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谷氨酰胺对慢性阻塞性肺疾病患者PBMC中p38MAPK及IL-8的影响
目的：探讨谷氨酰胺（Gln）对慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者外周血单个核细胞（PBMC）中p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）活性和白细胞介素‐8（IL‐8）表达的影响。方法选择32例COPD急性加重期（AECOPD）患者为研究对象，设为AECOPD组，将治疗后转为COPD稳定期（SCOPD）的上述患者设为SCOPD组，收集各组PBMC ，分别以Gln进行干预，另选择同期16例健康者为健康对照组。实时荧光定量PCR（RT‐PCR）法检测5组PBMC中p38MAPK、IL‐8的表达水平。结果（1）AE‐COPD和SCOPD的空白对照组中p38MAPK、IL‐8的表达均高于健康对照组（分别 P＜0．01，P＜0．05），且急性期高于稳定期（P＜0．05）。（2）AECOPD Gln组p38MAPK、IL‐8的表达低于AECOPD空白对照组（P＜0．01）；SCOPD Gln组p38MAPK、IL‐8的表达低于SCOPD空白对照组（P＜0．05）。结论 Gln可抑制COPD患者炎性细胞中p38MAPK通路的活化，并下调IL‐8的表达。
关键词： 肺疾病 慢性阻塞性 谷氨酰胺 p38丝裂原活化蛋白激酶 白细胞介素-8 -
阻断p38丝裂原活化蛋白激酶在细胞空泡形成中的作用
目的：探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）通路与细胞空泡形成的关系。方法应用茴香霉素、放线菌酮、p38MAPK抑制剂SB203580、JNK抑制剂SP600125处理HepG2、LM3、QBC939、Hela和A549细胞，光学显微镜和激光共聚焦显微镜观察细胞空泡化情况；Westernblot法检测p38MAPK等通路相关分子的表达水平；内质网红色荧光探针标记内质网，激光共聚焦显微镜观察内质网结构变化；溶酶体红色荧光探针标记溶酶体，激光共聚焦显微镜观察溶酶体荧光染色情况。结果（1）茴香霉素对HepG2细胞空泡有消除作用。（2）茴香霉素通过活化p38MAPK消除细胞空泡。（3）阻断p38MAPK诱导多种肿瘤细胞空泡形成。（4）阻断p38MAPK介导的空泡形成破坏内质网结构的整体性。（5）阻断p38MAPK介导的空泡形成具有可逆性。结论p38MAPK通路在调节细胞空泡形成中发挥了重要作用。
关键词： 细胞空泡 p38丝裂原活化蛋白激酶 内质网 SB203580 -
清燥救肺汤对乌拉坦诱导肺癌模型鼠TGF-β1、Smad2和p38MAPK的影响
目的:研究清燥救肺汤对乌拉坦诱导肺癌模型鼠TGF-β1、Smad2和p38 MAPK的影响.方法:选择清洁级KM小鼠,随机分为6组,即正常组、模型组、六味地黄丸4.6g/kg组、清燥救肺汤33.6g/kg、16.8g/kg、8.4g/kg组.除正常组外,其余各组小鼠腹腔注射乌拉坦800mg/kg,每周两次,连续五周,复制小鼠肺癌模型.给药与造模同时进行,1次/d,连续15周.清燥救肺汤33.6g/kg、16.8g/kg、8.4g/kg组、六味地黄丸4.6g/kg组分别给予等体积药物,正常组与模型组灌胃生理盐水.15周后,取肺脏检测.肉眼及镜下计数双肺小鼠肺肿瘤结节数,并计算小鼠肺肿瘤发生率;Western Blot测定肺组织TGF-β1、Smad2和p38 MAPK蛋白的表达;免疫组化检测肺组织TGF-β1、Smad2和p38 MAPK活性的表达.结果:清燥救肺汤(8.4、16.8、33.6g/kg)均能使肺肿瘤发生率从91.7％降至58.3～ 75.0％,平均肿瘤结节数从5降至3,明显降低肺癌模型鼠肺组织TGF-β1、Smad2和p38 MAPK蛋白的表达,并可使肺组织中TGF-β1、Smad2和p38 MAPK活性的表达也显著下降.结论:清燥救肺汤可能通过抑制TGF-β1、Smad2和p38 MAPK的过度表达,从而多靶点调控TGF-β1/Smad2及p38 MAPK等信号通路来实现延缓肺癌的发生发展及转移.
关键词： 清燥救肺汤 肺癌 转化生长因子β1 Smad2 p38丝裂原活化蛋白激酶 -
血管紧张素-(1-7)、血管紧张素Ⅱ和p38丝裂原活化蛋白激酶关系的研究进展
血管紧张素-(1-7)是肾素-血管紧张素系统家族中新发现的终末活性产物,与血管紧张素Ⅱ的多种作用相拮抗;血管紧张素Ⅱ可激活p38丝裂原活化蛋白激酶通路,介导炎症反应.现就血管紧张素-(1-7)、血管紧张素Ⅱ和p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路的关系进行简要综述.
关键词： 血管紧张素-(1-7) 血管紧张素Ⅱ p38丝裂原活化蛋白激酶 炎症 -
谷胱甘肽硫转移酶M5通过p38MAPK/NF-κB途径下调肿瘤坏死因子α介导的人支气管上皮细胞炎症水平
目的 探讨急性肺损伤炎症状态下谷胱甘肽硫转移酶M5(GSTM5)对人支气管上皮细胞16HBE炎症水平的影响及其可能的分子机制.方法 肿瘤坏死因子α(TNF-α;10 ng/mL)诱导16HBE,建立急性肺损伤细胞炎症模型,分组处理如下:空白对照组、TNF-α组(TNF-α)、GSTM5组(GSTM5+ TNF-α)、阴性对照组(阴性对照质粒+TNF-α).GSTM5组及阴性对照组分别采用脂质体Lipofectamine2000转染导入GSTM5-GFP质粒及阴性对照质粒;酶联免疫吸附试验检测各组细胞上清液中IL-6、IL-8、IL-10的含量,反转录聚合酶链反应检测NF-κB mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测NF-κB、P-NF-κB、p38、P-p38蛋白表达水平.结果 荧光显微镜检查证实成功构建GSTM5-GFP真核表达质粒并转染成功.TNF-α诱导后,细胞培养上清液中IL-6、IL-8、IL-10浓度较空白对照组升高(P＜0.05),GSTM5组细胞上清液中IL-6、IL-8、IL-10均较TNF-α组降低(P＜0.05),差异有统计学意义;同时,TNF-α刺激后各组细胞总NF-κB mRNA转录水平、NF-κB、p38磷酸化水平均较空白对照组增高(P＜0.05),而GSTM5组较TNF-α组与阴性对照组降低(P＜0.05).结论 过表达GSTM5可下调TNF-α诱导的人支气管上皮细胞16HBE炎症水平,其机制与GSTM5抑制p38MAPK、NF-κB磷酸化密切相关.
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增生性瘢痕中磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶和c-Jun蛋白的表达特征及其与瘢痕形成的关系
目的观察磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)和c-Jun蛋白在增生性瘢痕组织中的表达特征及其影响瘢痕形成和成熟的机制. 方法取16例住院的增生性瘢痕患者的瘢痕组织,并将其分为生长活跃期组(形成时间在1年以内,含1年者)、生长稳定期组,每组各8例;另取正常皮肤8例.所有取材均未经任何治疗.用免疫组织化学方法和常规病理技术检测磷酸化P38MAPK和c-Jun 两种蛋白,在增生性瘢痕组织和正常皮肤组织中的表达和分布规律. 结果正常皮肤组织中,磷酸化P38MAPK主要分布于表皮基底层细胞的胞浆和胞核内,c-Jun蛋白则主要定位于表皮细胞和内皮细胞中,两种蛋白的阳性细胞率分别为21.3%±3.6%和33.4%±3.5%.在处于生长活跃期的增生性瘢痕组织中,磷酸化P38MAPK和c-Jun的阳性信号主要定位于表皮细胞和部分成纤维细胞内,阳性细胞率分别上升至69.5%±3.3%和59.6%±4.3%,明显高于正常皮肤组织(P＜0.01);而在成熟稳定的增生性瘢痕中,两种蛋白表达有所下降,但仍高于正常皮肤组织. 结论增生性瘢痕的形成和成熟可能与激活P38MAPK信号传递通路,影响c-Jun蛋白表达有关.
关键词： 增生性瘢痕 p38丝裂原活化蛋白激酶 C-JUN蛋白 表达 -
芒果苷对心肌重塑作用及机制的研究进展
心肌重塑是心肌梗死及压力超负荷过程中的重要的病理变化之一,芒果苷作为一种自然形成的氧杂蒽酮对心肌梗死后引起的心肌重塑有广泛的治疗作用.芒果苷能防止心肌胶原蛋白的聚集,也能防止胞内纤维化过程从而减轻心肌梗死后的心肌重塑.其中,芒果苷对p38丝裂原活化蛋白激酶途径的抑制在其保护心肌作用中占有重要位置.p38丝裂原活化蛋白激酶途径的抑制很大程度上降低了肿瘤坏死因子α的水平,从而起到保护心脏的作用.同样,p38丝裂原活化蛋白激酶途径在压力超负荷疾病中也扮演了十分重要的角色.这在临床上可对心肌梗死及左心室超负荷疾病预后改善提供一种新的辅助治疗途径.
关键词： 芒果苷 心肌梗死 压力超负荷 p38丝裂原活化蛋白激酶 心肌重塑 -
牙髓卟啉单胞菌内毒素诱导成骨细胞表达炎症因子的信号通路研究
目的 检测细胞外信号调节激酶(ERK)1/2和p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂对牙髓卟啉单胞菌内毒素(LPS)诱导成骨细胞白细胞介素(IL)-1β mRNA和IL-6 mRNA的影响,探讨根尖周病变牙槽骨吸收的可能病理机制.方法 成骨细胞MG-63经PD98059和SB203580预处理1 h后,加入牙髓卟啉单胞菌LPS作用6 h,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL-1β mRNA和IL-6 mRNA的表达水平.结果 PD98059预处理后,牙髓卟啉单胞菌LPS诱导MG-63表达IL-1β mRNA的水平下降.SB203580预处理后,牙髓卟啉单胞菌LPS诱导MG-63表达IL-1β mRNA和IL-6 mRNA水平均下降.结论 牙髓卟啉单胞菌LPS诱导MG-63细胞表达IL-1β mRNA依赖ERK1/2和p38MAPK信号转导通路,表达IL-6 mRNA依赖p38MAPK信号转导通路.
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p38丝裂原活化蛋白激酶在溃疡性结肠炎中的作用
目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)在溃疡性结肠炎(UC)以及葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎中的作用.方法 ①7只Balb/c小鼠随机分为3组:正常对照组、DSS结肠炎组、p38MAPK选择性抑制剂SB203580干预组.结肠炎组小鼠每日饮用5％DSS溶液,干预组小鼠则在饮用5％DSS溶液72 h后,加用SB203580[1 mg/(kg·d)]进行腹腔注射.观察并记录各组小鼠的疾病活动指数(DAI)；7 d后处死小鼠,观察各组小鼠肠黏膜组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的表达.②收集36例活动性UC患者的肠黏膜组织标本,并以18例结肠癌旁的正常组织标本作对照,通过体外组织培养,观察SB203580对UC患者肠黏膜活检组织中TNF-α和IL-1β表达的影响.结果 ①DSS结肠炎小鼠的DAI评分、肠黏膜组织中TNF-α和IL-1β的水平明显升高(P均＜0.01),经SB203580干预后,其DAI评分、TNF-α、IL-1β的水平均明显降低,但仍然高于正常对照组(P均＜0.01).②体外组织培养结果显示,与未用SB203580处理的UC组比较,SB203580处理后UC患者肠黏膜组织中TNF-α和IL-1β的水平明显降低(P＜0.01).结论 SB203580能阻断p38MAPK信号转导通路,从而降低促炎性细胞因子TNF-α和IL-1β的释放.
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p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎大鼠结肠传输功能的影响
目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎大鼠肠道动力障碍中的作用.方法 34只Sprague-Dawley大鼠用随机数字表法随机分成4组:正常对照组(正常组,n=8),DSS模型组(DSS组,n=8),DSS+生理盐水(NS)组(DSS+NS组,n=9),DSS+SB203580干预组(SB203580组,n=9).除正常组外,所有大鼠每日饮用5％ DSS溶液,SB203580组大鼠在饮用5％DSS溶液72 h以后,每天予以SB203580(1 mg/kg体质量)进行腹腔注射,观察各组大鼠的疾病活动指数(DAI),以酚红法测定大鼠结肠传输功能.结果 ①DSS组和DSS+NS组大鼠的DAI评分明显高于正常组,SB203580组DAI评分明显降低,但仍然高于正常组(P＜0.05),DSS组和DSS+NS组之间差异无统计学意义(P＞0.05).②与正常对照组比较,DSS组和DSS+NS组大鼠的结肠传输功能明显延迟,经SB203580干预后,其结肠传输功能明显改善(P＜0.05),DSS组和DSS+NS组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SB203580能阻断p38MAPK信号转导通路,改善DSS诱导的结肠炎症,从而改善结肠传输功能.
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丹芪合剂对糖尿病大鼠肾小管p38MAPK表达的影响
目的: 观察丹芪合剂对糖尿病大鼠肾小管p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和纤维连接蛋白(FN)表达的影响,从而探讨其防治糖尿病肾病的机制.方法: 设立正常对照组(NG)、糖尿病组(DG)和糖尿病丹芪合剂治疗组(DQT),链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型,12周后测定大鼠血糖、血肌酐和24 h尿蛋白及肾脏指数;PAS染色观察肾脏病理变化;免疫组织化学方法检测肾小管p38MAPK和FN蛋白的表达;RT-PCR方法检测肾皮质p38MAPK mRNA的水平.结果: 与NG相比,DG大鼠血糖、血肌酐、24 h尿蛋白及肾脏指数均显著升高,肾小管上皮细胞p38MAPK蛋白及mRNA和FN蛋白表达明显增多,DQT除血糖外,血肌酐和24 h尿蛋白均显著下降,p38MAPK蛋白及mRNA和FN蛋白表达明显减少. 结论: 丹芪合剂可能通过抑制p38MAPK的表达而减少FN的分泌和沉积,延缓糖尿病肾小管间质损害的进程.
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阿魏酸钠对高糖诱导下原代系膜细胞增殖的影响
目的:探讨阿魏酸钠(SF)对高糖诱导下原代肾小球系膜细胞(GMC)增殖的作用及其机制.方法:原代培养肾小球系膜细胞,分为正常组、甘露醇组、高糖组、高糖加不同浓度SF组,分别于处理后24 h、48 h收集细胞.用4-甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;免疫细胞化学检测p53和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的表达.结果:48 h内,高糖促进GMC增殖并上调p38MAPK蛋白的表达,抑制p53的表达,SF能明显对抗高糖的这种作用,其作用随SF浓度的增加、作用时间的延长而加强.结论:SF可能是通过抑制p38MAPK通路,促进p53的合成,从而抑制高糖诱导的GMC增殖.
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MK2不同突变体的构建、表达及细胞内定位的研究
目的:为了研究MAPK激活蛋白激酶2 (MAPK-activated protein kinase 2, MK2)细胞内定位与其功能的关系,构建了MK2不同突变体的绿色荧光蛋白融合表达载体并观察这些突变体在细胞内的定位情况. 方法:将克隆在绿色荧光蛋白载体pEGFP-C2上的野生型MK2(WT)通过定点突变技术构建其无活性突变体MK2(320A)和活性突变体MK2(320E),转染NIH3T3细胞,并在荧光显微镜下观察其细胞内定位情况.结果:各种MK2不同突变体经测序鉴定正确后,在NIH3T3细胞中得到高量表达.融合蛋白发出的绿色荧光表明,在静息状态下,MK2(WT)主要分布于细胞核内,MK2(320E)主要分布于细胞质内,而MK2(320A)在细胞核和细胞质中都有分布.在受到紫外线(UV)刺激后,MK2(WT)和MK2(320A)移位出核,而MK2(320E)的细胞内定位则没有发生明显的改变.结论:成功构建了绿色荧光蛋白标记的MK2不同突变体并在真核细胞中进行了表达,观察到不同突变体对MK2细胞内定位的影响.
关键词： 蛋白激酶类 突变 基因表达 细胞内定位 p38丝裂原活化蛋白激酶 MAPK激活蛋白激酶2 -
益母草碱对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化IGF-1表达的影响研究
目的:探讨益母草碱对异丙肾上腺素(ISO)诱导的大鼠心肌纤维化胰岛素样生长因子-1(IGF-1)表达的影响.方法:10只SD大鼠作正常对照组;另80只SD大鼠作为实验鼠,连续2周腹腔注射ISO诱导心肌纤维化动物模型.造模成功后将实验鼠随机分为5组,模型组、益母草碱低剂量组(7.5mg·kg-1 d-1)、中剂量组(15 mg·kg-1d-1)、高剂量组(30 mg·kg-1 d-1)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂组(0.3 mg·kg-1d-1),连续给予相应药物腹腔注射2周后,分别以免疫组织化学法检测左心室肌IGF-1蛋白质的表达水平和酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清B型利钠肽(BNP)的含量.结果:与模型组比较,高剂量益母草碱能明显减少左心室肌IGF-1蛋白质的表达水平(P＜0.05)及血清BNP的含量(P＜0.05).结论:益母草碱(30 mg·kg-1 d-1)具有抑制ISO诱导大鼠心肌纤维化作用,其机制可能与减少左心室肌组织IGF-1蛋白质的表达及血清BNP的含量有关.
关键词： 益母草碱 心肌纤维化 胰岛素样生长因子-1 p38丝裂原活化蛋白激酶 -
脊髓背角大麻素受体2介导CP55940对CCI大鼠的镇痛作用
目的 观察脊髓背角大麻素受体2(CB2R)是否参与大麻素类药物CP55940对慢性坐骨神经缩窄性损伤(CCI)所致神经病理性疼痛的镇痛作用,并初步探讨其机制.方法 成年SD大鼠随机分为4组:对照组、CCI组(鞘内注射DMSO生理盐水)、CP55940+ CCI组(鞘内注射0.05 mg/kg CP55940)、AM630+ CP55940+ CCI组(鞘内注射10-8 mol/L AM630,20 min后再给予0.05 mg/kg CP55940).各组大鼠均于鞘内置管5d后行CCI术,术后连续14 d鞘内注射给药,每天1次;于CCI术前1d,术后第1、3、5、7、10、14天鞘内给药1h后测定热缩足潜伏期(TWL).分别于CCI术后第7天和第14天处死大鼠,取术侧L4～L6脊髓背角,采用免疫印迹技术检测脊髓背角CB2R及丝裂原活化蛋白激酶家族中p38(p38 MAPK)表达情况.结果 大鼠CCI术后即形成稳定的热痛敏,TWL明显缩短;鞘内给予非选择性CB受体激动剂CP55940(0.05mg/kg)可明显延长CCI大鼠TWL(P ＜0.05);选择性CB2受体拮抗剂AM630(10-8 mol/L)可部分阻断CP55940的镇痛效果(P＜0.05).免疫印迹实验结果显示,CCI术可导致术侧脊髓背角CB2R、p38表达增加(P＜0.01);鞘内给予CP55940可诱导CCI所致的CB2R表达进一步增加(P＜0.01),但明显降低CCI所致的p38表达增加(P＜0.01);预先鞘内注射CB2R拮抗剂AM630可阻断CP55940对CB2R及p38表达的影响(P＜0.01).结论 鞘内给予大麻素类药物CP55940对CCI所致的神经痛具有良好的镇痛效应,CB2R通过可能抑制脊髓背角胶质细胞p38的活性参与了CP55940的镇痛作用.
关键词： 神经病理性疼痛 CB2受体 脊髓背角 大麻素 p38丝裂原活化蛋白激酶 -
寻常型银屑病中P38MAPK信号通路的调控机制与中药的干预作用
在寻常型银屑病(psoriasis vulgaris)的发展过程中,p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路与其发病息息相关.一方面,应激刺激、促炎细胞因子、脂多糖等多种因素在上游诱导p38MAPK信号通路的激活;另一方面,被激活的p38MAPK信号通路通过诱导角质形成细胞增殖,促进炎症介质表达,干预细胞因子产生等途径参与寻常型银屑病的发病.中药通过多条途径对p38MAPK信号通路进行干预,其中包括抑制炎症介质的表达、调节磷酸化p38MAPK(phosphorylated p38MAPK,p-p38MAPK)的表达及减少血管内皮因子的表达等.
关键词： 寻常型银屑病 中药 p38丝裂原活化蛋白激酶 信号通路 -
P38MAPK调控重症急性胰腺炎大鼠海马神经元COX-2和PGE2表达的研究
目的:研究P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠海马神经元环氧合酶-2(COX-2)和前列腺素E2(PGE2)表达的调控作用.方法:雄性健康SD大鼠36只,体重220～260 g,随机分为3组.SAP模型组:采用向胰胆管内注入5％牛磺胆酸钠(2 mg/kg)的方法制备SAP动物模型;抑制剂组:SAP建模成功5 min后,大鼠尾静脉注射P38MAPK抑制剂SB203580(10 mg/kg);对照组:行剖腹术翻动胰腺和十二指肠后缝合腹腔.各组大鼠分别于术后24h,用Nissl染色和免疫组化法观察脑组织病理改变的情况,用Westem Blot检测脑组织中p-P38蛋白、COX-2和PGE2的表达情况.结果:模型组大鼠海马CA1区局部锥体细胞缺失,p-P38、COX-2和PGE2阳性细胞数明显增加(P＜0.01),且相应蛋白表达显著升高(P＜0.01);SB203580处理组以上变化明显减轻或不明显(P＜0.01).结论:P38 MAPK对实验SAP大鼠海马COX-2和PGE2表达具有显著调控作用,而P38MAPK抑制剂SB203580则对SAP大鼠海马神经元具有一定保护作用.
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高糖体外对视网膜色素上皮增生以及活性氧表达的影响
目的:研究高浓度葡萄糖对体外培养的视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞增生以及活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成的影响.方法:体外培养人RPE(ARPE-19),随机分成4组,即正常对照组用含5.6mmol/L葡萄糖的DMEM/F12培养液,高糖组用30mmol/L葡萄糖的DMEM/F12培养液,高糖+SB203580组用p38-MAPK特异性阻断剂SB203580 10μmol/L预处理 30min后,再用含30mmol/L葡萄糖的DMEM/F12培养液,甘露醇组(渗透压对照组)用含5.6mmol/L葡萄糖和24.4mmol/L甘露醇的DMEM/F12培养液.各组培养48h用MTT法检测各组视网膜色素上皮细胞的增生活力,用CM-H2DCFDA荧光染色检测RPE细胞中ROS的产生量.结果:与对照组相比,高糖培养人视网膜色素上皮细胞48h可以导致RPE细胞的损伤,抑制RPE细胞增殖,并使ROS生成增加,在一定程度上,与p38-MAPK途径的激活有关.结论:高糖培养ARPE-19可致细胞损伤,抑制增殖,并使ROS生成增加.
关键词： 高浓度葡萄糖 活性氧族 p38丝裂原活化蛋白激酶 视网膜色素上皮细胞 -
大鼠视神经损伤视网膜内P38丝裂原活化蛋白激酶活性的表达
目的:动态观察视神经损伤后视网膜中P38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)活性的表达变化和早期细胞凋亡情况.方法:制作大鼠视神经钳夹伤模型后设立对照组、假手术组和视神经夹伤组,应用免疫组化方法及流式细胞仪分别检测视神经损伤后1,6,12,24h;15,30d共6个时间点3组大鼠视网膜中磷酸化(活化)P38MAPK的表达和早期细胞凋亡率,同时对视网膜形态学改变进行观察.结果:视神经损伤诱导视网膜神经节细胞(RGC)严重丧失,损伤后1～15d RGC快速减少,15d后缓慢减少.在正常对照组、假手术组磷酸化P38MAPK表达阴性,视神经损伤后P38MAPK活性的表达于6h检测到表达,逐渐增加至24h阳性表达达高峰,15d表达下降,30d消失,具有统计学意义(P<0.01).视神经损伤后早期细胞凋亡率逐渐上升,24h达高8.9%,随后下降.结论:视神经不完全损伤刺激了大鼠视网膜中P38MAPK的活性表达,与早期细胞凋亡率变化相似.P38MAPK通路与视神经损伤诱导的大鼠视网膜RGC凋亡密切相关.
关键词： p38丝裂原活化蛋白激酶 视神经损伤 视网膜神经节细胞 细胞凋亡 -
白细胞介素-1β通过P38MAPK信号通路调节人牙周膜成纤维细胞MMP-1表达的研究
目的:探讨P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 mitogen-activated protein kinase,P38MAPK)信号通路在白细胞介素-1β(IL-1β)调节人牙周膜成纤维细胞中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)表达中的作用.方法:体外分离培养的人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs),随机将其分为:①对照组:加入等量无血清培养液;②实验组1:加入10ng/mL IL-1β作用24h;③实验组2:加入10μmol /L SB203580预处理30min后,再加入10ng/mL IL-1β作用24h,然后分别采用噻唑蓝比色测定法(MTT)检测各组hPDLFs的增殖情况;Real-time PCR、免疫荧光技术及Western blot观察MMP-1各组mRNA和蛋白表达的变化.结果:各组MMP-1mRNA和蛋白的表达均以IL-1β作用组高,IL-1β联合SB203580复合作用组次之,对照组低,3组间两两比较,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论:IL-1β可通过激活p38MAPK途径促进人牙周膜成纤维细胞MMP-1的表达.
