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腺病毒介导HIF-1α基因对大鼠脊髓损伤后NGb表达的影响
目的 探讨HIF-1α在脊髓损伤后对NGb表达的调控作用,为脊髓损伤的基因治疗提供新思路及实验依据.方法 采用电控大鼠脊髓损伤打击装置致大鼠脊髓损伤模型.采用脊髓内注射法将滴度为4(1010 PFU/ml (Plaque-Forming Unit, PFU), 含HIF-1α基因(Ad-HIF-1α)或不含HIF-1α基因(Ad-Blank)的腺病毒载体稀释液2 μL注入脊髓.免疫组织化学法检测大鼠脊髓HIF-1α、NGb的表达.分析在转HIF-1α基因前后两种蛋白质表达水平的变化.结果 Normal、Sham组大鼠脊髓NGb呈中等表达, SCI、Ad-Blank大鼠脊髓内NGb呈高表达,在第3天达到高值.Ad-HIF-1α组光密度值均较SCI及Ad-Blank组各时间点的光密度值高(P＜0.05), 在损伤后的第7 d达到高值.结论 转HIF-1α基因促进脊髓损伤后NGb的表达上调,并提示NGb基因是低氧反应基因(Hypoxia Respose gene, HRG)HIF-1α的调控基因.
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天津医科大学硕士研究生导师胎鼠神经干细胞移植对大鼠脊髓损伤后神经红蛋白及半胱氨酸蛋白酶-3表达的影响
目的 研究胎鼠神经干细胞(NSCs)移植对大鼠脊髓损伤(SCI)后神经红蛋白(Ngb)及半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)表达的影响.方法 40只SD大鼠随机分为正常对照组(Normal组)、脊髓损伤组(SCI组)、神经干细胞组(NSCs组)、神经干细胞标记组(BrdU+NSCs组).采用电控SCI打击装置制作模型,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)法标记处于对数生长期的NSCs,SCI后即刻进行NSCs移植.免疫组化法观察BrdU标记NSCs的存活、迁移及Ngb和caspase-3的表达,改良Rivlin法观察大鼠后肢运动功能的恢复情况.结果 BrdU+NSCs组在损伤脊髓区域可检测到BrdU标记的阳性NSCs.BrdU+NSCs组和NSCs组各时间点caspase-3免疫阳性细胞光密度值均比SCI组减少(P＜0.01),Ngb免疫阳性细胞光密度值比SCI组明显增加(P＜0.01),且Ngb表达高峰延长至伤后第14天;移植后第7、14、28天,后肢运动功能评分比SCI组明显升高(P＜0.01).BrdU+NSCs组与NSCs组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 体外培养的胚胎大鼠NSCs可在SCI区域存活、迁移,并能通过上调Ngb的表达来抑制大鼠SCI后神经细胞的凋亡,从而促进大鼠瘫痪肢体功能的恢复.
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神经红蛋白在脊髓中的表达与分布
脊髓损伤后组织缺血缺氧一直是国际上的研究热点.Burmester等[1]首次报告了人和小鼠中枢神经系统内存在特异的功能类似于肌红蛋白的携氧蛋白--神经红蛋白(neuroglobin,NGb),为中枢神经系统缺血缺氧的研究提供了新的思路[2].但目前关于NGb在脊髓中表达与分布的研究尚属空白.
