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北京市集贸市场生鲜猪肉肠球菌种水平鉴定及耐药特征
目的 评价和比较不同肠球菌种水平鉴定方法的准确性,了解北京市集贸市场生鲜猪肉肠球菌的种水平分布及耐药特征.方法 利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和VITEK 2 COMPACT两种方法对北京市集贸市场生鲜猪肉肠球菌开展种水平鉴定,两种方法鉴定结果不一致的菌株使用API 20 Strep、16S rRNA和23S rRNA序列分析再次鉴定.比较不同种肠球菌对10种临床常用抗生素的药物敏感性.结果 在5种肠球菌种水平鉴定方法中,16S rRNA序列分析和终结果的符合率高,为100.0％;VITEK 2 COMPACT符合率低,仅为4.0％ (1/25).在86株肠球菌中,粪肠球菌占82.6％ (71/86),其次为希拉肠球菌占14.0％ (12/86).粪肠球菌对环丙沙星(CIP)的耐药率高于希拉肠球菌,差异有统计学意义(x2=10.751,P＜0.01);对四环素(TET)、高浓度链霉素(HLSR)和高浓度庆大霉素(HLGR)的耐药率均高于希拉肠球菌,但差异无统计学意义(TET:x2=3.865,P＞0.05;HLSR:x2=1.608,P＞0.05;HLGR:x2=0.553,P＞0.05),但对红霉素(ERY)和氟霉素(CHL)的耐药率明显低于希拉肠球菌,差异有统计学意义(ERY:x2=20.244,P＜0.01;CHL:x2=14.139,P＜0.01).结论 16S rRNA和MALDI-TOF-MS序列分析技术在肠球菌种水平快速鉴定上有较高准确性,不同种属肠球菌呈现不同耐药特征,本研究为有效监测食源性耐药肠球菌的传播和流行提供了科学数据.
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双重PCR检测生鲜猪肉中大肠杆菌O157∶H7和沙门菌方法的建立与应用
目的 建立生鲜猪肉中大肠杆菌和沙门菌的双重PCR检测方法,并初步调查生鲜猪肉中大肠杆菌和沙门菌的污染情况.方法 以大肠杆菌0157∶H7 rfbE基因和沙门菌invA基因为靶基因设计引物.通过对单个基因PCR和多重基因PCR扩增进行特异性、敏感性试验以及优化反应体系,建立快速检测大肠杆菌和沙门菌的双重PCR法.在郑州市不同地区的综合性超市、冷鲜肉专卖店和农贸市场随机抽检144份生鲜猪肉样品,分别进行了PCR检测和常规微生物学检验.结果 建立的双重PCR方法特异性好,抗干扰能力强,灵敏度可达到10 pg/μl.在144份样品中检测出大肠杆菌的样品数为10份,检出率为6.94％;检出沙门菌的样品数为13份,检出率为9.03％;大肠杆菌和沙门菌同时检出的有2份,占总样品的1.39％.结论 初步建立了同步、简便、快速、灵敏地检测生鲜猪肉中大肠杆菌、沙门菌的双重PCR方法;生鲜猪肉中存在致病菌的污染问题,将威胁到食品安全和人体健康,不容忽视.
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北京市集贸市场生鲜猪肉肠球菌的耐药特征分析
目的 了解北京市某大型集贸市场内部环境样品和零售生鲜猪肉中分离肠球菌的耐药性特征.方法 采用肉汤稀释法测定86株肠球菌对10种临床常用抗生素的药物敏感性.结果 86株肠球菌对四环素、红霉素、高浓度链霉素、环丙沙星、高浓度庆大霉素和氯霉素的耐药率分别为67.44％(58/86)、54.65％(47/86)、38.37％(33/86)、26.74％(23/86)、23.26％ (20/86)和20.93％(18/86),耐3种以上抗生素的多重耐药肠球菌有30株,占34.88％,耐药谱共有22种.所有肠球菌对氨苄西林、青霉素和万古霉素均敏感.耐药谱型分析发现,不同样品来源肠球菌的耐药谱差异较大.另外,本研究从国内食品中分离到对达托霉素耐药的肠球菌,此前我国未见相关报道.结论 北京市集贸市场内部环境和零售生鲜猪肉中分离的肠球菌耐药严重,并呈现一定的耐药谱型差异,而且分离到达托霉素耐药株,应引起关注.
