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原位杂交法检测视网膜色素上皮细胞炎前因子mRNA的表达

宋宗明;惠延年;瞿佳;王雨生;马吉献;韩泉洪;杜红俊

摘要: 目的观察视网膜色素上皮细胞(RPE)在炎性介质刺激下炎前因子mRNA 的表达. 方法培养的人RPE经IL-1β (10 μg*L-1)和脂多糖(1 mg*L-1)的刺激后,用生物素标记的寡核苷酸探针进行原位杂交,检测RPE炎前因子IL-1β,IL-6,IL-8和TNF-α mRNA表达. 杂交结果使用图像分析法进行比较. 结果原位杂交显示RPE细胞质中均呈现浓淡不一的淡蓝色着色,胞核不着色. 其中IL-6 mRNA在脂多糖刺激下染色较浅,增加脂多糖的剂量不能提高其表达. 图像分析显示在IL-1β (10 μg*L-1)和脂多糖(1 mg*L-1)刺激下,RPE表达IL-6 mRNA的吸光度分别为108±18和35±14,二者之间有显著性差异(P<0.01). 结论在IL-1β和脂多糖刺激下,人RPE可以表达炎前因子IL-1β,IL-6,IL-8和TNF-α的mRNA.

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