氏菌检验(GB4789.30-2003)、荧光PCR法.结果对所采的50份样品用国标方法和荧光PCR法均检出3株单核细胞增生李斯特氏菌.结论深圳市东门菜肉市场存在着单核细胞增生李斯特氏菌污染,本次调查的污染率为6%,建议管理部门和卫生部门加大卫生监督力度,预防单核细胞增生李斯特氏菌食物中毒的发生.
关键词： 单核细胞增生李斯特氏菌 荧光PCR 调查
