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β3-AR基因多态性与高血糖人群膳食干预效果
目的探讨β3-AR基因多态性与高血糖人群膳食干预效果的关系,为糖尿病的膳食干预提供遗传学依据.方法从南京市8个社区抽取233名汉族高血糖者,随机分为复合干预组(154人)和对照组(79人).干预组给予粗粮干预和进行健康进座,对照组不采取任何措施,试验周期6个月.结果干预组Trp/Trp基因型者体质指数(BMI)、腰臀比(WHR)、舒张压(DBP)、空腹血糖(FBG)、血总胆固醇(TC)水平明显降低,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显上升(P＜0.05);Trp/Arg基因型组BMI、WHR、FBG水平明显降低,HDL-C水平明显上升(P＜0.05).Arg/Arg基因型组无明显变化.此外,Trp/Trp型人群的BMI、WHR和FBG下降的干预效果明显大于Trp64Arg型和Arg/Arg型,而Trp64Arg型人群的这3项指标下降又明显大于Arg/Arg型(P＜0.05).结论高血糖人群膳食干预效果因β3-AR基因型不同而有差异,其中,Trp/Trp人群对膳食干预效果佳,Trp/Arg次之,而Arg/Arg效果较差.
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β3肾上腺素能受体基因多态性与2型糖尿病、原发性高血压发病相关性的研究
目的 研究β3肾上腺素能受体(β3-AR)基因第一外显子第190位点T/C多态性与2型糖尿发病、原发性高血压发病的相关性.方法 采用病例对照研究的方法,以74名2型糖尿病患者、82名原发性高血压患者与108名健康中老年人的空腹肘静脉血样本,分离白细胞并提取DNA,应用聚合酶链反应(PCR)-限制性酶切片段长度多态性技术检测两组的β3-AR基因第一外显子第190位点T/C多态性,比较三组各自的基因型和等位基因的分布频率.结果 β3-AR基因第一外显子第190位点T/T、T/C和C/C基因型在2型糖尿病组中分别为68.92%、17.57%、13.51%,在原发性高血压组中分别为82.93%、13.41%、3.66%,在正常中老年人组中分别为84.26%、12.96%、2.78%.2型糖尿病组与原发性高血压组及正常中老年人组的基因分布频率差异均有显著性,而原发性高血压组与正常中老年人组的基因分布频率差异无显著性.结论 β3-AR基因第一外显子第190位点的T/C多态性与2型糖尿病的发病具有一定程度的相关性;β3-AR基因第一外显子第190位点的T/C多态性与原发性高血压的发病无明显相关性;β3-AR基因第一外显子第190位点的T/T可能是2型糖尿病的保护性基因.
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β3-肾上腺素受体在心力衰竭时能量代谢重构中作用
在心力衰竭(heart failure,HF)的发生发展过程中,心肌细胞往往发生了能量和底物代谢的改变,并直接或间接地促进了心肌重构的发展,即心肌的能量“代谢重构”.β3-肾上腺素受体(β3-adrenergic receptor,β3-AR)主要分布于脂肪组织,与能量代谢密切相关,参与脂肪分解、葡萄糖转运、以及胰岛素分泌等过程,心肌也有少量β3-AR表达,HF时心肌β3-AR表达大量上调,介导负性肌力作用,同时脂解作用增强、调节脂肪酸氧化的PPARα下降,导致脂肪酸堆积,心肌优先利用葡萄糖代谢,出现能量代谢重构,现简述β3-AR在HF时能量代谢重构中的作用.
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人β3-AR和PPAR-γ2基因真核表达载体及β3-AR稳定表达细胞株的构建
目的 构建高效表达人β3-肾上腺素受体(hβ3-AR)的真核细胞表达载体,为进一步研究hβ3-AR的功能以及与过氧化物酶体增殖体激活受体-γ2 (PPAR-γ2)调控基因之间的相互影响奠定基础.方法 从人肾旁脂肪组织提取总RNA,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法扩增hPPAR-γ2、hβ3-AR cDNA全长序列.将EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后的hβ3-AR cDNA与同样进行EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切的pcDNA 3.1(+)载体连接形成重组载体pcDNA 3.1(+)/hβ3-AR.将XbaⅠ和AflⅡ双酶切后的hPPAR-γ2 cDNA与同样进行XbaⅠ和AflⅡ双酶切的pcDNA 3.1(+)载体连接形成重组载体pcDNA 3.1(+)/hPPAR-γ2.通过限制性内切酶酶切鉴定后对DNA序列进行测序,鉴定重组质粒中hβ3-AR和hPPAR-γ2基因的完整性和可靠性.运用定点诱变方法,对野生型hPPAR-γ2和hβ3-AR质粒进行定点诱变,构建Pro12Ala突变的hPPAR-γ2和Trp64Arg突变的hβ3-AR的pcDNA 3.1(+)载体,电穿孔法将人hβ3-AR重组表达载体pcDNA 3.1(+)/hβ3-AR(突变型和野生型) 转染到SH-SY5Y细胞中,用G418筛选获取稳定转染细胞株,并用RT-PCR、Western blot方法进行鉴定.结果 酶切和测序分析显示重组质粒构建正确,并在转染的SH-SY5Y细胞中获得hβ3-AR的高效表达.结论 成功克隆了人PPAR-γ2、β3-AR基因全长cDNA,并成功构建了人野生型和突变型的hPPAR-γ2和hβ3-AR的真核表达重组体[pcDNA 3.1(+)/hPPAR-γ2和pcDNA 3.1(+)/hβ3-AR].成功获得了稳定表达hβ3-AR基因的SH-SY5Y细胞株.
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穴位埋线对肥胖大鼠白色脂肪组织β3-AR蛋白表达的影响
目的:观察穴位埋线对肥胖大鼠白色脂肪组织β3-AR蛋白表达的影响.方法:36只超体质量大鼠随机分为埋线组、模型组、药物组,另取12只体质量成常大鼠为正常组.埋线组取双侧"后三里"、一侧内庭,进行埋线治疗;药物组每天分别给予曲美(西布曲明)0.9 mg·kg-1,经口腔灌胃给药,并与穴位埋线组同时间固定;模型组和正常组只固定不做任何治疗.各组大鼠均以普通饲料喂养,自由摄食、饮水.4周后,比较各组大鼠肥胖指标与脂肪组织β3-AR蛋白(免疫组织化学法)的异同.结果:从平均灰度来看,模型组明显高于正常组、埋线组、药物组(P＜0.01);药物组与正常组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);埋线组与正常组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).从平均光密度来看,模型组明显低于埋线组、正常组(P＜0.001),模型组与药物组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);且药物组与正常组比较,差异也有统计学意义(P＜0.001);而埋线组与正常组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).说明模型组脂肪细胞β3-AR蛋白表达比正常组明显降低;埋线组脂肪细胞β3-AR蛋白表达明显上调,且与正常组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);药物组亦有明显改善,与模型组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:穴位埋线可上调肥胖大鼠脂肪细胞β3-AR蛋白表达,是其治疗肥胖的机理之一.
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金匮肾气丸对自然衰老大鼠逼尿肌细胞M3R、β3－ARmRNA及其蛋白表达的影响
目的：观察金匮肾气丸对自然衰老大鼠逼尿肌细胞 M3 R、β3－AR mRNA 和蛋白表达的影响。方法：以多尿自然衰老大鼠为“肾虚多尿”模型，给予金匮肾气丸4周，采用酶消化和组织块相结合的方法原代培养逼尿肌细胞，用实时荧光定量 PCR 法和 Western-blotting 法观察金匮肾气丸对自然衰老大鼠逼尿肌细胞 M3 R、β3－AR mRNA 及其蛋白表达的影响。结果：与正常对照组比较，自然衰老大鼠逼尿肌细胞 M3 R mRNA 和蛋白的表达明显增加；与模型对照组比较，金匮肾气丸可以抑制自然衰老大鼠逼尿肌细胞 M3 R mRNA 和蛋白的表达；与正常对照组比较，自然衰老大鼠逼尿肌细胞β3－AR mRNA 和蛋白表达明显降低；与模型对照组比较，金匮肾气丸可以增加自然衰老大鼠逼尿肌细胞β3－ARmRNA 和蛋白的表达。结论：金匮肾气丸可以减少自然衰老大鼠膀胱逼尿肌细胞 M3 RmRNA 及其蛋白的表达和增加自然衰老大鼠膀胱逼尿肌细胞β3－ARmRNA 及其蛋白的表达，使 M3 R 和β3－AR 之间的平衡状态维持正常的水平。
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男性高尿酸血症与MTHFR基因C677T、β3-AR基因T190C、ACE基因I/D和AGT基因T704C多态性关系的研究
目的 研究MTHFR基因C677T、β3-AR基因T190C、ACE基因I/D和AGT基因T704C多态性与高尿酸血症的关系.方法 91例男性高尿酸血症患者和正常男性对照81人,分别检测生化指标,测量一般身体指标,用基因芯片法检测MTHFR、β3-AR、ACE和AGT基因的基因型.结果 MTHFR基因的T等位基因的分布频率明显高于对照组(χ2＞3.84,P＜0.05),ACE、AGT及β3-AR基因各基因型总体频率分布无差异(χ2＜3.84,P＞0.05), MTHFR基因型中,T/T型较C/C型BMI、尿酸和甘油三酯水平明显升高,其差异有统计学意义(t＜1.96,P＞0.05).结论 男性MTHFR基因C677T突变可能与高尿酸血症有关.
