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人外周血淋巴细胞染色体制备中的影响因素分析
目的 分析人外周血淋巴细胞染色体制备中的影响因素,做好质量控制,掌握染色体制备技术,及时准确反映辐射损伤情况,为诊断与治疗提供依据.方法 采用微量全血培养法制备标本,以RPMI1640全培养基进行体外淋巴细胞培养,对采血后细胞培养时间、秋水仙素浓度、滴片等影响因素进行分析.结果 1 089例放射工作人员外周血淋巴细胞染色体标本中,1次培养成功1 077例,出现问题后采取补救措施补救成功12例,成功率100％.结论 影响人外周血淋巴细胞染色体制备的因素很多,总结一套适合本实验室的制备方法,确保外周血染色体制备成功.
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孕早期绒毛膜细胞原位培养和染色体制备方法的初步研究
目的:摸索建立一种快速简便的孕早期绒毛膜细胞原位培养和染色体制备方法.方法:对55例孕早期绒毛膜细胞酶消化解离后,进行原位培养和原位染色体制备.结果:建立了一种快速简便的孕早期绒毛膜原位培养和染色体制备方法,在55例孕早期绒毛膜细胞中,除3例因污染培养失败外,其余均获得成功,成功率达94.54%.结论:该方法成功率高、操作简便、培养时间短、细胞损耗小、染色体形态质量好,可供分析的染色体核型多,对异常胎儿能及早终止妊娠.
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空间诱变肿瘤细胞和生物工程细胞的染色体实验观察
目的:摸索空间环境诱变后肿瘤细胞和生物工程细胞的染色体制备方法,分析染色体数目、结构的异常变化.方法:将肿瘤细胞和生物工程细胞无源搭载于第18颗返回式卫星和第20颗返回式卫星舱内,分别经18天空间飞行,回收后制作染色体标本,并对其结果进行染色体核型分析.结果:经太空诱变后的生物工程细胞染色体畸变率为:环状占10.5%,无着丝断片占36.75%,三射、四射体占13%.经太空诱变后的肿瘤细胞染色体畸变率为:非整倍体占68%,多倍体占32%.结论:①建立了一套本实验室太空诱变后肿瘤细胞和生物工程细胞的染色体制备方法.②发现空间诱变后的肿瘤细胞无明显染色体异常.生物工程细胞CHO(dhfr-)染色体畸变率增加.
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染色体制备及核型分析室内质控及其考评标准的探讨
近年来,染色体核型分析已作为惟一的染色体病确诊实验项目而广泛应用于临床及产前细胞遗传学诊断.作为临床实验项目,均应有规范的实验室质量控制方法[1-5].室内质控是实验室质量控制的关键环节,是开展和做好室间质评的前提和保障.但该项目的室内质量控制方法至今尚未见国内外文献报道.本文参考相关文献[5-8],结合国内外有关染色体分析室间质评的文献报道[9-13],对该项目的室内质控方法提出探讨,以提高染色体制备及核型分析的质量.
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微型台式真空泵在外周血染色体制备中的应用
微型台式真空泵是一种专门为生命科学、医学、微生物、免疫等实验而设计制造的小型仪器。外周血淋巴细胞染色体制备过程繁琐，操作时间长，需要大量的手工操作。真空泵在我们实验室染色体制备过程中得到了有效应用，减轻了实验人员的体力消耗，提高了工作质量，大大提高了工作效率！但实际工作中仍有一些注意事项影响真空泵的使用寿命，并严重影响实验质量！本文主要从真空泵的使用和外周血染色体制备过程加以分析，帮助大家正确合理使用真空泵。
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t(1；21)伴不孕一例
患者女，30岁，因婚后8年不孕就诊。查体：身高171 cm，体重61 kg，表型、智力正常，妇科检查正常。实验室检查：肝功能、肾功能、电解质正常。甲状腺功能正常。血清内分泌激素：促卵泡生成激素(FSH)：12.6 mIU/ml(正常值：1.4～116.3 mIU/ml)，促黄体生成素(LH)：40.6 mIU/ml(正常值：0.7～76.3 mIU/ml)，孕酮(progesterone)：32.4 nmol/L(正常值：7.5～98.3 nmol/L)，雌二醇(E2)：102.1 pg/ml(正常值：19～528 pg/ml)，睾酮(testosterone)：12.4 ng/dl(正常值：14～827 ng/dl)。细胞遗传学检查：取外周血常规培养，染色体制备，G显带分析，患者核型为：46，XX，t(1；21)(p34；q22)46，XX，t(1；21)(1qter→1P34∷21q22→21pter；21qter→21q22∷1p34→1qter)。患者系第2胎足月顺产，其母生育2胎，第一胎为男性，已正常生育。其父母、兄长表型均正常，父母非近亲婚配，家族史无特殊。其丈夫、父母、兄长核型均正常。
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一种改良的骨髓染色体制备与G显带方法
目前制备骨髓染色体方法主要有直接法、短期培养法和同步化法.同步化法操作技术要求高、分裂指数低,不易推广[1].随着间期荧光原位杂交技术及比较基因组杂交技术应用于白血病的研究,拓展了染色体分析的范围,提高了识别异常的能力,但因荧光试剂和检测设备昂贵,尚难广泛应用于临床.我们介绍一种改良的骨髓染色体制备与G显带方法.我们应用该方法对150例恶性血液病患者进行骨髓染色体检查,获得了满意效果.现将具体方法介绍如下.
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羊水细胞培养及染色体制备的经验交流
目的：交流羊水细胞培养及染色体制备的经验，提高羊水细胞培养及染色体制备的成功率。方法：对595例羊水标本进行细胞培养和染色体制备，原瓶传代、悬液保存以备重新滴片。结果：595例羊水细胞培养全部成功。结论：优化实验细节，建立统一实验操作标准，能够有效提高培养成功率。
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不同代次人脐带间充质干细胞的生物学特性及分化
背景:人脐带间充质干细胞作为组织工程及再生医学领域的新兴种子细胞,其应用价值有赖于能否在长期体外传代扩增后仍保持稳定生物学特性和多向分化能力,需要进一步的实验研究.目的:研究不同培养代次人脐带间充质干细胞重要生物学属性的差异.方法:采用组织块法分离培养人脐带间充质干细胞,分别采用细胞计数法与MTT法检测第3-6代细胞增殖活性;流式细胞仪检测第1-9代细胞表面标志物;细胞染色法分析第3-6代细胞核型.取第3代人脐带间充质干细胞,检测其分化为神经细胞、成骨细胞及肝样细胞的能力.结果与结论:①细胞计数法与MTT方法检测结果一致,第3-6代脐带间充质干细胞的增殖曲线均呈"S"型,在一二天时处于缓慢增长期,2-4 d时处于对数增长期,四五天时处于平台期,五六天时处于衰退期;②第1-9代脐带间充质干细胞表面高表达CD90、CD44、CD73,不或低表达CD11b、CD18、CD34、CD43及HLA-DR;③第3-6代脐带间充质干细胞核型均为正常人体核型;④脐带间充质干细胞可分化为神经细胞、成骨细胞及肝样细胞;⑤结果表明,人脐带间充质干细胞具有高度增殖活性和多向分化特性.
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改良羊水细胞原位培养及染色体制备方法的研究
目的:探索建立一种操作简便、快速、稳定、成功率高,易于推广的羊水细胞原位培养染色体制备方法.方法:选择近四年在本院进行产前诊断的1109例孕妇的羊水,采用改良羊水原位细胞培养染色体制备技术进行产前诊断.结果:缩短培养时间(7～9天收获)及染色体制片时间,细胞丢失少,分裂相多,培养成功率为99.6%.结论:该方法简便、快速、稳定,细胞丢失少,分裂相多,技术要求低,便于基层单位推广应用.
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几种实验小鼠骨髓染色体和中国仓鼠不同组织同工酶分析
目的 通过染色体制备,观察比较中国仓鼠、C57小鼠和ICR小鼠染色体数目及其形态特征.同时分析同工酶在仓鼠不同脏器组织中的表达情况.方法 通过秋水仙素处理使实验动物染色体加倍,骨髓细胞染色体制片法观察细胞染色体分布情况,鉴定了三种不同种属小鼠的染色体核型.同工酶分析采用优化的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测不同脏器组织中表达情况.结果 中国仓鼠染色体条数为2n=28,具有中着丝粒染色体、近中着丝粒染色体及端着丝粒染色体.而C57小鼠和ICR小鼠的染色体均为2n =40,且均为端着丝粒染色.乳酸脱氢酶(LDH)在检测组织中均有表达,且表达量较高,出现了多条特异染色条带.而葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)和核苷磷酸化酶(NP)表达量较低,表达亚型也比较单一.结论 染色体作为遗传物质的载体,其变异情况可直接影响机体的功能,染色体核型检测和同工酶分析成为机体正常功能检测的重要指标.通过多次的染色体制备,对其方法进行了必要优化.同时,也对同工酶分析特异染色方法进行了必要的优化探索,能达到较好的染色效果.
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连续量化外周血淋巴细胞染色体的制备方法
目的 快速制备外周血淋巴细胞染色体,提高分析效率,为染色体制备的规范化标准化提供理论依据.方法 连续量化法在传统制备方法基础上去掉三次室温放置固定时间,滴片后随之烤片,提高秋水仙素终浓度(0.008 μg/mL)等方面进行了优化,同时与传统制备法进行对比.结果 278例染色体标本:传统组400~600条分裂相占63%,连续量化收获组占65%(P=0.065);传统组染色体分散良好率65%,连续量化收获组良好率66%(P=0.088);两组比较无显著差异,表明两种方法无差别.结论 连续量化外周血淋巴细胞染色体的制备方法重复性和一致性好,缩短了染色体制备过程,提高了染色体分析的效率.
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人外周血淋巴细胞染色体G显带标本制备方法探讨
目的 探讨提高人外周血淋巴细胞染色体G显带效果的方法.方法 人外周血收集、淋巴细胞培养及染色体标本制备、Giemsa染色、G显带等操作步骤同常规方法,按不同的烤片温度和时间分组,对比各组标本的显带效果.结果 80℃烤片1～2 h,60℃1～2 h,60℃3～4 h时G显带带纹清晰,效果比较好;而60℃30 min,80℃30 min,80℃3～4 h时显带效果差.结论 烤片温度、时间长短直接影响G显带标本的质量,适宜的温度、时间能达到良好显带效果,甚至可提高临床对染色体病的诊断效率.
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小鼠骨髓细胞染色体制备实验方法的改进
染色体制备是细胞遗传学的重要技术手段,可以进行白血病、先天愚型等遗传性疾病的检查,是重要的临床辅助手段.在给医学生开设染色体制备实验课过程中,我们用骨髓细胞进行染色体标本的制备,并在教学过程中摸索了一些经验对实验过程进行了改进,简化了操作程序,提高了实验成功率,收到了良好的教学效果.
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浅谈医学高职院校人类外周血染色体制备实验教学经验与体会
医学遗传学是与临床医学结合紧密的一门过渡性学科，它已成为医学高职院校教育中不可缺少的基础课程，有效的医学遗传学实验教学对学生很好的掌握相关操作技能并促进其学习、记忆理论知识具有举足轻重的作用。本文主要根据七年多的临床细胞遗传学工作经验结合六年的本学院实验教学情况浅谈人类外周血染色体制备在高职院校的实验教学经验与体会。
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外周血染色体培养和制备的影响因素
目的:对外周血染色体培养和制备的影响因素进行归纳总结,更好的掌握染色体培养和制备技术,供新加入细胞遗传的工作者参考和借鉴.方法:常规外周血染色体培养及制备的整个过程中影响因素进行总结.结果:染色体培养和制备过程繁琐,淋巴细胞培养、 接种、 收获、 制片、 显带、 染色等过程都能影响到染色体标本的终效果.结论:本细胞遗传室的染色体片,带纹清晰,核型质量佳,能够满足临床需求和病人要求.
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染色体分散仪在胎儿染色体标本制备中的应用
目的 探讨染色体分散仪在胎儿染色体制备过程中的意义.方法 使用染色体分散仪控制染色体滴片时的环境温度及湿度,制备染色体并对染色体的分散程度、染色体质量进行分析,以探索佳的温度/湿度组合.结果 提高温度和相对湿度,均可增加脐血和羊水细胞染色体的分散程度,且分布均匀,染色体重叠交叉少,优于传统染色体滴片法.结论 Chromprep S4恒温系统可在不同的实验室之间采用完全相同的仪器参数,制备出较高质量的染色体标本,提高胎儿染色体产前诊断分析的准确度.
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直接低渗和秋水仙素同时处理在浆膜腔积液检查中的应用
浆膜腔积液中染色体检查是临床早期诊断和鉴别诊断恶性积液的有效方法。受林梓家等［1］的启示，对各种浆膜腔积液采用直接低渗和秋水仙素同时处理的方法，反复摸索处理时间及用量，得到满意的结果，应用于149例积液染色体制备，现报道如下。
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脐带间充质干细胞染色体核型制备及安全评估
目的 探讨脐带间充质干细胞染色体核型制备方法,评估脐带间充质干细胞安全性.方法 对培养至第2、5、8、10、11代的共15例脐带间充质干细胞进行染色体制备,检查其有无异常.结果 成功制备染色体标本,成功率为100％,正常核型率为100％.结论 该脐带间充质干细胞染色体制备方法实验结果稳定、成功率高.脐带间充质干细胞在培养至11代时未见异常染色体核型.
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人外周血淋巴细胞培养染色体制备及影响因素
目的 熟悉人外周血淋巴细胞的短期培养方法,掌握染色体的制备技术.方法 以人外周血为材料,采用RPMI 1640全培养基进行体外淋巴细胞培养,对采血后细胞培养时间、秋水仙碱浓度、固定液的配制时间、滴片距离及烤片温度等影响因素进行分析.结果 建立了较成熟的淋巴细胞体外培养方法及染色体制作技术.结论该方法具有取材便利、用血量少、培养简单等优点,故在临床上得到广泛应用.
关键词： 人外周血淋巴细胞培养 染色体制备 影响因素
