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zeste基因增强子同源物2在乳腺癌中的研究现状
zeste基因增强子同源物2(EZH2)是果蝇zeste基因增强子[E(z)]的人类同源物组蛋白甲基化的重要工具酶,也是多梳基因家族PcG(polycomb group)的核心成员.EZH2参与多梳蛋白复合体2的形成,促使相应组蛋白甲基化,从表观遗传学的角度介导相应靶基因沉默,在肿瘤的发生、发展过程中发挥着重要作用.其高表达与多种恶性肿瘤的发生、发展和极差的预后密切相关.近年来,越来越多的学者对EZH2的致癌机制进行了深入研究,为乳腺癌转移的检测、预后评估及治疗提供了全新的思路.笔者就EZH2表达情况及其与乳腺癌发生、发展、转移及预后之间的关系作一综述,以便临床医师更好地认识这一新的肿瘤标志物.
关键词： 乳腺肿瘤 肿瘤蛋白质类 zeste基因增强子同源物2 -
果蝇zeste基因增强子同源物2在结直肠腺癌中的表达及其意义
目的 探讨果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)在结直肠腺癌组织中的表达及其意义.方法 应用免疫组织化学染色法和Western blot法检测结直肠腺癌组织、腺瘤组织、癌旁组织中EZH2的表达,并分析其与结直肠腺癌的临床病理参数及预后的关系.结果 免疫组织化学结果显示,EZH2蛋白在结直肠腺癌、腺瘤、癌旁组织中的阳性表达率分别为80.56％(87/108)、62.5％(25/40)、5.00％(2/40),三组间差异有统计学意义(P＜0.05).Western Blot结果显示,EZH2蛋白在腺癌、腺瘤、癌旁组织的相对表达量分别为0.549±0.145、0.283±0.023、0.107±0.022,与癌旁组织相比,腺癌及腺瘤组织中EZH2的表达水平增高,腺癌组织中EZH2的表达高于腺瘤组织,差异有统计学意义(F=20.113,P＜ 0.05).在结直肠腺癌组织中,EZH2蛋白的高表达与肿瘤的发生部位、分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关(均P＜ 0.05),与患者年龄、性别无关(均P＞ 0.05).结论 EZH2可能与结直肠腺癌的发生发展、预后相关.
关键词： 结直肠腺癌 zeste基因增强子同源物2 免疫组织化学 印迹法 蛋白质 -
EZH2基因在肿瘤方面的研究进展
Polycomb group (PcG)蛋白家族是一组在胚胎发育中起作用的基因调控因子,根据其功能不同分为polycomb repressive complex l(PRC1)和PRC2两种蛋白质复合物.PRC2是一个作用于组蛋白H3赖氨酸位点K27的高度保守的组蛋白甲基转移酶,Zeste基因增强子同源物2(EZH2)是构成PRC2蛋白复合物中的一个催化亚基.近期大部分肿瘤研究表明,EZH2在多种癌组织过表达,如前列腺癌、乳腺癌.该文阐述EZH2的生物功能及与多种肿瘤组织的密切关系,讨论EZH2与其他表观遗传修饰酶间的关系和EZH2过表达的结果及其在肿瘤形成中的作用.
关键词： zeste基因增强子同源物2 肿瘤 高表达 -
EZH2基因RNAi慢病毒载体的包装及鉴定
目的 外周T细胞淋巴瘤(PTCL)源于成熟的胸腺后淋巴细胞,是一类少见的生物学行为及临床表现均高度异质性的疾病,且预后差.包装zeste基因增强子同源物2(EZH2)RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,可为今后相关实验研究奠定基础.方法 靶向EZH2基因的短发夹RNA(EZH2-shRNA)质粒转化感受态细菌,筛选阳性克隆,经测序鉴定正确后通过脂质体将慢病毒三质粒系统共转染293T细胞,进行慢病毒包装.病毒载体感染Hut78细胞后,观察感染效率,并用反转录定量PCR(RT-qPCR)和Western Blot检测EZH2mRNA和蛋白表达水平.结果 成功包装了慢病毒表达载体,对Hut78细胞的感染效率在95％以上.RT-qPCR和Western Blot检测结果显示,EZH2基因在靶细胞中的表达水平降低.结论 成功包装并鉴定了EZH2基因RNAi慢病毒表达载体.
关键词： 外周T细胞淋巴瘤 zeste基因增强子同源物2 慢病毒载体 RNA干扰 -
EZH2对HSC-T6细胞增殖活化的影响及其部分机制研究
目的探讨 Zeste 基因增强子同源物2( enhancer of zeste homolog 2,EZH2)表达沉默对大鼠肝星状细胞HSC-T6细胞增殖活化的影响,及其部分调控机制。方法应用EZH2的抑制剂DZNep(3-Deazaneplanocin A)作用于TGF-β1诱导活化的 HSC-T6细胞,采用 Western blot 法检测蛋白EZH2、p-ERK、p-AKT和α-SMA的表达；根据 EZH2的碱基序列设计并合成小干扰 RNA ( small interfering RNA,siRNA),通过脂质体LipofectamineTM 2000转染到HSC-T6细胞内,应用四甲基偶氮唑盐( MTT)法检测HSC-T6细胞的增殖变化,Western blot法检测蛋白EZH2、p-ERK、p-AKT和α-SMA的表达。结果将 DZNep 加入 TGF-β1诱导活化的HSC-T6细胞后, EZH2蛋白水平明显降低,同时 p-ERK、p-AKT和α-SMA蛋白水平亦明显降低；将 EZH2-siRNA转染活化的HSC-T6细胞内,HSC-T6细胞的增殖可明显被抑制,同时EZH2、p-ERK、p-AKT和α-SMA蛋白水平亦明显降低。结论抑制EZH2的表达可明显抑制HSC-T6细胞的增殖活化,EZH2可能是潜在的治疗肝纤维化的靶点。
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下调EZH2提高胃癌SGC7901细胞对奥沙利铂的敏感性
目的 探讨下调zeste基因增强子同源物2(EZH2)基因对胃癌SGC7901细胞奥沙利铂敏感性的影响.方法 针对EZH2 mRNA序列设计合成小干扰RNA (siRNA)片段,将其分为siRNA-1组、siRNA-2组、siRNA-3组,转染至胃癌细胞株SGC7901中,同时设立阴性对照组和空白对照组,分别采用荧光定量PCR和Western blotting方法检测EZH2基因mRNA及其蛋白的表达情况,采用CCK-8法检测不同浓度奥沙利铂处理各组胃癌细胞的增殖抑制率.结果 转染EZH2 siRNA后,siRNA-1组、siRNA-2组、siRNA-3组EZH2mRNA的相对表达量分别为0.615 ±0.190、0.241 ±0.152、0.450±0.097,3组均低于阴性对照组(1.165 ±0.376),且差异具有统计学意义(P =0.028;P =0.002;P=0.007).SGC7901胃癌细胞转染佳siRNA片段后,干扰组的EZH2蛋白相对表达量为0.036 ±0.017,空白对照组和阴性对照组分别为0.362±0.026、0.398±0.036,3组间差异有统计学意义(F=157.745,P＜0.001),干扰组与阴性对照组、空白对照组相比,差异有统计学意义(P=0.001,P=0.002).奥沙利铂浓度为2、4、8、16 μg/ml时,干扰组、阴性对照组和空白对照组细胞增殖抑制率的差异有统计学意义[(18.107±2.822)％、(5.867±2.272)％、(5.333±1.883)％,F =28.185,P =0.001;(54.953±2.550)％、(22.177±1.871)％、(20.077±6.032)％,F=74.206,P ＜0.001;(60.337 ±1.641)％、(34.597±3.592)％、(30.227±5.273)％,F=54.897,P＜0.001;(78.340±2.081)％、(61.857±3.507)％、(63.077±8.473)％,F=8.586,P=0.017],而奥沙利铂浓度为32 μg/ml时3组间差异无统计学意义[(83.450±3.715)％、(72.190±3.948)％、(70.731±17.080)％,F=1.358,P=0.326].干扰组、阴性对照组及空白对照组的奥沙利铂半数抑制浓度(IC50)分别为5.178、12.643、13.601 μg,/ml.结论 下调EZH2基因的表达能显著抑制胃癌细胞增殖,提高胃癌细胞对奥沙利铂的敏感性,说明EZH2基因在胃癌化疗进展过程中有很重要的意义,为深入研究胃癌基因治疗提供一定的理论依据.
关键词： 胃肿瘤 RNA 小分子干扰 zeste基因增强子同源物2 奥沙利铂 -
小分子干扰RNA沉默果蝇zeste基因增强子同源物2对宫颈癌Hela细胞顺铂敏感性的影响
目的 探讨小分子干扰RNA (siRNA)沉默果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)对宫颈癌Hela细胞顺铂敏感性的影响.方法 培养宫颈癌Hela细胞,收集对数生长期Hela细胞继续培养,待贴壁细胞长满底部面积80％～90％时进行转染.将Hela细胞随机分为空白对照组、control siRNA组和EZH2 siRNA组,空白对照组Hela细胞不作处理,control siRNA组Hela细胞转染control siRNA,EZH2 siRNA组Hela细胞转染EZH2 siRNA.收集3组转染后Hela细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测Hela细胞中EZH2 mRNA表达,Western blot法检测Hela细胞中EZH2蛋白表达,流式细胞术检测Hela细胞的细胞周期.收集3组转染后Hela细胞,分别加入不同质量浓度(0.0、12.5、25.0、50.0、100.0、200.0 g·L-1)的顺铂,48 h后采用四甲基偶氮唑蓝法检测Hela细胞在顺铂作用下的体外存活率.结果 Control siRNA和EZH2 siRNA可高效转染Hela细胞,转染率均达90％以上.空白对照组、control siRNA组和EZH2 siRNA组Hela细胞中EZH2 mRNA相对表达量分别为396.7±88.4、389.2±70.6和98.5±20.3,EZH2siRNA组Hela细胞中EZH2 mRNA相对表达量显著低于空白对照组和control siRNA组(t=2.057、2.015,P＜0.01),空白对照组与control siRNA组Hela细胞中EZH2 mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(t=1.476,P＞0.05).空白对照组、control siRNA组和EZH2 siRNA组Hela细胞中EZH2蛋白相对表达量分别为509.4±110.7、497.5±80.4和120.4±31.3,EZH2 siRNA组Hela细胞中EZH2蛋白相对表达量显著低于空白对照组和control siRNA组(t=2.682、2.597,P＜0.01),空白对照组与control siRNA组Hela细胞中EZH2蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(t=1.943,P＞0.05).EZH2 siRNA组G0/G1期细胞比例显著高于空白对照组和control siRNA组(t=2.893、3.087,P＜0.05),EZH2 siRNA组S期、G2/M期细胞比例显著低于空白对照组和control siRNA组(EZH2 siRNA组与空白对照组比较:t=2.526、5.462,P＜0.05;EZH2 siRNA组与control siRNA组比较:t=2.498、5.417,P＜0.05),空白对照组与control siRNA组Go/G1期、S期及G2/M期细胞比例比较差异均无统计学意义(t=0.926、1.017、0.947,P＞0.05).不同质量浓度顺铂作用48 h后,同一质量浓度下EZH2 siRNA组Hela细胞的存活率明显低于空白对照组及control siRNA组(P＜0.05),且随着顺铂浓度的增加,3组Hela细胞的存活率均呈逐渐下降趋势.结论 沉默EZH2表达可提高宫颈癌Hela细胞对顺铂的敏感性,而阻滞细胞周期可能是其主要作用机制之一.
关键词： zeste基因增强子同源物2 宫颈癌 小分子干扰RNA 顺铂 药物敏感性 -
Zeste基因增强子同源物2及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白在胃癌细胞衰老过程中的作用及其机制
目的 探讨zeste基因增强子同源物2(EZH2)及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在胃癌AGS细胞衰老过程中的作用及其相关的机制.方法 胃癌AGS细胞,慢病毒转染沉默EZH2基因,衰老相关性β半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色,计数细胞异染色质位点(SAHF)数目,计数细胞核增殖抗原(Ki-67)检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot检测p21和p53表达水平.结果 沉默EZH2后,胃癌细胞SA-β-gal染色阳性率及SAHF阳性细胞百分比增加,SA-β-gal染色阳性率从(4.83±0.71)％增加至(35.22±2.67)％,而SAHF阳性细胞百分比从(5.20±1.48)％增加至(25.68±2.53)％;流式细胞检测显示细胞周期阻滞在G0/G1期,对照组为(41.20±3.70)％,沉默EZH2后增加至(57.60±2.97)％;p21和p53表达水平明显上调,其mRNA相对表达水平分别为对照组的(2.18±0.29)倍及(3.06 ±0.28)倍.加入mTOR抑制剂雷帕霉素处理EZH2沉默细胞,可见SA-β-gal染色阳性率及SAHF阳性细胞所占百分比明显下降,分别由(40.06±3.89)％降至(26.44±3.82)％和(32.38±3.89)％降至(20.48±3.44)％;流式细胞计数提示G0/G1期、S期和GJM期细胞百分比均发生显著变化,G0/G1期细胞百分比分别为(27.15±3.16)％和(56.03±5.29)％,S期细胞百分比分别为(50.63±2.97)％和(32.25±3.35)％,而G2/M期细胞百分比分别为(44.28±3.16)％和(28.37±3.17)％.结论 沉默EZH2能够通过调控p53、p21蛋白促进胃癌细胞衰老,细胞周期相关蛋白引起周期停滞后,需要mTOR相关信号通路驱动衰老转化.
关键词： zeste基因增强子同源物2 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 衰老 胃癌 -
zeste基因增强子同源物2高表达与雌激素受体阳性乳腺癌不良预后相关
目的 观察表达不同水平组蛋白3第27位赖氨酸三甲基化(H3K27me3)、zeste基因增强子同源物2 (EZH2)和X染色体重复转录三十四肽(UTX)的乳腺癌是否有不同的生物学特性.方法 检测146例乳腺癌患者H3K27me3、EZH2和UTX的水平,探讨其对于乳腺癌预后判断的价值.结果 H3 K27 me3过表达见于人表皮生长因子受体-2(Her-2)阴性病例.EZH2过表达则见于淋巴结转移、肿瘤直径＞ 20 mm以及有更高肿瘤分期和肿瘤分级的患者.运用COX比例风险回归模型研究结果显示,低H3 K27 me3和高EZH2在全体病例[风险比(HR)=2.57,95％可信区间(95％CI):1.63 ～4.04,P＜0.01]以及ER阳性组(HR=2.78,95％ CI:1.52～ 5.09,P＜0.01)中均可作为独立预后因素.H3K27me3弱表达(HR=0.18,95％ CI:0.07 ～0.49,P＜0.01)和EZH2高表达(HR=3.34,95％ CI:1.20 ～9.27,P＜0.05)均与不良总生存期显著相关.UTX的表达与患者预后之间未见明显的联系,且H3 K27 me3的表达水平并不受EZH2/UTX的影响.结论 检测ER阳性患者巾,H3K27me3和EZH2的表达有助于判断乳腺癌的预后.
关键词： 乳腺癌 组蛋白修饰 zeste基因增强子同源物2 预后 -
钙结合蛋白S100A4和zeste基因增强子同源物2在乳腺癌组织中的表达及临床意义
目的 探讨乳腺癌组织中钙结合蛋白S100A4和zeste基因增强子同源物2(EZH2)的表达水平及临床意义.方法 应用免疫组织化学法检测79例乳腺癌患者手术切除的癌组织和癌旁组织中S100A4和EZH2表达水平.结果 S100A4在乳腺癌组织中表达率明显高于癌旁组织(62.03％比22.79％,P＜0.01),EZH2在乳腺癌组织中表达率明显高于癌旁组织(70.89％比30.38％,P＜0.01);S100A4表达水平与乳腺癌肿瘤大小、TNM分期和淋巴结转移明显相关(P＜0.05),EZH2表达水平与乳腺癌TNM分期和淋巴结转移明显相关(P＜0.05).结论 S100A4和EZH2在乳腺癌组织中呈高表达,检测S100A4和EZH2有助于判断乳腺癌生物学行为.
关键词： 乳腺癌 S100A4 zeste基因增强子同源物2 -
小干扰RNA沉默zeste基因增强子同源物2对阿霉素诱导胃癌细胞MKN28衰老的影响
目的 观察小干扰RNA(siRNA)沉默zeste基因增强子同源物2(EZH2)对阿霉素诱导胃癌细胞MKN28衰老的影响.方法 体外化学合成EZH2基因特异性小干扰RNA,脂质体Lipofectamine2000介导转染人胃癌细胞MKN28；实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测特异性siRNA对EZH2基因mRNA水平的沉默效果；采用阿霉素诱导细胞衰老,衰老相关-β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色检测各组细胞衰老情况,激光共聚焦显微镜检测各组细胞胞核中衰老相关异染色质灶(SAHF)的形成.流式细胞仪和噻唑蓝实验(MTT)检测siRNA对细胞周期和生长的影响,并比较在阿霉素诱导下各组细胞的相应变化.结果 EZH2 siRNA能有效抑制MKN28细胞中EZH2 mRNA表达,促进阿霉素诱导的MKN28细胞衰老和SAHF形成,EZH2 siRNA+阿霉素组细胞SA-β-gal染色阳性率和SAHF形成比例明显高于对照组,分别为(87.88±2.66)％、(96.27±1.71)％和(42.01±7.50)％、(51.72±2.97)％,且EZH2 siRNA能阻滞MKN28细胞周期于G0/G1期,比例为(47.41±10.68)％,抑制细胞增殖,并促进阿霉素的阻滞细胞周期和抗增殖效应.结论 EZH2 siRNA可有效抑制胃癌细胞MKN28中EZH2表达,促进阿霉素诱导的胃癌MKN28细胞衰老,抑制细胞增殖.
关键词： 胃癌 zeste基因增强子同源物2 小干扰RNA 细胞衰老 -
EZH2和CBX7在乳腺癌中的表达及其临床意义
目的:探讨zeste基因增强子同源物2(EZH2)和色素框同源物7(CBX7)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义.方法:采用RT-PCR和免疫组织化学染色SP法检测EZH2和CBX7基因与蛋白在正常乳腺组织、乳腺良性肿瘤组织、乳腺癌组织中的表达.分析乳腺癌组织中两者表达之间的关系,以及两者表达与乳腺癌临床病理因素的关系.结果:正常乳腺组织、乳腺良性肿瘤组织及乳腺癌组织中EZH2 mRNA表达量与蛋白表达率依次明显增高,而CBX7 mRNA与蛋白表达率依次明显降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05);乳腺癌组织中EZH2和CBX7 mRNA与蛋白表达均呈负相关(r=-0.414,P=0.008;r=-1.000,P=0.015);两者的mRNA与蛋白表达水平均与淋巴结转移情况及临床分期有关(均P＜0.05),而与患者的年龄、绝经状况、肿瘤大小、组织学分级无关(均P＞0.05).结论:乳腺组织中EZH2表达升高、CBX7表达降低,两者间的相互作用可能参与了乳腺组织恶性转变及乳腺癌的浸润转移.
关键词： 乳腺肿瘤 zeste基因增强子同源物2 色素框同源物7 -
MicroRNA-98通过下调EZH2表达抑制结直肠癌细胞的活力与侵袭能力
目的:探讨微小RNA-98(miR-98)与Zeste基因增强子同源物2(EZH2)之间的靶向关系,及其对结直肠癌细胞活力和侵袭能力的影响.方法:TargetScan软件预测EZH2和miR-98之间的靶向结合,双萤光素酶报告基因实验验证miR-98与EZH2之间的靶向关系.用miR-98 mimic和miR-98 inhibitor分别转染人结直肠癌SW480细胞和SW620细胞,Western blot检测EZH2的蛋白表达;MMT法检测细胞活力;Transwell法检测细胞的侵袭能力.转染EZH2过表达质粒检测其对细胞活力和侵袭的影响.结果:miR-98能够靶向调节EZH2并负向调节SW480细胞和SW620细胞中EZH2的蛋白表达.在SW480细胞和SW620细胞中,过表达miR-98显著下调细胞活力和侵袭能力,而抑制miR-98表达显著促进细胞生长和侵袭.过表达EZH2也可促进SW480细胞和SW620细胞的生长和侵袭.结论:miR-98通过下调EZH2表达抑制SW480细胞和SW620细胞的活力和侵袭.本研究为结直肠癌的治疗提供了新的靶点和方向.
关键词： 结直肠癌 微小RNA-98 zeste基因增强子同源物2 -
MicroRNA-126通过靶向抑制EZH2增加胃癌SGC-7901细胞的放射敏感性
目的:探讨微小RNA-126(miR-126)增强胃癌细胞放射敏感性的分子生物学机制.方法:体外培养胃癌SGC-7901细胞,通过转染miR-126模拟序列上调细胞内的miR-126水平,使用RT-qPCR及Western blot检测miR-126上调后zeste基因增强子同源物2(EZH2)的mRNA及蛋白水平的变化.双萤光素酶报告基因实验确认miR-126与EZH2的靶向结合关系.在上调miR-126水平的同时,通过共转染pcDNA3.1-EZH2真核表达质粒提高细胞内的EZH2表达,CCK-8法及流式细胞术分析照射后胃癌细胞的活力及凋亡率的变化,从而评估EZH2过表达对miR-126放射增敏作用的影响.结果:上调胃癌SGC-7901细胞中的miR-126水平可以显著抑制EZH2的mRNA及蛋白水平(P<0.05).双萤光素酶报告基因实验提示miR-126与EZH2的mRNA间存在直接靶向关系.与仅上调miR-126的细胞相比,上调miR-126水平的同时过表达EZH2水平,将导致照射后SGC-7901细胞的活力增加,凋亡率减少(P<0.05).结论:对EZH2靶向抑制是miR-126增强胃癌SGC-7901细胞放射敏感性的机制之一.
关键词： 胃癌 微小RNA-126 放射治疗 zeste基因增强子同源物2 细胞凋亡 -
Zeste基因增强子同源物2通过调控Wnt/β-catenin 信号通路影响脑胶质瘤细胞凋亡
目的:探讨zeste基因增强子同源物2(EZH2)通过调控Wnt/β-catenin信号通路对脑胶质瘤细胞凋亡的影响.方法:以RT-qPCR和Western blot检测胶质瘤U87、H4和U251细胞及正常人脑星形细胞(NHA)中EZH2的表达水平.在H4细胞中转染EZH2 siRNA和siRNA control,MTT测定细胞活力,流式细胞术测定细胞凋亡,分光光度计法检测caspase-3的活性,Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路中关键蛋白β-连环蛋白(β-cate-nin)和下游靶分子c-Myc的蛋白表达.用Wnt/β-catenin信号通路激活剂处理转染EZH2 siRNA的H4细胞,流式细胞术测定细胞凋亡,Western blot测定β-catenin和c-Myc的表达.结果:胶质瘤U87、H4和U251细胞中EZH2的mRNA和蛋白水平均明显高于NHA(P<0.05),并且H4细胞中EZH2 mRNA和蛋白水平高于U87和U251细胞(P<0.05).EZH2 siRNA可以明显下调H4细胞中EZH2的mRNA和蛋白水平.EZH2表达下调后的H4细胞从48 h开始细胞活力降低,并且细胞凋亡率也明显升高,细胞中caspase-3活性也明显升高(P<0.05),同时EZH2表达下调还可以抑制β-catenin和c-Myc的表达.Wnt/β-catenin信号通路的激活剂可以减少EZH2诱导的H4细胞凋亡,降低细胞中caspase-3的活性.结论:EZH2在脑胶质瘤细胞中过度表达,下调其表达可以通过抑制Wnt/β-cate-nin信号通路的激活而诱导胶质瘤细胞凋亡.
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miR-137对卵巢癌的抑制作用及其机制
目的 分析miR-137的表达对卵巢癌的抑制作用及可能的作用机制.方法 采用正常卵巢上皮细胞株HOSE及人卵巢癌细胞株SKOV3、3AO、SW626,分析卵巢癌中miR-137的表达水平,研究其对卵巢癌抑制作用及可能的作用机制.结果 与miR-137在正常卵巢上皮细胞HOSE表达水平比较,卵巢癌细胞3AO、SW626、SKOV3中表达水平明显依次下降(P<0.05);通过Kaplan-Meier生存分析,卵巢癌中miR-137高表达的细胞生存期明显长于低表达(P<0.05);靶基因双荧光素酶实验显示卵巢癌SW626、SKOV3分别转染的wt-EZH23′-UTR与mut-EZH23′-UTR载体48 h后,野生型wt-EZH23′-UTR的相对双荧光素酶活性明显低于突变型mut-EZH23′-UTR(P<0.05);同时卵巢癌SW626、SKOV3分别经转染过表达miR-137明显降低EZH2基因mRNA水平及EZH2 mRNA蛋白水平的表达.Western Blot实验显示卵巢癌细胞miR-137降低EZH2蛋白的表达,通过过表达EZH2作用后EZH2蛋白的表达水平得到恢复(P<0.05);克隆形成实验显示卵巢癌细胞miR-137过表达后克隆形成能力下降,通过过表达EZH2作用后克隆形成能力得到恢复(P<0.05);同时经EdU检测提示卵巢癌SW626、SKOV3中miR-137抑制卵巢癌细胞的生长,通过EZH2过表达作用后可恢复卵巢癌细胞的生长能力.结论 miR-137高表达能够抑制卵巢癌细胞增殖,促进其凋亡,其可能的作用机制与miR-137下调EZH2表达水平有关.
关键词： 卵巢癌 miR-137 抑制作用 作用机制 zeste基因增强子同源物2 -
长链非编码RNA-UBC1对膀胱癌细胞生物学功能的影响
目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)-尿路上皮癌相关基因1(UBC1)对膀胱癌细胞增殖、凋亡和侵袭转移的作用及其可能的机制.方法 采用siRNA干扰技术沉默膀胱癌细胞系T24细胞的lncRNA-UBC1,设置阴性对照组,CCK-8检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭能力,Western blot印迹法检测与转移相关的基质金属蛋白2(MMP-2)与zeste基因增强子同源2(EZH2).结果 lncRNA-UBC1在T24细胞株中表达明显高于人胚胎膀胱组织来源细胞;与阴性对照组和空白对照组相比,沉默UBC1后,UBC1沉默组膀胱癌细胞增殖速率慢于对照组,UBC1沉默组膀胱癌细胞凋亡细胞比例高于阴性对照组[(18.72±7.79)％vs.(13.09±5.66)％,P＜o.05],UBC1沉默组细胞侵袭能力受到抑制,T24细胞MMP-2与EZH2表达降低.结论 沉默lncRNA-UBC1可抑制T24细胞增殖、凋亡及侵袭能力,其机制可能是通过MMP-2与EZH2途径.
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EZH2和Survivin在肝癌肝硬化和正常肝组织中的表达及其临床意义
目的:分析果蝇Zeste 基因增强子同源物2(EZH2) 和生存素(Survivin)在原发性肝细胞性肝癌(HCC)中的表达及其临床意义.方法:应用免疫组化S-P法检测HCC 50例、肝硬化30例、正常肝组织9例中EZH2、Survivin蛋白的表达.结果:HCC、肝硬化和正常肝组织的EZH2蛋白阳性表达率分别是88.00%、46.67%、33.33%,三者之间的差异有统计学意义;HCC、肝硬化和正常肝组织的Survivin蛋白阳性表达率分别是78.00%、30.00%、11.11%,三者之间的差异有统计学意义.结论:EZH2和Survivin异常表达与HCC的发展密切相关,在HCC的发展过程中起非常重要的作用; EZH2、Survivin在HCC中的表达关系密切,呈正相关.
关键词： 肝肿瘤/病理学 肝硬化/病理学 果蝇属 zeste基因增强子同源物2 生存素 -
Zeste基因增强子同源物基因2与肿瘤发展的研究进展
多聚梳抑制复合体2作为一种表观遗传调节因子可选择性催化组蛋白H3第27位赖氨酸三甲基化,从而诱导靶基因转录抑制.Zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)是多聚梳抑制复合体2中具有酶活性的亚基,在肿瘤触发、进展、转移及耐药性方面有重要作用.EZH2与其他表观遗传修饰酶相互协调介导基因沉默,EZH2超表达是多种实体肿瘤晚期和转移性的标志,EZH2的表达与活性受多种肿瘤相关转录因子的调节,各位点氨基酸残基的磷酸化状态可影响EZH2的催化活性,EZH2基因突变在血液系统恶性肿瘤中频繁发生,除通过经典作用即催化抑癌基因启动子区组蛋白H3第27位赖氨酸甲基化来抑制转录外,EZH2还具有诱导基因活化功能.因此,EZH2成为肿瘤治疗的一个理想靶点,其特异性抑制剂EPZ6438正处于临床Ⅰ/Ⅱ期试验阶段.
关键词： zeste基因增强子同源物2 多聚梳抑制复合体2 肿瘤 转录抑制 基因活化 -
多发性骨髓瘤患者原代细胞与U266细胞株zeste基因增强子同源物2表达升高的初步研究
目的 探讨多发性骨髓瘤(MM) U266细胞株和MM患者的骨髓单个核细胞(BMMNC)中DNA甲基化相关蛋白zeste基因增强子同源物2(EZH2)的表达,分析DNA甲基化与MM的关系.方法 选取MM U266细胞株及10例MM患者BMMNC(MM-BMMNC),同时选取10名健康人骨髓提取的单个核细胞(N-BMMNC).用Western blot法测定细胞EZH2的含量,以日的蛋白EZH2与内参照β-actin表达量的比值作为EZH2蛋白相对表达水平.结果 与10例N-BMMNC(0.2277±0.1306)比较,EZH2在U266细胞(0.9730 ±0.1029)和10例MM-BMMNC(0.9220±0.1301)中表达明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 EZH2在MM U266细胞株及MM-BMMNC中含量明显增多,EZH2与MM的发生和发展机制可能有密切联系.
关键词： 多发性骨髓瘤 DNA甲基化 zeste基因增强子同源物2
