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孕早期绒毛膜细胞原位培养和染色体制备方法的初步研究
目的:摸索建立一种快速简便的孕早期绒毛膜细胞原位培养和染色体制备方法.方法:对55例孕早期绒毛膜细胞酶消化解离后,进行原位培养和原位染色体制备.结果:建立了一种快速简便的孕早期绒毛膜原位培养和染色体制备方法,在55例孕早期绒毛膜细胞中,除3例因污染培养失败外,其余均获得成功,成功率达94.54%.结论:该方法成功率高、操作简便、培养时间短、细胞损耗小、染色体形态质量好,可供分析的染色体核型多,对异常胎儿能及早终止妊娠.
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常见染色体病的快速产前诊断方法
1前言染色体不分离和结构不平衡在新生儿中的发生率为1/200[1],成为发育缺陷和先天畸形的主要原因.因此,细胞遗传学分析一直被认为是很重要的有创性产前诊断方法.从1966年首次应用孕中期羊水脱落细胞培养或孕早期绒毛采样进行产前检测,到19世纪70年代常规应用染色体显带分析(核型分析)以来,此方法已经成为经典的产前诊断技术[2].核型分析作为一种可靠的方法,可以诊断染色体数目异常及500万至1000万对碱基对的结构重排.羊水细胞核型分析的准确率为99.4％～99.8％,绒毛膜细胞核型分析的准确率为97.5％～99.6％[3].
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孕早期绒毛膜细胞原位培养法用于地中海贫血的产前诊断
目的 探讨孕早期绒毛膜细胞原位培养及在地中海贫血(简称地贫)产前诊断中的应用价值,评价其在产前诊断中的可行性.方法 用COOK公司的绒毛活检吸管,经宫颈吸取绒毛膜细胞(chorionic villus samplings,CVS)标本,分两组:1组直接行地贫基因诊断,另1组进行绒毛膜细胞原位培养,收获细胞后行地贫基因诊断.结果 取材手术69例,64例取材成功,63例绒毛膜细胞原位培养成功,1例培养失败,培养成功率为98.44%.64例中有6例绒毛取材量极少,无法直接提取DNA行地贫基因诊断,经培养后完成基因诊断.产前诊断结果:63例中29例正常儿,异常34例,其中:Bart's胎儿2例,HbH胎儿1例,α地贫基因携带者12例,HbCS胎儿2例,β地贫纯合子3例,β重型地贫6例,β地贫基因携带者5例,α+β复合地贫纯合子1例,α+β复合地贫杂合子2例.结论孕早期绒毛膜细胞原位培养方法简单易行,技术稳定,需标本量少,安全,结果可靠.可应用于地贫的产前诊断.
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人胎盘羊膜及绒毛膜细胞在新生SD大鼠体内增殖的研究
目的 观察人胎盘干细胞在新生SD大鼠体内的增殖情况.方法 取5份人胎盘的羊膜、绒毛膜组织,经清洗去血、剪碎、胰蛋白酶消化、淋巴细胞分离液分离制备单个核细胞.SD大鼠出生后第2天,经腹腔注射植入4×106个新鲜制备的细胞.分别于注射后第15、30、45天处死大鼠,取骨髓、脾脏、胸腺组织,用聚合酶链反应(PCR)法检测人特异的Alu基因.结果 大鼠骨髓、胸腺在移植后15 d未检测到人Alu基因的表达,30、45 d均有表达;肝脏中直到45 d时才有Alu基因的表达.结论 人胎盘羊膜、绒毛膜细胞可在新生SD大鼠体内增殖.
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改良绒毛细胞原位培养染色体制备的临床应用
目的 探讨改良绒毛细胞原位培养和染色体制备的应用价值.方法 对20份绒毛组织标本经酶消化解离后,进行原位培养、染色体制备及核型分析.结果 20例绒毛标本,培养成功率为100%,检出异常核型8例.结论 该方法成功率高、操作简便、培养时间短、细胞损耗小,可供分析的染色体核型多,染色体形态质量好.
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早期自然流产绒毛细胞染色体制备方法的改良及其临床应用
目的 改良早期自然流产胚胎绒毛膜细胞染色体的制备方法,并探讨其核型分析在自然流产病因诊断及下次妊娠指导中的临床作用.方法 于清宫手术时,无菌采集39例早期自然流产胚胎的绒毛；改进消化、低渗、固定等原位法制备绒毛细胞染色体的关键步骤；G显带法进行核型分析.结果 39例流产绒毛标本中,培养成功38例(97.4％),其中检出异常核型26例(68.4％),与正常核型比较,差异有统计学显著性意义(P＜0.01).26例异常染色体核型分布及其构成结果显示,核型异常以数目异常为主,与结构异常组比较,差异具有统计学显著性意义(P＜0.01).结论 胚胎染色体异常是早期自然流产常见的原因,主要表现为数目异常.改良的绒毛细胞培养法和原位制备法具有成功率高、操作简便、耗时短及有利于准确进行核型分析的优点；对流产原因的查明,以及合理指导下次妊娠具有重要的临床意义.
