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XRCC2基因沉默联合辐射对结肠癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响
目的：探讨shRNA介导的XRCC2基因沉默联合辐射对结肠癌细胞移植裸鼠肿瘤的疗效。方法将结肠癌T84细胞接种于BALB/c裸鼠建立肿瘤移植模型，分为control组、shRNA?SC组和shRNA?XRCC2组。裸鼠经X射线局部照射，检测放射治疗后肿瘤的体积和质量变化，并对肿瘤组织进行病理分析。结果 shRNA?XRCC2组肿瘤生长速度较缓慢，从放射治疗的第12天开始至放射治疗继续到第28天，shRNA?XRCC2组瘤体明显较control组减小，差异有统计学意义（P<0.01）。shRNA?XRCC2组肿瘤质量明显轻于control组，二者比较差异有统计学意义（t=18.843，P<0.01）。shRNA?XRCC2组裸鼠移植瘤的抑瘤率为56.25%，远远高于shRNA?SC组（4.69%）。移植瘤组织的病理检查结果表明，shRNA?XRCC2组肿瘤组织核异型不明显，少见核分裂相，多见坏死区。结论 XRCC2基因沉默联合辐射对裸鼠结肠癌移植瘤具有显著的抑瘤效果。
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XRCC2基因沉默对结肠癌细胞放射敏感性的影响
目的 探讨XRCC2基因沉默对人结肠癌细胞放射敏感性的影响.方法 实验分组为control组(结肠癌T84细胞)、shRNA-SC组(T84/shRNA-SC细胞)和shRNA-XRCC2组(T84/XRCC2-shRNA细胞).经X-射线照射后,采用碱性“彗星”电泳法测定结肠癌细胞的DNA损伤修复,采用流式细胞术检测结肠癌细胞的细胞周期和细胞凋亡率.结果 照射前shRNA-XRCC2组细胞显示出拖尾彗星;照射后shRNA-XRCC2组细胞尾长、尾矩或Olive尾矩均明显高于control组细胞,差异有统计学意义(t=6.95、5.34、9.43,P＜0.01).照射前shRNA-XRCC2组细胞与control组细胞相比,停留在G2/M期较多(14.36％±1.32％),差异有统计学意义(t =10.46,P＜0.01);照射后shRNA-XRCC2组滞留在G2/M期的细胞显著增加(38.51％±4.15％),与control组细胞相比差异有统计学意义(t=3.92,P＜0.05).照射前shRNA-XRCC2组细胞凋亡率(17.40％±4.81％)明显高于control组细胞(=8.59,P＜0.01);照射后shRNA-XRCC2细胞的凋亡率显著增加(33.16％±2.69％),与control组细胞相比差异有统计学意义(t=15.31,P＜0.01).结论 XRCC2基因沉寂提高了结肠癌细胞的放射敏感性,XRCC2有望在结肠癌的临床放射治疗敏感性中作为一重要的靶向基因.
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XRCC2基因多态性与鼻咽癌患者放射性口腔粘膜炎反应程度的相关性研究
目的 研究XRCC2基因多态性与放射性口腔粘膜炎反应程度的关系.方法 采用PCR-RFLP方法检测126例接受同期放化疗鼻咽癌患者外周血标本XRCC2基因多态性,记录放疗期间的口腔粘膜炎发生情况,分析XRCC2基因多态性与放射性口腔粘膜炎反应程度的相关性.结果 在126例接受同期放化疗患者中,放射性口腔粘膜炎发生率为100％,1、2级71例,3、4级55例.与XRCC2 C41657T位点C/T基因型相比,C/C基因型发生3～4级放射性口腔炎比例较低,风险比为1.48(0.682 ～3.211);与XRCC2 G4234C位点G/G基因型相比,G/C基因型发生3～4级放射性口腔炎比例略低,风险比为0.862(0.386 ～1.923),但两者不具有统计学意义(P＞0.05).XRCC2C41657T,G4234C位点的等位基因频率在1、2级和3、4级口腔粘膜炎中的分布无统计学差异(P＞0.05).结论 XRCC2C41657T、G4234C基因型、等位基因多态性可能与放射性口腔粘膜炎反应程度无相关性.
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大肠癌细胞 XRCC2基因对电离辐射损伤的反应
目的：构建稳定的XRCC2基因沉默大肠癌细胞系及阐明沉默XRCC2基因表达的大肠癌细胞对电离辐射损伤的反应。方法采用Western blot法检测不同肿瘤细胞系人大肠癌细胞系（ T84、HT29、Lovo）、食管癌EC9706细胞、乳腺癌MCF－7细胞和人正常胚肾HEK293细胞中XRCC2蛋白的表达水平。大肠癌T84细胞经0、2、4、8、12 Gy X射线照射后和8 Gy X线照射后0、6、24、48 h，用Western blot法和实时定量PCR法测定XRCC2蛋白和mRNA的表达水平。将XRCC2 shRNA质粒转染T84细胞，用嘌呤霉素进行细胞筛选，采用Western blot法和实时定量PCR法，检测沉默XRCC2蛋白和mRNA表达的效率。将XRCC2 shRNA质粒转染T84细胞，经X线照射后，采用单细胞凝胶电泳测定沉默XRCC2基因表达的T84细胞的DNA损伤修复。结果与人正常胚肾HEK293细胞相比，在不同肿瘤细胞系中XRCC2蛋白均呈不同程度的高表达，其中在大肠癌T84细胞中XRCC2蛋白表达高。随着X线照射剂量的增加，T84细胞中XRCC2蛋白的表达水平逐渐升高，8 Gy照射后XRCC2蛋白表达水平在48 h内随着时间的延长而逐渐升高；XRCC2 mRNA表达也表现出随剂量增加和时间延长而逐渐升高。与未处理的细胞相比，转染XRCC2 shRNA质粒的细胞中XRCC2蛋白和mRNA表达明显下降，约分别减少了70％和60％。照射后的T84细胞DNA损伤修复中shRNA－XRCC2组TDNA％、TM和OTM均显著高于未处理组和shR-NA－SC组，差异有统计学意义（t＝15.12、11.36、13.15，P＜0.01）。结论成功建立了稳定表达XRCC2基因沉默的大肠癌T84细胞系，XRCC2基因沉默导致辐射诱导的DNA损伤修复能力下降。
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XRCC 2 基因多态性与非小细胞肺癌易感性的关系
目的:观察非小细胞肺癌易感性与XRCC2基因 C41657T 及G4234C多态性及基因频率之间的关系.方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法对226例非小细胞肺癌患者和300例正常对照者XRCC 2基因 C41657T及G4234C多态性进行了分析.结果:中国北方汉族人存在XRCC 2基因C41657T及G4234C多态性;两组人群两个多态位点基因型、等位基因及单体型频率无统计学差异(均P＞0.05);但分层分析显示非吸烟者XRCC 2 41657T基因携带者患非小细胞肺癌风险是XRCC 2 C 41657C基因型的1.85倍(95% CI: 1.02 ～3.36),患腺鳞癌的风险是XRCC 2 C41657C基因型的2.45倍( 95% CI=1.05～5.72) ,而XRCC 2 基因G4234C多态性吸烟状况及病理分类的分层分析两组之间无统计学差异(P0.05).结论:XRCC 2基因41657T等位基因可能是非吸烟中国北方汉族人非小细胞肺癌及腺鳞癌的发病危险因素.
