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乙醇消毒液污染解淀粉芽孢杆菌的检测报告
为了解临床使用的乙醇消毒液污染解淀粉芽孢杆菌情况,采用细菌检验方法进行了培养观察.结果,在临床使用的含体积分数75%乙醇消毒液中培养出同一种细菌,细菌总数＞800 cfu/ml;经鉴定为解淀粉芽孢杆菌.该细菌耐煮沸5 min,在95%乙醇中生长良好,对含有效氯1000 mg/L的84消毒液和臭氧等消毒剂不敏感;经常规紫外线照射30 min和压力蒸汽灭菌处理对该细菌有较好的杀灭作用.结论,乙醇消毒液中污染解淀粉芽胞杆菌,该菌对乙醇和84消毒液等具有低抗性.
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解淀粉芽孢杆菌致BALB/c小鼠肺炎及其IL-8、IL-33、 TNF-α、NF-κB p65表达的研究
目的 建立解淀粉芽孢杆菌导致BALB/c小鼠肺炎模型,观察IL-8、IL-33、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、核因子κB(NF-κB) p65的表达水平.方法 24只无特定病原体级雌性BALB/c小鼠随机分为空白对照组、实验组和免疫抑制组,每组分为3小组,每小组8只.实验组、免疫抑制组接种同浓度解淀粉芽孢杆菌菌悬液,空白对照组接种50 μl0.9％氯化钠.接种后第7天分批处死动物,观察其BALF中IL-8、IL-33、TNF-α表达,以及BALF和肺组织中NF-κB p65表达水平.结果 实验组IL-8水平与空白对照组比较,差异有统计学意义(t=4.53,P＜0.01);实验组IL-33水平与空白对照组比较,差异有统计学意义(t=2.99,P＜0.01);实验组TNF-α水平与空白对照组比较,差异有统计学意义(t=8.56,P＜0.01).免疫抑制组IL-8水平与空白对照组比较,差异有统计学意义(t=8.22,P＜0.01);免疫抑制组IL-33水平与空白对照组比较,差异有统计学意义(t=5.53,P＜0.01);免疫抑制组TNF-α水平与空白对照组比较,差异有统计学意义(t=7.21,P＜0.01).免疫抑制组IL-8水平与实验组比较,差异有统计学意义(t=4.53,P＜0.01);免疫抑制组IL-33水平与实验组比较,差异有统计学意义(t=2.89,P＜0.01);免疫抑制组TNF-α水平与实验组比较,差异有统计学意义(t =4.99,P＜0.01).免疫组织化学NF-κB p65水平:免疫抑制组NF-κB p65水平与空白对照组比较,差异有统计学意义(t=5.369,P＜0.05);实验组NF-κB p65水平与空白对照组比较,差异有统计学意义(t=3.507,P＜0.05);免疫抑制组NF-κB p65水平与实验组比较,差异有统计学意义(t=2.566,P＜0.05).Western blotting NF-κB p65水平:实验组NF-κB p65水平与空白对照组比较,差异有统计学意义(t=6.039,P＜0.01);免疫抑制组与空白对照组比较,差异有统计学意义(t =9.951,P＜0.01);免疫抑制组与实验组比较,差异有统计学意义(t=6.423,P＜0.01).结论 IL-8、IL-33、TNF-α、NF-κB p65参与了解淀粉芽孢杆菌致BALB/c小鼠肺炎的发生与发展.
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纤溶酶产生菌的鉴定及产酶优化
目的 对纤溶酶产生菌——LZ-01菌株进行种属鉴定并优化其产酶能力.方法 对LZ-01菌株的形态特征进行观察,并进行生理生化试验和phoR基因的序列相似性分析以确定菌株种属,通过单因素试验考察碳源、氮源等对菌株发酵产酶活力的影响,采用正交实验确定菌株佳产酶工艺条件.结果 经鉴定,LZ-01菌株与解淀粉芽孢杆菌标准菌株FZ42的相似度达99.78%,鉴定LZ-01菌株为解淀粉芽孢杆菌.经工艺优化后的酶活力是未经优化酶活力的3.63倍.结论 本研究为进一步开发纤溶酶制剂溶栓药物提供了一定的理论依据.
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解淀粉芽孢杆菌对婴幼儿潜在致病性的研究
解淀粉芽孢杆菌属革兰阳性芽孢杆菌,可污染医院75%酒精消毒液、潮湿损害的房屋、食品,造成新乍儿、婴幼儿等免疫力低下的特殊人群感染和房屋污染健康综合征.文章从细菌对环境、食品的污染、院内感染三个方面来阐述其流行状况,从细胞毒素埘哺乳动物细胞的毒性来描述其毒理作用,从细菌的芽孢结构特点来证明其特殊的理、化特性,从国外同类菌属的疾病动物模型来进一步探讨其敛病性,以期引起临床上的重视.
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莲藕中白桦脂酸的微生物转化及其产物的抗肿瘤活性研究
目的 对莲藕中的白桦脂酸进行微生物转化,并对转化产物分离纯化,解析其结构特征,评价其抗肿瘤活性,以提高莲藕资源的利用率.方法 采用HPLC-PDA法测定莲藕根茎不同部位白桦脂酸的含量;筛选具有转化作用的菌种,采用UPLC-Q-T O F/MS方法对发酵产物进行分析;采用硅胶柱层析法分离转化产物,N MR和MS法解析发酵产物结构特征;利用细胞分子生物学技术测定衍生物抗肿瘤活性.结果 莲藕不同部位(藕尖、藕肉、藕皮、藕节、藕尾)中白桦脂酸含量以藕节中高,为0.621%,筛选得到一株具有转化白桦脂酸的菌种Bacillus amyloliquefaciens FJ18,该菌转化藕节中的白桦脂酸(1),获得2个转化产物,分别为3β-hydroxy-lup-20(29)-en-28-oic acid 28-O-(4-oxy-4-oxobutanoic acid-4-O-β-D-glucopyranosyl)ester(2)和28-O-β-D-glucopyranosyl-3β-hydroxy-lup-20(29)-en-28-oate(3),其中化合物2为新化合物.体外细胞毒性实验表明转化产物对A375、Hela、U251、SH-SY5Y和MCF-7等肿瘤细胞均有一定的细胞毒活性.结论 通过微生物发酵从藕节中获得具有抗肿瘤活性的白桦脂酸转化产物,其中一个为新化合物.
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白细胞介素-4、干扰素-γ及核因子-κB p65在解淀粉芽孢杆菌致BALB/c小鼠哮喘模型中的表达
目的 探讨白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)与核因子-κB (NF-κB) p65在解淀粉芽孢杆菌致BALB/c小鼠哮喘模型中的表达及意义.方法 15只无特定病原体级BALB/c小鼠随机分为对照组、卵蛋白(OVA)组、解淀粉芽孢杆菌组(细菌组),每组5只.对照组小鼠以生理盐水致每/激发;OVA组小鼠以0.2g·L-1 OVA混合液致敏,并以25.0 g·L-1 OVA激发;细菌组小鼠以1013cfu·L-1解淀粉芽孢杆菌致敏/激发.酶联免疫吸附试验测定各组小鼠血清IL-4、IFN-γ水平;免疫组织化学法检测小鼠肺组织中NF-κB p65表达.结果 OVA组和细菌组小鼠肺组织中NF-κB p65表达显著高于对照组(P＜0.01),细菌组和OVA组小鼠肺组织中NF-κB p65表达比较差异无统计学意义(P＞0.05).3组小鼠血清IL-4、IFN-γ水平及IL-4/IFN-γ比较差异有统计学意义(F=90.59、435.09、117.37,P＜0.01);OVA组和细菌组小鼠血清IFN-γ水平显著低于对照组(P＜0.01),IL-4水平和IL-4/IFN-γ显著高于对照组(P＜0.01);细菌组与OVA组小鼠血清IL-4、IFN-γ水平及IL-4/IFN-γ比较差异均无统计学意义(P＞0.05).直线相关分析显示,OVA组小鼠血清IL-4水平与IFN-γ水平呈负相关(r=-0.87,P＜0.01);肺组织中NF-κB p65蛋白表达与血清IL-4水平呈正相关(r=0.91,P＜0.01),与血清IFN-γ水平呈负相关(r=-0.93,P＜0.01).细菌组小鼠血清IL-4水平与IFN-γ水平呈负相关(r=-0.92,P＜0.01);肺组织中NF-κB p65蛋白表达与血清IL-4水平呈正相关(r=0.97,P＜0.01),与血清IFN-γ水平呈负相关(r=-0.81,P＜0.01).结论 IL-4、IFN-γ在哮喘发病中起作用,而NF-κB p65表达变化可影响IL-4、IFN-γ水平,NF-κB p65在哮喘炎症调控中发挥重要作用.
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一株产脂肽类抗生素bacillopeptin A深海芽孢杆菌的筛选与鉴定
目的 筛选从中国南海深海3601m的海泥样品中分离得到的细菌,获得一株芽孢杆菌SH-B74,分离其产生抗植物病原真菌脂肽类化合物,并进行菌种鉴定.方法 使用酸沉淀、快速柱色谱、SPE和半制备反高效液相色谱技术分离发酵液中的脂肽类纯化合物,采用形态、生理生化特性和16S rDNA基因序列分析相结合方法鉴定菌株.结果 分离纯化得到一种拮抗植物病原真菌的脂肽类纯化合物bacillopeptin A,分子量为1020.6Da;菌株经鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens).结论 该菌株对玉米纹枯病等多种植物病原真菌具有拮抗作用,代谢产物bacillopeptin A对苹果干腐病菌具有良好的拮抗效果.显示了该菌及其代谢产物在植物病原真菌的生物防治和土壤生物修复方面具有潜在研发价值.
关键词： 解淀粉芽孢杆菌 深海海泥 脂肽 bacillopeptinA -
解淀粉芽孢杆菌致BALB/c小鼠哮喘模型的建立
目的:探讨解淀粉芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌培养液(代表细菌产物)是否导致BALB/c小鼠哮喘.方法:40只SPF级雌性BALB/c小鼠随机分为4组(每组10只),即对照组、卵清蛋白(OVA)组、培养液组、细菌组.于第0天、第7天用OVA小鼠腹腔注射致敏,从第14天到第28天用OVA液对小鼠进行雾化吸入激发,1次/d,每次30 min；对照组、培养液组、细菌组分别用生理盐水、细菌培养液、细菌进行致敏和激发试验.结果:实验表明OVA组和细菌组两组的活体肺功能(APTI)值均高于对照组；与对照组相比较,OVA组、细菌组两组的管壁厚度、肺泡灌洗液中白细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比均有显著升高(P＜0.01),而淋巴细胞百分比均显著降低,尤其是细菌组更加突出；与对照组比较,OVA组和细菌组的血清中IgE浓度均为显著升高(P＜0.01).结论:用解淀粉芽孢杆菌建立了BALB/c小鼠哮喘动物模型,并证明导致小鼠哮喘的主要因子是细菌.
