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低氧诱导因子1α慢病毒载体转染骨髓间充质干细胞的成骨基因表达
背景:成骨作用和血管发生在骨的形成和修复过程中紧密结合,而低氧诱导因子1α被认为是促血管新生相关基因调控中重要的核心转录因子,其可促进缺氧部位血管的形成,进而促进骨的形成。
目的:构建野生型和点突变型两个低氧诱导因子1α慢病毒真核表达载体 Lenti-HIF1α-IRES-EGFP,并比较其对兔骨髓间充质干细胞成骨基因表达的影响。
方法:首先根据野生型人源低氧诱导因子1α基因序列信息和确定酶切位点的点突变型序列信息构建低氧诱导因子1α基因野生型和点突变型两个慢病毒真核表达载体;然后采用制备的病毒液转染兔骨髓间充质干细胞。
结果与结论:免疫荧光显微镜观察显示,转染7 d后野生型组和点突变型组细胞均未见明显荧光,转染14 d后两组细胞均呈现明显的绿色荧光;qPCR定量分析结果表明,转染7 d后即有低氧诱导因子1α和骨形态发生蛋白2基因的显著表达,转染14 d后,两基因仍然显示较高的表达水平。说明实验成功构建野生型和点突变型低氧诱导因子1α基因慢病毒真核表达载体,转染后可以促进兔骨髓间充质干细胞成骨基因的表达。 -
糖酵解抑制剂对人食管癌Eca109细胞的影响
食管癌是发生于食管上皮组织的消化系统恶性肿瘤,目前的治疗措施主要有外科手术、放射治疗和化学治疗等.食管癌复发和转移是治疗中存在的主要问题.本研究观察不同体积分数氧作用下,糖酵解抑制剂2-脱氧葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)对人食管癌Eca109细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响,可以从体外细胞学实验的角度研究2-DG对人食管癌细胞的作用及机制,为其用于治疗食管癌提供实验依据.
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三分类血球计数仪对新生儿白细胞计数的影响
近年来,半自动、全自动血细胞分析仪相继应用于临床,测量参数不断增加,为临床提供了重要依据,尤其是三分类的血球计数仪应用更为普遍,这种计数仪的原理是电阻抗法,此原理是基于细胞在测试系统中产生脉冲的大小,与仪器内设定阈值比较而得的数据.这种仪器不仅能检测更多的血细胞学实验结果,而且还能提供相应的白细胞直方图,以便对细胞进行分类.但由于仪器设置的参数不同,使用的试剂不同,有时可出现异常白细胞直方图,尤其是出生72小时以内的新生儿.本文就CD-1700分析仪和F-820分析仪的检查结果进行了比较分析,现报告如下:
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小鼠心脏穿刺采血并存活的几点注意事项
实验研究中,经常要采集实验动物的血液进行常规质量检测、细胞学实验或进行生物化学分析.小鼠由于其心脏小,心率快,采血比较困难,因此过去多提倡不用或者少用,或者用于处死动物时麻醉或开胸取血[1].但笔者经实践发现,只要克服心理负担,注意一些操作细节,适当练习,心脏取血易学、成功率和重复率高,具有其他取血方式不可替代的优势.
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半夏泻心汤及其配组干预胃癌的细胞学实验研究进展
半夏泻心汤乃伤寒名方,广泛应用于临床寒热错杂之证,胃癌临床症状复杂,辨证多寒热并存,切合半夏泻心汤之法.笔者分析了近10年来半夏泻心汤及其配组在胃癌干预的细胞学实验方面的研究进展,尤以癌细胞周期调控、抑制腹膜转移细胞及保护腹膜间皮细胞方面甚显,临床试验可在此基础上进行进一步的探索.