首页 > 文献资料
-
产前诊断技术的研究进展
产前诊断是优生优育和预防缺陷儿出生的重要手段.它是在遗传咨询的基础上,应用现代生物学、生物化学、免疫遗传学、细胞遗传学、分子遗传学等技术,通过母体检查或对胚胎(胎儿)直接检测,了解胎儿在子宫内的生长发育状况,诊断胎儿是否有遗传缺陷及先天畸形.本文就各种产前诊断方法、新技术、存在的不足与困难、以及发展前景综述如下.
-
光谱核型分析技术在白血病中的应用
光谱核型分析技术是近几年建立的一种细胞遗传学检测方法,它可以在没有任何预知的情况下同时对人的24条染色体进行核型分析,可以识别常规显带和单纯应用荧光原位杂交难以精确辨认的一些畸变,具有高度的精确性、敏感性、直观性.本文综述了光谱核型技术的原理及其在白血病中的应用.
-
光谱核型分析技术在标记染色体诊断中的应用
目的 探讨光谱核型分析(SKY)技术在标记染色体诊断中的应用价值.方法 选取临床工作中未能确诊的6个标记染色体病例(包括外周血标本4例和羊水、脐血产前诊断标本各1例),其中4例是为诊断目的 ,2例是为产前诊断目的 .按SKY技术操作常规进行制片杂交,通过相应的计算机软件分析结果.应用荧光原位杂交(FISH)对SKY技术分析结果行进一步鉴定;并应用C显带技术对染色体的异染色质成分进行辅助诊断.结果 6个标记染色体病例均成功地进行了SKY技术分析,并明确了标记染色体的来源;除病例4外,其他5个病例的FISH鉴定结果均与SKY技术分析结果相符.在明确诊断的2例产前诊断病例中,1例属家族遗传性的标记染色体病例,因而继续妊娠,至足月顺产一女婴,产后随访至今,女婴生长发育未见异常;而另1例属新发生的标记染色体病例,因而于孕25周时终止妊娠.结论 SKY技术可以快速、直观和准确地诊断不明来源的标记染色体.
-
光谱核型分析技术在产前诊断染色体复杂核型异常中的应用
如何对精细的染色体异常做出准确的核型分析,一直是产前诊断中的研究课题.应用传统的细胞遗传学G显带技术进行的染色体核型分析,已经成为染色体异常的常规筛选方法.但其费时、费力,对复杂染色体核型异常的分析很不理想,难以自动化操作.荧光原位杂交技术具有高度的敏感性和特异性,但它只能检测已知的染色体核型异常. 光谱核型分析 [1] 技术的出现,使应用荧光原位杂交进行染色体核型异常的筛查成为可能.为此,我们建立了稳定的光谱核型分析技术(SKY)用于染色体复杂核型异常的产前诊断,并与G显带技术进行对比.现将结果报道如下.
-
胎儿标记染色体及衍生染色体的细胞与分子遗传学研究
目的：探讨胎儿标记染色体及衍生染色体的产前诊断与评估策略。方法通过传统染色体显带技术、荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）及光谱核型分析（spectral karyotyping，SKY）等3种技术平台的联合应用，对2010年3月12日至2012年11月9日在中山大学附属第一医院检出的5例胎儿标记染色体及1例胎儿衍生染色体孕妇进行细胞与分子遗传学水平诊断的情况进行回顾性分析。结合胎儿的超声检查结果，评估2种染色体异常的临床表型效应及妊娠结局。结果5例标记染色体均为新发性突变，2例为镶嵌体，3例为非镶嵌体。其中2例为47,XX,+mar型标记染色体，超声检查提示胎儿异常，通过FISH及SKY确定其分别来源于4号和22号染色体；其余3例为Turner综合征型标记染色体，超声检查提示胎儿未见异常。这3例中，2例行FISH检测，证实标记染色体来源于Y染色体；1例行FISH和SKY检测，证实为环状X染色体。1例衍生染色体为新发性突变，行FISH及SKY证实为2号和6号染色体间相互易位形成的衍生染色体。5例标记染色体胎儿及1例衍生染色体胎儿均于妊娠25~32周选择引产。结论传统染色体显带技术、FISH及SKY等3种技术平台联合应用，可以准确诊断胎儿标记染色体及衍生染色体的来源及其所含的部分染色体成分。结合超声检查结果，可以为临床表型效应的评估及临床遗传咨询提供指导。
-
急性白血病分子-细胞遗传学研究及临床应用进展
近年来,染色体双色或多色荧光原位杂交(FISH)、光谱核型分析、高通量基因芯片、染色体涂抹及基因扩增、定位和克隆等新技术的应用,大大提高了白血病常规法易漏检的隐匿性或复杂性异常染色体的检出率.
-
染色体核型分析技术的发展
各种生物染色体的形态、结构和数目都是相对稳定的.每一生物细胞内特定的染色体组成叫染色体组型,染色体组型分析也称核型分析.染色体组型分析有助于探明染色体组的演化和生物种属闻的亲缘关系,对于遗传研究与人类染色体疾病的临床诊断也非常重要.染色体显带技术的产生使人们能对人类24条染色体(1-22,X,Y)进行识别和鉴定,而且近年来已经可以通过计算机软件进行自动核型分析.
-
光谱核型分析技术在白血病研究中的初步应用
目的 建立光谱核型分析技术(SKY),并初步探讨SKY在白血病中的应用价值.方法 SKY检测2例健康志愿者建立SKY技术,并选择8例已进行R显带核型分析的白血病患者进行SKY检测,其中4例还分别进行了MLL、PML/RARa、 BCR/ABL等基因的双融合荧光原位杂交(DF-FISH)检测.将R显带核型及DF-FISH结果进行比较,考察SKY技术的稳定性和可靠性.结果 10例标本的SKY分析均获成功.2例健康志愿者均示正常核型,8例白血病患者中,SKY分析分别发现9q-,t(9;22),t(15;17),及复杂核型47,XY,+9?ins(1;5)(q23;q23),t(6;7)(q23?;p13)和一些数量异常.这些结果均证实了R显带及DF-FISH的结论,并有更精确的定位和补充.结论 本研究建立的光谱核型分析技术具有较高的稳定性、可靠性和精确性,可应用于白血病的染色体研究.
-
光谱核型分析技术在急性髓系白血病细胞遗传学分析中的应用
目的 初步探讨光谱核型分析(Spectral karyotyping,SKY)技术在急性髓系白血病(AML)细胞遗传学分析中的应用价值.方法 对9例AML患者分别采用R显带、SKY检查染色体核型,采用双融合荧光原位杂交(D-FISH)检测MLL、PML-RARα、AML1-ETO等融合基因.将R显带、DFISH、SKY结果进行比较,考察SKY技术在AML细胞遗传学研究中应用的稳定性和可靠性.结果 9例患者标本SKY均获成功.通过SKY技术分别发现9q-,t(15;17)及ins(10;17)(q22;p11p12)3种结构异常及一些数量异常.这些结果均证实和补充了R显带及D-FISH的结论,并定位更精确.结论 SKY技术具有较高的稳定性、可靠性和精确性,可应用于AML的细胞遗传学研究.
-
光谱核型分析及其在血液系统肿瘤中的应用
染色体异常是导致先天性缺陷和肿瘤等疾病的主要原因,传统的细胞遗传学显带核型分析费时、费力,特别是对复杂染色体异常的分析尤为困难.经典的荧光原位杂交(FISH)技术采用特异探针检测已知的染色体异常更直观、灵敏和特异,但一次只能检测一个或几个候选位点,且仅能检测已知的染色体异常,不能像核型分析那样进行染色体异常的筛查.近年来,在FISH基础上发展出多色荧光原位杂交技术:光谱核型分析(spectral karyotyping,SKY)、多重FISH(M-FISH)和彩色显带FISH(Rx-FISH),一次成像可同时区分24条染色体,使得复杂染色体异常的筛查成为可能.自1996年首次报道SKY技术以来,它已广泛应用于人和鼠细胞分子遗传学研究[1].
-
自然流产的遗传因素及诊断
遗传因素是导致自然流产常见的原因,目前其临床诊断仍以常规细胞遗传学方法为主.但近年来随着荧光原位杂交、比较基因组杂交及PCR等技术的应用,不但明显提高其诊断的正确率和检出率,而且发现了除染色体异常以外的其他遗传因素.就相关的遗传因素及目前采用的几种诊断方法作一简单的综述.
-
分子细胞遗传学技术在血液病中的应用
染色体异常是导致先天性缺陷和肿瘤等疾病的主要原因,传统的细胞遗传学显带技术的染色体核型分析费时、费力,敏感性和特异性差,特别是对复杂染色体异常的分析尤为困难.荧光原位杂交(FISH)、比较基因组杂交(CGH)和多色荧光原位杂交技术包括多重FISH(M-FISH)、光谱核型分析(SKY)等分子细胞遗传学技术克服了传统细胞遗传学缺陷,是对传统核型分析的有力补充.本文对上述分子细胞遗传学技术在血液病中的应用作一综述.
-
介绍一种实体瘤细胞染色体分析的新技术--光谱核型分析
目的采用光谱核型分析技术对实体瘤细胞进行染色体分析,为临床对肿瘤的诊断、预后估计和疗效的评价提供重要的判断指标.方法应用多种荧光染料的频谱重叠探针对10例实体瘤细胞进行光谱核型分析.结果我们建立了稳定的光谱核型分析方法,发现肿瘤实体瘤染色体异常呈多倍体且结构异常复杂,包括易位、缺失、扩增、重排、双着丝粒、等臂及标记染色体等.结论光谱核型分析技术可揭示常规核型分析方法难以识别的染色体结构,将成为实体瘤染色体的一种精确、灵敏和可靠的检测手段.
-
常用染色体分析技术在产前诊断中的应用
经典的细胞培养和细胞染色体分析是染色体病诊断的金标准，但该方法有实验周期长，对部分复杂、微小异常诊断困难等缺点；随着分子遗传学技术的不断发展，在传统染色体核型分析的基础上衍生发展了多项染色体分析诊断技术，如荧光原位杂交技术、比较基因组分析、光谱核型分析等不断应用于产前诊断染色体病中。这些新技术具备实验周期短，特异性强，分辨率高等优点。本文将就常用染色体分析技术原理、特点作一综述，并探讨将这些新技术与传统的细胞染色体核型分析技术相结合，合理运用，使得产前诊断中更多复杂的染色体异常核型的明确诊断成为可能。
-
氯氨顺铂诱导耐药后肺腺癌细胞株生物学特性及染色体核型分析
目的建立肺腺癌氯氨顺铂诱导耐药细胞株,分析耐药细胞株生物学特性及染色体核型,为肺腺癌的治疗提供实验依据.方法采用氯氨顺铂(cis-diaminodichloroplatin, CDDP)大剂量冲击+逐步诱导法建立肺腺癌耐药细胞株A549/CDDP和SPC-A-1/CDDP,MTT法检测细胞耐药指数,生物发光法测定细胞能量代谢,流式细胞仪测试细胞周期,染色体G显带技术和光谱核型分析(spectral karyotyping, SKY)技术分析染色体变化. 结果 MTT检测结果显示,A549/CDDP和SPC-A-1/CDDP耐药指数为 14.0 和 12.0,其ATP、ADP、AMP含量较A549和SPC-A-1显著降低,细胞周期无明显变化.G显带结果表明A549/CDDP和SPC-A-1/CDDP染色体均为亚三倍体,SKY分析见两株耐药细胞均出现数条衍生染色体.结论 CDDP可以成功诱导肺腺癌耐药细胞株,衍生染色体,包括der(21)t(21;22)等可能与肺腺癌耐药有关.
-
七例产前诊断的标记染色体及复杂染色体畸变的光谱核型分析
目的 探讨光谱核型分析( spectral karyotyping,SKY)结合荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)及传统核型分析技术在产前诊断标记染色体及复杂染色体畸变中的应用.方法 对产前诊断中常规G显带分析发现的5例标记染色体以及2例复杂染色体畸变的胎儿样本进行SKY分析,必要时应用FISH技术进一步鉴定或采用C显带、N显带技术进行辅助诊断,并分析胎儿产前超声检查、生后随访或病理解剖结果.结果 5例标记染色体的病例中2例为大的标记染色体,3例为中等大小标记染色体;1例胎儿为父源性遗传,4例为新发突变.用SKY分析发现2例为非近端着丝粒来源(分别为4号、9号染色体),2例为近端着丝粒来源(分别来自22号、21号染色体),1例为X染色体来源.3例经FISH检查证实了SKY分析结果.5例标记染色体的胎儿4例终止妊娠,1例父源性遗传者足月分娩,生后随访1年未见异常.2例产前诊断为复杂染色体畸变的胎儿,其中1例经常规G显带分析为不明来源的衍生染色体,SKY诊断为8号染色体自身部分重复;另1例经SKY诊断为2号与6号染色体易位的胎儿足月分娩,随访6个月时有生长发育迟缓.结论 应用SKY结合FISH及传统的核型分析可对产前诊断中难以确定来源的标记染色体及复杂染色体畸变作出诊断,结合超声波检查结果,可更好地为临床咨询提供指导.
-
光谱核型分析检测人未受精卵细胞非整倍体
目的建立光谱核型分析检测人未受精卵细胞非整倍体的方法. 方法取试管婴儿术后成熟未受精卵细胞,固定后行光谱核型分析,检测卵细胞各染色体的核型情况. 结果 64%的卵细胞核型正常,36 %的卵细胞为非整倍体,其中22%为同源染色体不分离,14%为姐妹染色单体非平衡性过早分离. 结论光谱核型分析可用于检测卵细胞各条染色体的异常.同源染色体不分离和姐妹染色单体非平衡性过早分离均参与了卵细胞非整倍体的产生.
-
光谱核型分析技术在染色体异常诊断中的应用
目的 建立稳定的光谱核型分析技术,并评价其在染色体异常诊断中的应用价值.方法 应用光谱核型分析技术对16例外周血和1例羊水细胞染色体样本进行诊断,并与G-显带诊断结果进行比较.结果 所建立的光谱核型分析技术不但成功地对全部15例G-显带诊断结果为正常或平衡易位的样本进行了正确诊断,而且对G-显带无法识别的1例外周血样本的衍生染色体片段和1例羊水样本的标记染色体亦明确了来源.结论 光谱核型分析技术对染色体异常的诊断具有很高的敏感性和特异性,并且在明确传统核型分析技术不能分析的标记染色体或衍生染色体片段的来源方面具有重要应用价值.
-
综合应用分子细胞遗传学技术检测一例染色体微小易位
目的 综合应用分子细胞遗传学技术对1例染色体微小易位的病例进行检测.方法 按常规制备染色体,G显带进行核型分析,并先后进行光谱核型分析(spectral karyotyping,SKY),染色体涂染,双色荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridisation,FISH)检测,亚端粒探针FISH检测.结果 常规G显带染色体核型为46,XX,？(22q11.3),SKY核型分析结果:46,XX,der(4)t(4;6),未发现22号染色体异常,染色体涂染未发现6号染色体信号异常.双色FISH提示其中1个22号染色体22q13.3片段易位到另外1条4号染色体短臂末端.亚端粒探针FISH显示22号染色体长臂末端和4号染色体短臂末端的相互易位.综合上述结果结合染色体高分辨分析,得出染色体核型为:46,XX,t(4；22)(p15.3;q13.2).结论 对于染色体微小易位的病例,应结合相关临床信息综合应用分子细胞遗传学技术以提高该类染色体病的诊断准确度.
-
肺腺癌耐药细胞株生物学特性及染色体分析
目的:建立氯氨顺铂诱导肺腺癌耐药细胞株SPC-A-1/CDDP,分析SPC-A-1/CDDP生物学特性及染色体核型,为肺腺癌的治疗提供实验依据.方法:采用氯氨顺铂(Cis-Diinodichloroplatin,CDDP)大剂量冲击+逐步诱导法建立肺腺癌耐药细胞株SPC-A-1/CDDP,MTT法检测细胞耐药指数,生物发光法测定细胞能量代谢,流式细胞仪测试细胞周期,染色体G显带技术和光谱核型分析(spectral karyotyping,SKY)技术分析染色体变化.结果:MTT检测结果表明,SPC-A-1/CDDP对7种不同的化疗药物表现了不同的耐药性,其ATP、ADP、P含量显著降低,细胞周期无明显变化.G显带结果表明SPC-A-1/CDDP染色体为亚三倍体,SKY分析出现数条衍生染色体.结论:CDDP可以成功诱导肺腺癌耐药细胞株SPC-A-1/CDDP,SPC-A-1/CDDP衍生染色体可能与肺腺癌耐药有关.
