首页 > 文献资料
-
褪黑素激活Nrf2和HO-1对锰诱导纹状体氧化应激的影响
目的 探讨Nrf2和HO-1在锰所致纹状体氧化应激中的作用及褪黑素(MT)对其的影响.方法 小鼠82只,均分为6组,分别为对照组、低MnC12组、中MnCl2组、高MnC12组、MT对照组和MT+高MnCl2组.第5、6组提前皮下注射(sc)给予5 mg/kg MT,2h后,第2、3、4和6组分别腹腔注射给予12.5、25、50和50 mg/kg MnC12,连续2周.用流式细胞仪测定细胞内ROS,比色法检测GSH和MDA含量,免疫组化法检测Nrf2和HO-1表达,Western blotting检测Nrf2和HO-1的蛋白水平.结果 与对照组相比,在各MnC12组中ROS含量、MDA含量、Nrf2和HO-1的阳性表达及其蛋白水平均增加,GSH含量下降.而MT对照组中仅Nrf2和HO-1表达及蛋白水平均明显增加.与高MnCl2组相比,在MT+高MnCl2组ROS和MDA含量均明显下降,GSH含量、Nrf2和HO-1阳性表达及蛋白水平明显增加.结论 褪黑素可拮抗锰所致的小鼠纹状体氧化应激,其机制可能与Nrf2和HO-1有关.
-
姜黄素对镉致大鼠肾Nrf2及HO-1、γ-GCS、Gpx-1 mRNA和蛋白表达的影响
目的 探讨Nrf2及HO-1、γ-GCS、Gpx-1在镉所致肾脏氧化应激中的作用及姜黄素对其的影响.方法 Wistar大鼠32只按体重随机分为4组,每组4只,分别为对照组、低剂量CdCl2组、高剂量CdCl2组和姜黄素干预组.1～3组大鼠予皮下注射生理盐水,第4组大鼠给予皮下注射50 mg/kg姜黄索;2 h后,第1组仍腹腔注射生理盐水,第2～4组大鼠分别腹腔注射3、6和6μmol/kg CdCl2溶液,每周染毒5次,隔日干预1次,连续干预与染毒6周.采用流式细胞仪测定肾细胞内ROS水平,Real-time PCR和Western blotting法测定Nrf2、HO-1、γ-GCS、Gpx-1的mRNA和蛋白表达.结果 与对照组比较,在高剂量CdCl2组中ROS含量,Nrf2、HO-1、γ-GCS的mRNA及蛋白表达均显著升高(P＜0.01),Gpx-1的mRNA及蛋白表达显著降低(P＜0.01).与高剂量CdCl2组比较,姜黄素干预组ROS含量显著降低,Nrf2、HO-1、γ-GCS、Gpx-1的mRNA及蛋白表达均显著升高(P＜0.01).结论 姜黄素可拮抗镉所致的大鼠肾脏氧化应激,其机制可能与Nrf2及其调控下游HO-1、γ-GCS和Gpx-1表达有关.
-
Nrf2-ARE通路调控减轻器官缺血再灌注损伤机制的研究进展
缺血再灌注损伤(IRI)是指缺血缺氧器官或组织细胞损伤在恢复血供氧供之后反而加重的现象.核转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)—抗氧化反应元件(ARE)是目前为止发现的、为重要的内源性抗氧化体系,是机体重要的自我防御系统,激活Nrf2-ARE信号通路可增加细胞抗氧化蛋白表达,通过抗凋亡、抑制线粒体膜通透性转换(MPT)、减轻炎症等机制减轻IRI.现将Nrf2-ARE信号通路的调控方式及其减轻IRI的机制综述如下.
关键词： 缺血—再灌注损伤 核转录因子NF-E2相关因子2 活性氧 -
莱菔硫烷通过Nrf-2、Sirt-1改善氧化应激诱导的血管钙化
目的 探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)在氧化应激所致血管钙化中的作用与机制.方法 采用β-甘油磷酸处理大鼠血管平滑肌细胞(RASMCs)构建尿毒症血管钙化模型.RASMCs分为正常对照组、1μmol/L SFN组、5μmol/L SFN组、钙化组、钙化+1μmol/L SFN组、钙化+5 μmol/L SFN组,分别培养72 h.MTT检测细胞的生存情况,Von Kossa观察细胞钙化情况,微板法测定细胞中钙离子含量,实时荧光定量PCR检测细胞中纤维细胞生长因子23(FGF-23)mRNA的表达,Western印迹检测骨调蛋白(OPN)、核心结合因子o1(Runx-2)及核转录因子NF-E2相关因子2(Nrf-2)、沉默信息调节因子2相关酶1(Sirt-1)的蛋白表达.激光共聚焦显微镜观察细胞线粒体的损伤,同时活性氧测定检测细胞内活性氧自由基(ROS)的含量.结果 (1)SFN对正常细胞的存活率没有影响,但低浓度和高浓度均能增加钙化组细胞存活率(均P＜ 0.05);(2)与钙化组比较,钙化+1μmol/L SFN组、钙化+5 μmol/L SFN组细胞内钙盐沉积、钙离子含量及FGF23 mRNA的表达均减少(均P＜0.05);(3)与钙化组比较,钙化+1 μmol/L SFN组、钙化+5 μmol/L SFN组细胞内ROS的产生及线粒体的损伤减少,OPN、Runx-2的表达减弱,Nrf-2、Sirt-1、Cleaved Caspase-3的蛋白表达增加(均P＜0.05).结论 SFN能通过Nrf-2、Sirt-1改善氧化应激引起的ROS沉积及线粒体功能紊乱,减轻血管钙化.
-
还原型谷胱甘肽对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖及核转录因子NF-E2相关因子2/血红素加氧酶-1信号通路的影响
目的 探讨还原型谷胱甘肽(GSH)对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖及核转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路的影响.方法 分别用浓度为0、1、2、5、10 mmol/L的GSH作用于经0.1 μg/ml脂多糖活化的大鼠HSC-T6细胞24h后,四甲基偶氮唑盐比色法检测HSC-T6增殖情况,放射免疫法检测细胞上清液中透明质酸(HA)及Ⅳ型胶原的含量,实时荧光定量PCR检测Nrf2和HO-1的mRNA表达水平,免疫细胞化学染色法检测HSC-T6中Nrf2和HO-1的蛋白质表达情况,分光光度计检测HO-1的活性变化.两两比较采用t检验,两变量间的关系采用曲线拟合方法. 结果 GSH能抑制HSC-T6增殖,1、2、5、10 mmol/L组的吸光度值分别为0.79±0.02、0.74±0.03、0.70±0.02、0.62±0.01,均低于0mmol/L组的0.88±0.03(t值分别为3.16、6.09、7.17、11.94,P值均＜0.05).GSH 1、2、5、10mmol/L组的HA表达量分别为(372.98±11.01)μg/L、(320.76±16.37) μg/L、(284.46±13.17)μg/L、(239.08±16.95)μg/L,明显低于0 mmol/L组的(415.74±14.52)μg/L(t值分别为4.07、7.52、11.59、13.71,P值均＜0.05);Ⅳ型胶原表达量分别为(191.27±17.49)μg/L、(163.85±16.26) μg/L、(133.03±13.14)μg/L、(103.31±12.52) μg/L,也低于0mmol/L组的(251.47±14.06) μg/L(t值分别为4.65、7.58、10.66、13.63,P值均＜0.05).0 mmol/L组HSC-T6中Nrf2 mRNA相对表达量(1.21±0.11)低于1、2、5、10 mmol/L组(分别为1.51±0.06、1.92±0.08、2.69±0.07、3.43±0.07),Nrf2蛋白表达的累积吸光度值(17.84±0.61)也低于1、2、5、10 mmol/L组(分别为23.85±0.20、27.90±0.32、33.69±0.75、38.64±0.38); HO-1 mRNA相对表达量(1.25±0.09)低于1、2、5、10 mmol/L组(分别为1.43±0.08、1.73±0.07、2.10±0.08、2.64±0.07),HO-1蛋白表达的累积吸光度值(16.77±0.31)也低于1、2、5、10 mmol/L组(20.75±0.30、24.84±0.24、28.89±0.19、33.88±0.19),差异均有统计学意义(P值均＜0.05).HO-1的活性也随GSH浓度增加而上升.结论 GSH可抑制HSC-T6增殖,减少其细胞外基质HA及Ⅳ型胶原分泌,其机制可能与GSH对HSC-T6的Nrf2/HO-1信号通路调控有关.
关键词： 肝硬化 谷胱甘肽 血红素加氧酶-1 核转录因子NF-E2相关因子2 肝星状细胞
