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新的凋亡相关基因PDCD5在狼疮性肾炎患儿肾组织中的表达
为检测新的凋亡相关基因PDCD5在狼疮性肾炎患儿肾组织中的表达,分析其与肾组织细胞凋亡的关系,探讨PDCD5在狼疮性肾炎发病中的作用,用免疫组化及图象分析的方法,检测19例狼疮性肾炎患儿肾组织及9例对照肾组织中PDCD5的表达;同时16/19例狼疮性肾炎和6/9例对照肾组织标本运用原位末端标记法(TUNEL)检测肾组织中的细胞凋亡.结果显示:①在肾组织中可检测到PDCD5的表达,肾小管的表达量(0.20±0.02)强于肾小球的表达量(0.09±0.01,P<0.05);②在狼疮性肾炎患儿肾组织中,PDCD5在肾小管的表达量(0.13±0.01)强于肾小球的表达量(0.07±0.01,P<0.05),PDCD5在肾小球的表达与对照组相比差异无显著性,在肾小管的表达明显低于对照组(P<0.05);③狼疮性肾炎患儿肾组织中肾小球、肾小管的凋亡细胞数均明显高于对照组(P<0.05).本研究用免疫组化的方法首次检测了新的凋亡相关基因PDCD5在肾组织中的表达及分布;并发现在狼疮性肾炎患儿肾组织中PDCD5在肾小球的表达与对照组相比差异无显著性;在肾小管,虽然凋亡细胞数增加,但PDCD5的表达却下降.
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人骨肉瘤组织中PDCD5基因的表达及临床意义
目的 研究程序化死亡基因5(PDCD5)在正常骨及人骨肉瘤中的表达规律.方法 45例骨肉瘤新鲜标本.按刘氏分级法分为Ⅰ级(14例),Ⅱ级(18例),Ⅲ级(13例);免疫组织化学检测其PDCD5表达特征,并与18例良性骨瘤组织和30例正常对照骨组织进行比较.结果 46.67%的骨肉瘤组织、86.67%正常对照骨组织、88.89%良性骨瘤组织中PDCD5蛋白呈强阳性表达,骨肉瘤与良性骨瘤及正常骨组织相比差异有显著性(P<0.05).不同刘氏分级中骨肉瘤中强阳性表达比例分别为Ⅰ级85.7l%,Ⅱ级50%,Ⅲ级46.15%.结论 在正常骨组织、良性骨瘤、骨肉瘤组织中,PDCD5的表达出现明显差异.骨肉瘤的发牛及分级可能与促凋亡基因PDCD5的表达有关.
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凋亡相关基因PDCD5对前列腺癌细胞PC-3M-1E8促凋亡作用的研究
目的:观察外源性PDCD5对人雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3M-1E8的促凋亡作用.方法:扩增重组质粒PCI-neo-PDCD5,利用脂质体介导将其瞬时转染前列腺癌细胞PC-3M-1E8,RT-PCR检测转染后表达情况;撤除血清培养16 h后,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞存活率,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡指数,透射电子显微镜观察细胞形态.结果:MTT结果显示转染重组质粒组细胞较转染空载体和对照组细胞生长速度明显减慢,存活细胞明显减少(P＜0.001);通过TUNEL与透射电镜观察,发现转染组细胞凋亡程度和数量明显增加,凋亡指数较对照组明显增高(P＜0.001).结论:PDCD5在撤出血清因素的诱导作用下能显著抑制前列腺癌细胞PC-3M-1E8在体外的生长,明显促进其凋亡.
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PDCD5基因与非小细胞肺癌的研究进展
程序性细胞死亡分子5 (programmed cell death 5,PDCD5)作为一种重要的凋亡正调控分子,在许多疾病的发生发展过程中起着重要作用.PDCD5在肺癌、结直肠癌、卵巢癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤细胞株、患者血清及其肿瘤组织中均有表达水平下降,而在骨关节炎、狼疮性肾炎、支气管哮喘等自身免疫性疾病中表达上调.大量的临床实验研究涉及了PDCD5与非小细胞肺癌之间的关系,全文就目前PDCD5与非小细胞肺癌的研究进展作一综述.
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PDCD5和PCNA在肺癌患者血清中的表达
目的 研究程序化细胞死亡分子5(PDCD5)和细胞增殖抗原(PCNA)在肺癌患者血清中的表达及其意义.方法 选择肺癌患者60例作为观察组和同期体检健康者60例作为对照组.采用酶联免疫吸附法检测并比较两组血清中PDCD5、PCNA的水平,并探讨肺癌患者PDCD5、PCNA水平与临床病理特征的关系,并进行相关性分析.结果 观察组血清PDCD5水平明显低于对照组,而PCNA水平明显高于对照组(均P<0.01).病理分化程度为低分化、TNM分期为Ⅲ-Ⅳ期以及有淋巴结转移的肺癌患者血清PDCD5水平明显低于病理分化程度为中高分化、TNM分期为Ⅰ-Ⅱ期以及无淋巴结转移者,PCNA水平则相反(均P<0.01),两者呈负相关(r=-0.528,P<0.01).结论 肺癌患者血清中PDCD5水平存在明显低表达,而PCNA水平存在明显高表达,两项指标均与患者病理分化程度、TNM分期以及淋巴结转移密切相关,可能是肺癌临床诊断、治疗以及预后评估的新靶点.
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HIF-2α对PDCD5的调节及其对肝癌细胞凋亡影响的研究
目的 研究缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)在肝癌组织中的表达,探讨其对凋亡蛋白PDCD5及肝癌细胞凋亡的影响.方法 采用免疫组织化学染色法检测60例原发性肝癌及癌旁组织中HIF-2α的表达,分析HIF-2α的表达同肝癌临床参数的关系.MTT法检测肝癌细胞的增殖能力,Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡.Real-time PCR检测基因表达水平.Westem Blot检测蛋白表达水平.结果 HIF-2α在肝癌组织中的表达明显低于其在癌旁组织中的表达,且HIF-2d的异常表达和肝癌的大小呈负相关(P＜0.05).转染HIF-2α表达质粒后肝癌细胞中PDCD5表达水平升高(P＜0.05),肝癌细胞凋亡增加,干扰HIF-2α表达后肝癌细胞中PDCD5表达水平降低(P＜0.05),肝癌细胞凋亡减少.转染PDCD5表达载体后肝癌细胞凋亡增加.结论 HIF-2α在肝癌的低表达异常可能是肝癌发生、发展的推动因素之一;HIF-2α可通过上调PDCD5的表达促进肝癌细胞产生凋亡.
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PDCD5在人子宫内膜癌中的表达及对细胞凋亡的影响
目的 探讨PDCD5对子宫内膜癌细胞克隆形成,增殖以及凋亡的作用.方法 收集行手术切除的子宫内膜癌及对应癌旁组织共60例,采用qRT-PCR,western blot分别检测PDCD5 mRNA水平及蛋白水平在子宫内膜癌及对应癌旁组织中的表达情况,通过重组PDCD5(rhPDCD5)处理HEC1A子宫内膜癌细胞,检测其对细胞增殖、克隆形成及细胞凋亡的影响.结果 子宫内膜癌组织中PDCD5表达水平显著低于对应癌旁组织(P＜0.05);肿瘤组织中PDCD5低表达与病理分期、组织学分级、肌层浸润以及肿瘤淋巴结转移均具有显著相关性(P＜0.05);低表达PDCD5的患者总生存时间均显著缩短(P＜0.05);重组的PDCD5蛋白能够通过促进子宫内膜癌细胞凋亡抑制细胞增殖和克隆形成能力.结论 PDCD5在子宫内膜癌组织中低表达并与子宫内膜癌临床病理特征及不良预后显著相关,并能够通过促进子宫内膜癌细胞凋亡进而抑制细胞增殖及克隆形成,PDCD可能参与子宫内膜癌发生发展进程,并可作为早期诊断及预后评价的重要分子.
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乙肝后肝硬化Child-pugh分级与PDCD5表达水平的关系
目的:探讨乙肝后肝硬化Child-pugh分级与PDCD5表达水平的关系,为临床判断肝炎后肝硬化预后提供更为客观的、与临床实际相符的定量的检测方法,也为临床医生判断预后、确定治则,为肝硬化病人提供更为科学、可靠的判断依据.方法:根据乙肝后肝硬化中医辨证分型将病例组分为实证、虚实夹杂证及虚证3型,分别选取符合要求的乙肝后肝硬化患者各20例,及健康体检对照者20例,对纳入实验组病例进行整体评估:记录症状、体征,测定理化检查指标,用ELISA法测定所有血清标本的PDCD5吸光度值,分析和比较患者血清和正常血清中PDCD5的蛋白表达水平.结果:乙肝后肝硬化患者血清PDCD5浓度与健康对照组相比呈低水平表达(P＜0.01).其中虚实夹杂组和虚证组较实证组表达水平更低(P＜0.01),虚证组和虚实夹杂组之间无显著性差异(P＞0.05).Child-pughB级和C级与A级间血清PDCD5表达水平比较呈相对较低(P＜0.01),B级和C级之间无显著性差异(P＞0.05).结论:(1)乙肝后肝硬化中医辨证分型与Child-pugh肝功能分级对肝硬化病情的判断和预后有一定程度的对应关系;(2)乙肝后肝硬化患者血清PDCD5表达水平显著低于正常人,PDCD5是影响肝硬化细胞增殖与凋亡失衡的因素之一;(3)中医辨证分型在乙肝后肝硬化病情严重程度的判断上与PDCD5蛋白表达水平基本一致.
关键词： 乙肝后肝硬化 中医辨证分型 Child-Pugh PDCD5 -
PDCD5基因及其与肿瘤关系研究进展
PDCD5基因是一种新的重要凋亡相关基因,具有促进多种肿瘤细胞凋亡和抑制增殖的效应,其表达异常与肿瘤的形成及发展进程密切相关.较多证据表明,PDCD5在胃癌、肺癌、宫颈癌、骨关节病、白血病等疾病中的表达明显下降,且与其发生具有相关性.
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PDCD5在子宫内膜癌中的表达及临床意义
目的：检测程序性细胞死亡因子5（programmed cell death 5，PDCD5）在子宫内膜癌（Endometrial carcinoma ，EC）组织中的表达水平，结合临床资料，并分析其意义，初步探讨PDCD5的表达与子宫内膜癌发生的相关性。方法分别采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学法检测PDCD5 mRNA和蛋白的表达水平。结果子宫内膜癌中PDCD5 mRNA的表达明显低于对照组，且差异有统计学意义，P＜0.05。结果显示PDCD5的表达水平和EC患者的临床分期、组织学分级、肌层浸润以及有无淋巴结转移有相关性（P均＜0.05），而与子宫内膜癌患者的年龄未发现明显的关联性（P＞0.05）。结论 PDCD5；可能成为一种潜在的子宫内膜癌的早期诊断分子标记物。
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西拉普利对大鼠心肌梗死后细胞凋亡基因PDCD5表达的影响
目的: 探讨心肌梗死后凋亡基因PDCD5表达的变化及西拉普利治疗的影响.方法: 通过结扎雄性Wistar大鼠左冠状动脉前降支造成心肌梗死模型,心肌梗死24 h后随机分为2组:心肌梗死组(A组,n=15)和西拉普利组(B组,n=15),另设假手术组(C组,n=15).大鼠心肌梗死后1 d给予相应药物治疗,6周后检测心肌非梗死区心肌中Ang-Ⅱ的含量及细胞凋亡基因PDCD5mRNA的表达.结果:给药6周后A组心肌中Ang-Ⅱ含量、心肌细胞中PDCD5mRNA表达与B、C组相比显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);B组与C组相比,心肌中Ang-Ⅱ含量、心肌细胞中PDCD5mRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论:大鼠心肌梗死后心肌中Ang-Ⅱ的含量和心肌细胞中PDCD5mRNA表达表达显著升高,而西拉普利可以降低心肌中Ang-Ⅱ的含量和心肌细胞中PDCD5mRNA表达,但仍然明显高于假手术组.
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凋亡基因PDCD5及抗核抗体谱在自身免疫病中的表达
目的:通过检测PDCD5及抗核抗体谱在自身免疫性疾病中的表达.方法:应用酶联免疫吸附法(ELISA法)对117例自身免疫病患者及32例正常人外周血PDCD5表达和抗核抗体谱检测,观察二者在自身免疫性疾病中的相关性.结果:117例自身免疫性疾病患者抗核多肽抗体谱中,抗核抗体有不同程度的变化,SSA阳性率高,总阳性率为76.9％.在诊断为SLE的患者中SSA、SSA (R052)、dsDNA的阳性率较高,分别为81％、51％、51％.在SS患者中SSA、SSB的阳性率较高分别为88％、75％,健康对照组未检出抗核抗体.自身免疫患者与健康对照组外周血PDCD5含量比较显示对照组与SLE、RA、ITP、SS患者的PDCD5含量存在显著性差异(P＜0.05),且在SLE患者中PDCD5含量高.结论:自身免疫病患者PDCD5存在着异常表达,抗核抗体谱检测对自身免疫病有一定的提示作用.
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PDCD5蛋白联合米非司酮对前列腺癌细胞增殖及相关基因表达的影响
目的 观察PDCD5蛋白协同米非司酮(MIF)对前列腺癌细胞增殖及相关基因表达的影响.方法 MTT法分别检测10、20、50和100μmol/L MIF作用于PC-3M细胞24～96 h的吸光度(A)值.扩增包含PDCD5序列的真核表达载体PCI-neo-PDCD5,用脂质体介导的方法转染前列腺癌PC-3M细胞.在转染PDCD5的细胞中分别加入10、20 μmol/L MIF,继续培养24 h,MTT比色法检测细胞增殖,RT-PCR方法检测细胞增殖相关基因CyclinDl、Ki-67的表达.结果 MTT实验表明,与对照组相比,10 μmol/L MIF组的A值差异无统计学意义(P<0.05),20、50和100 μmol/L MIF组的A值显著降低(P<0.05),MIF对前列腺癌PC-3M细胞的抑制作用呈剂量依赖性;PDCD5真核表达载体成功转染PC-3M细胞并得到了瞬时表达,转染PCI-neo-PDCD5并加入MIF后,与对照组及单独应用MIF组相比,细胞增殖受到明显抑制(P<0.05),增殖相关基因CyclinD1、Ki-67表达降低.结论 PDCD5蛋白能够协同米非司酮抑制前列腺癌PC-3M细胞增殖,可能是通过调节某些增殖相关基因的表达来实现的,并有望成为前列腺癌的辅助治疗药物.
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大蒜素对人视网膜母细胞瘤细胞中PDCD5表达的影响
目的 探讨大蒜素对人视网膜母细胞瘤(Rb)细胞的抑制作用及其对程序化细胞死亡因子5(PDCD5)表达的影响.方法 分别用不同质量浓度的大蒜素、顺铂及大蒜素和顺铂联合处理人Rb细胞,在作用24、48、72 h后观察Rb细胞的形态,并应用免疫细胞化学法检测不同处理条件下各时间点PDCD5的表达情况.结果 人Rb细胞在不同质量浓度大蒜素、顺铂以及大蒜素和顺铂联合作用下,细胞生长受到抑制.不同质量浓度的大蒜素均可以上调人Rb细胞中PDCD5的表达.与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05).随着大蒜素作用时间的延长,PDCD5的表达依次上升.大蒜素(15μg/mL)和顺铂(3μg/mL)联合用药可增强对人Rb细胞的生长抑制,与单独用药比较,上调PDCD5表达的作用差异有统计学意义(P<0.05).结论 Rb细胞中存在与细胞凋亡有关的PDCD5蛋白低表达.大蒜素可抑制人Rb细胞的生长,且抑制作用具有时间和质量浓度依赖性.大蒜素和顺铂联合用药作用强于单独用药,可提高药物对肿瘤细胞的生长抑制.
关键词： 大蒜素 人视网膜母细胞瘤细胞 PDCD5 免疫细胞化学 -
白藜芦醇对人肾细胞癌786-0细胞周期、凋亡及PDCD5mRNA表达的影响
目的:探讨白藜芦醇(RES)对人肾细胞癌786-0细胞周期、凋亡及PDCD5 mRNA表达的影响.方法:取对数生长期的786-0细胞,用含25 μmol/L RES的培养基(实验组)培养24、48及72 h后,应用流式细胞术检测786-0细胞周期和凋亡情况,采用原位杂交技术检测细胞中PDCD5 mRNA的表达情况,均以不含RES的培养基作为空白对照.结果:25 μmol/L RES作用24 h后,实验组786-0细胞G1期及G2期比例显著下降,S期比例明显升高.经25 μmol/L RES处理24、48及72 h后,实验组786-0细胞凋亡细胞数(F组间=869.853,P<0.001)和PDCD5 mRNA的表达均高于空白对照组(F时间=10.067,P<0.001;F组间=649.629,P<0.001),差异有统计学意义.结论:RES可上调人肾细胞癌786-0细胞PDCD5 mRNA的表达,使786-0细胞阻滞在S期而诱导细胞凋亡.
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阿托伐他汀对大鼠心肌梗死后TNF-α、PDCD5表达的影响
目的:探讨心肌梗死后凋亡基因PDCD5表达的变化及阿托伐他汀对其表达的影响.方法:结扎雄性Wistar大鼠左冠状动脉前降支造成心肌梗死(MI)模型.取大鼠45只,其中30只MI后24 h随机分为MI组(n=15)和阿托伐他汀组(n=15);余15只作为假手术组.阿托伐他汀组术后每d灌胃阿托伐他汀1 mg/kg,余2组灌胃等量生理盐水.6周后检测左心室非梗死区心肌组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量、凋亡基因PDCD5 mRNA及其蛋白产物的表达.结果:6周后MI组、阿托伐他汀组和假手术组存活大鼠分别为10只、11只和14只.MI组非梗死区心肌组织TNF-α含量和PDCD5 mRNA及PDCD5蛋白表达高于假手术组(P均＜0.05);阿托伐他汀组上述指标的表达高于假手术组(P均＜0.05),但均低于MI组(P＜0.05).结论:阿托伐他汀可能通过降低大鼠MI后非梗死区心肌组织TNF-α的含量而降低非梗死区心肌组织中PDCD5 mRNA及其蛋白的表达.
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西拉普利对急性心肌梗死患者血管再通后血清中细胞凋亡基因PDCD5抗体水平及心功能的影响
目的:观察西拉普利对急性心肌梗死(AMI)患者血管再通后血清中细胞凋亡基因PDCD5抗体水平及心功能的影响.方法:急性前壁AMI患者38例血管再通后随机分为心肌梗死对照组(A组, n=19)和西拉普利治疗组(B组, n=19),另选健康人群作为正常对照组(C组, n=20).A组在血管再通后采用常规药物治疗4周,B组在常规药物治疗基础上加用西拉普利2.5 mg/d治疗4周,C组不用药物.4周后采用酶联免疫方法测定各组外周静脉血血清中PDCD5抗体水平,同时采用超声心动图测定左心室功能.结果:A组患者血清中PDCD5抗体水平高于B组和C组,而心功能低于B组和C组,差异均有统计学意义(P均＜0.05);B组患者血清中PDCD5抗体水平高于C组,而心功能低于C组,差异亦有统计学意义(P均＜0.05).结论:AMI患者血管再通后血清中PDCD5抗体水平升高,心功能降低;西拉普利治疗可降低血清中PDCD5抗体表达水平,改善心功能.
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慢性心力衰竭患者血浆中Apelin、PDCD5抗体水平的变化
目的:研究慢性心力衰竭(CHF)患者血浆Apelin水平的变化及其与PDCD5抗体和血压的关系.方法:用酶联免疫法检测40例CHF患者和20例健康对照者血浆Apelin和PDCD5抗体水平.结果:①心功能Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级患者血浆Apelin水平 较对照组降低,心功能Ⅲ级、Ⅳ级患者血浆Apelin水平均较心功能Ⅱ级组降低,差异有统计学意义(P<0.05);②CHF患者中高血压亚组血浆Apelin水平低于非高血压亚组,差异有统计学意义(P<0.05);③CHF患者中血浆PDCD5抗体水平随心功能级别升高而升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:CHF患者血浆Apelin、PDCD5抗体水平随心功能不同而改变.
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PDCD5蛋白与雄激素受体在人类前列腺癌组织中表达的相关性研究
目的:探讨PDCD5蛋白与雄激素受体(AR)在人类前列腺癌(PCa)组织中表达的相关性.方法:用EnVision法对29例PCa组织切片进行PDCD5及AR免疫组化染色,对其在PCa组织中表达的相关性进行统计学分析.结果:依据定性分析结果对PDCD5在AR(+)及AR(-)两组间PCa组织中的表达进行统计学分析显示两者间比较差异无统计学意义(P＞0.05),但PDCD5免疫组化染色定量分析提示PDCD5在PCa AR(+)组中表达明显强于AR(-)组(P＜0.01).结论:PDCD5在PCa AR(-)组中的表达要弱于AR(+)组,提示AR缺失可能导致或伴随PCa细胞凋亡的进一步下调,进而引起AIPC/HRPC的发生.
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胃癌组织中促凋亡因子PDCD5的表达及意义
目的 探讨PDCD5蛋白在胃癌及癌旁组织中表达的特点,并根据其与胃癌生物学行为之间的关系分析对胃癌诊断以及预后评估的意义.方法 采用免疫组织化学SP法检测50例胃癌及癌旁组织中PDCD5蛋白,以人工阅片评分以及Image-Pro Plus 6.0图像分析软件半定量分析两种方法判断其表达.结果 PDCD5蛋白在胃癌组织中的阳性表达率(22.0%)明显低于癌旁组织(76.0%),并且在胃癌组织中的阳性率与分化程度(P<0.01)、浸润度(P<0.05)、淋巴转移(P<0.05)相关.图像软件半定量分析结果显示PDCD5在胃癌组织中表达IOD为(8033.83±7719.14),显著低于癌旁组织(50224.35±39934.31),并且不同类型胃癌组织中IOD水平与分化程度、浸润度、淋巴转移相关之间存在显著相关性(P<0.01).结论 人工阅片评分及图像分析软件半定量分析两种方法结果一致,PDCD5蛋白低表达于胃癌组织,在不同分化程度、浸润度以及有无淋巴转移组间的表达都有显著差异.PDCD5蛋白低表达预示肿瘤有较强的侵袭性,可用于判断胃癌预后.
