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通心络胶囊对糖尿病心肌病小鼠的心脏保护作用
目的 观察通心络胶囊调控p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinases,p38 MAPK)炎症信号通路对糖尿病心肌病小鼠防治作用.方法 KK/Upj-Ay小鼠40只随机分为模型组和通心络低、中、高剂量组,每组10只,另设C57BL/6小鼠10只作为对照组.各组给予相应药物,疗程为12周,观察体质量,测定空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、糖化血红蛋白(hemoglobinAlc,HbAlc)、甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、左心室指数;放射免疫法测定各组血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)含量;HE染色观察心肌组织病理变化;Westemblot法检测心肌组织p38 MAPK、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、细胞外信号调节激酶(extracellular-signal regulated kinase,ERK)总蛋白及磷酸化p38 MAPK、JNK、 ERK(p-p38 MAPK、p-JNK、p-ERK)的表达.结果 与对照组比较,模型组FBG、 HbAlc、TG、TC、左心室指数、TNF-α、IL-6及p-p38MAPK、p-JNK、p-ERK表达均显著增高,通心络胶囊能够减轻心肌组织病理损伤,降低TG、TC、TNF-α、 IL-6含量及p-p38MAPK、表达,而不影响体质量、FBG、HbAlc及p-JNK、p-ERK表达;且各组p38 MAPK、JNK、ERK总蛋白表达无统计学意义.结论 通心络胶囊可减轻糖尿病心肌病理损伤,改善心功能,其机制可能与降低p38 MAPK蛋白磷酸化水平,抑制炎症反应有关.
关键词： 通心络胶囊 糖尿病心肌病 p38丝裂原活化蛋白激酶 炎症 信号通路 -
退变兔腰椎间盘纤维环中丝裂原活化蛋白激酶的表达及意义
[目的]利用Western Blot法检测兔腰椎间盘退变动物模型和正常腰椎间盘纤维环组织中p38 MAPK的表达,探讨p38 MAPK在腰椎间盘退变过程中的作用.[方法]取清洁级新西兰大白兔20只,随机分为造模组和对照组,采用“异常应力负荷及椎间失稳法”造模；2个月后MRI检查论证造模是否成功；造模成功后取两组动物腰4、5纤维环检测p38 MAPK表达.[结果]造模组纤维环中p38 MAPK表达明显升高,和对照组比较具有显著差异(P＜0.05).[结论]兔退行性变椎间盘纤维环中p38 MAPK表达异常升高,表明p38 MAPK参与并促进了椎间盘组织纤维环的退变,如早期进行干预,有可能抑制椎间盘的退变.
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阻断p38MAPK信号通路对肝脏缺血再灌注损伤保护作用的机制研究
目的：探讨P38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）特异性活性抑制剂（FR167653）对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的机理。方法利用封闭群SD大鼠肝脏部分缺血再灌注模型，将实验动物分假手术组、对照组、治疗组。分别在各个时间点按照相应程序采集标本检测肝组织髓过氧化物酶（MPO）活性、免疫组化检测黏附分子表达及肝组织诱生型一氧化氮合酶iNOS mRNA表达测定。结果肝脏缺血再灌注损伤后，对照组肝脏组织中MPO活性增高，而治疗组肝脏组织MPO活性明显低于对照组（t分别=3.30、3.10、4.10、2.90，P均＜0.05）；同时在治疗组中炎性趋化因子的表达也较对照组明显减低（t分别=3.70、4.30、4.60、4.90、3.50、4.00，P均＜0.05）。免疫组化结果显示对照组肝组织内可见P-选择素（P-selectin）及细胞间黏附分子-1（ICAM-1）在肝组织中表达，而治疗组表达阳性率明显低于对照组；iNOS的mRNA表达水平在3 h和6 h时治疗组明显低于对照组（t分别=4.50、5.70，P均＜0.05）。结论 FR167653能在多个环节、多个层次对缺血再灌注肝脏起着保护作用。
关键词： p38丝裂原活化蛋白激酶 肝脏缺血再灌注损伤 -
谷氨酰胺对COPD患者外周血单个核细胞中p38MAPK、IL-8及IL-17影响的临床研究
目的 通过观察谷氨酰胺(Gln)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞(PBMC)中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)活性、IL-8及IL-17表达的影响,探讨Gln在COPD患者治疗中的抗炎作用机制.方法 将32例住院COPD急性加重期(AECOPD)患者设为AECOPD组,经治疗后转为稳定期(SCOPD)再设为SCOPD组.收集两组患者的PBMC,再平均分为加Gln干预的Gln组和不加Gln干预的空白对照组,另选择16例健康体检者为健康对照组.采用RT-PCR法检测各组PBMC中p38MAPK、IL-8及IL-17的表达水平.结果 (1)AECOPD和SCOPD的空白对照组中p38MAPK、IL-8及IL-17的表达均高于健康对照组(均P＜0.05),且急性期增高更加显著.(2)AECOPD的Gln组中p38MAPK、IL-8及IL-17的表达低于AECOPD空白对照组(均P＜0.01);SCOPD的Gln组中p38MAPK、IL-8及IL-17的表达低于SCOPD空白对照组(均P＜0.05).结论 Gln可抑制COPD患者炎症细胞中p38MAPK的活化并下调IL-8、IL-17的表达水平.
关键词： 慢性阻塞性肺疾病 谷氨酰胺 p38丝裂原活化蛋白激酶 白介素-8 白介素-17 -
趋化因子CCL22诱导肺癌细胞转移中ERK/p38MAPK蛋白的表达
目的 探讨趋化因子CCL22诱导肺癌细胞转移过程中ERK/p38MAPK蛋白的表达.方法 以100ng/ml的CCL22诱导肺癌细胞SBC-5后,采用细胞划痕试验和Transwell试验观察细胞迁移和侵袭能力的变化及加入蛋白激酶抑制剂U0126后细胞迁移和侵袭能力的变化.以Western blot法检测细胞中p-ERK和p-p38MAPK蛋白表达情况.结果 加入100ng/ml的CCL22后,对照组、CCL22组、混合组SBC-5细胞平均迁移距离分别为(112.6±27.2)、(351.9±16.4)、(145.1±29.6)μm,CCL22组细胞迁移距离明显大于对照组和混合组(均P＜0.05).对照组、CC L22组、混合组平均侵袭细胞数分别为(199.2±32.8)、(505.5±66.3)、(95.7±19.1)个,CCL22组显著高于对照组和混合组(均P＜0.05),而混合组明显低于对照组(P＜0.05).100ng/ml的CCL22诱导后,p-ERK和p-p38MAPK蛋白表达增加,U0126可减低以上蛋白的表达(P＜0.05).结论 ERK/p38MAPK蛋白激酶参与了趋化因子CCL22诱导的肺癌细胞迁移和侵袭.
关键词： 肺癌 趋化因子CCL22 细胞外信号调节激酶 p38丝裂原活化蛋白激酶 肿瘤转移 -
青蒿琥酯联合奥沙利铂诱导胃癌细胞凋亡及对p38MAPK和Caspase-3表达的影响
目的 观察青蒿琥酯联合奥沙利铂对胃癌细胞SGC-7901生长的抑制作用,并探讨其可能的机制.方法 应用光学显微镜观察青蒿琥酯联合奥沙利铂对胃癌细胞形态学变化的影响;噻唑氮蓝(MTT),吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双荧光染色法检测细胞活力及细胞凋亡情况;RT-PCR及Western blot检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)表达水平.结果 (1)青蒿琥酯及奥沙利铂单独作用胃癌细胞后,其生长均明显被抑制,抑制率具有浓度依赖性(P＜0.05).(2)青蒿琥酯联合奥沙利铂对胃癌细胞的抑制率优于青蒿琥酯或奥沙利铂单药使用,两者具有协同作用.(3)胃癌细胞的凋亡率随药物作用浓度增加而增加.(4)青蒿琥酯及青蒿琥酯联合奥沙利铂作用于胃癌细胞后p38MAPK、Caspase-3表达量均明显增加(均P＜0.05).结论 青蒿琥酯联合奥沙利铂能有效抑制胃癌细胞增殖,诱导其凋亡.其机制可能是通过p38MAPK通路诱导p38MAPK和Caspase-3表达增加终导致胃癌细胞凋亡有关.
关键词： 胃癌 凋亡 青蒿琥酯 p38丝裂原活化蛋白激酶 半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3 -
P38丝裂原活化蛋白激酶在肝纤维化中的作用
丝裂原活化蛋白激酶是生物体内重要的信号转导系统之一,在细胞的生长、发育、分化等方面发挥重要作用.P38丝裂原活化蛋白激酶是其中的重要一员.本文对近年来有关P38丝裂原活化蛋白激酶信号通路对肝星状细胞的调控作用及其在肝纤维化模型动物的表达进行了综述.
关键词： 肝纤维化 p38丝裂原活化蛋白激酶 肝星状细胞 -
阻断p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路对高糖培养肾小球系膜NF-κB信号通路调控影响
目的:探讨阻断p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated proteinkinases,p38MAPK)信号通路对高糖培养肾小球系膜NF-κB 信号通路调控影响.方法:大鼠系膜细胞株分别培养在正常糖浓度(5.5 mmol/L,对照组),高糖浓度(25 mmol/L,高糖组)及25 mmol/L葡萄糖+10 pmol/L p38 MAPK特异性抑制剂SB203580(SB组).CCK-8测定系膜细胞增殖;Phospho-ELISA法分别检测胞浆及胞核内p38MAPK,磷酸化p38 MAPK蛋白和总NF-κB p65、活性NF-κB p65,磷酸化NF-κB p65(S276)表达.结果:与正常对照组比较,高糖组系膜细胞出现增殖增加;胞浆及胞核内磷酸化p38MAPK蛋白表达上调;胞核内NLS-NF-κB,Ser276-NF-κB的表达增加;SB203580干预则能逆转这一变化.结论:阻断p38 MAPK信号通路能下调高糖培养的系膜细胞NF-κB信号通路的活化,进而抑制系膜细胞的异常增殖.
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非诺贝特及罗格列酮对高糖培养肾小球系膜细胞p38MAPK信号通路调控影响
目的:探讨非诺贝特及罗格列酮对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞(MC)p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号传导通路的影响.方法:大鼠系膜细胞分别培养在正常糖浓度(5.5 mmol/L)、高糖浓度(25 mmol/L)、25 mmol/L葡萄糖+非诺贝特(FB)100μmol/L及25 mmol/L葡萄糖+罗格列酮(RC)20μmol/L.EuSA法检测培养细胞上清液Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、纤维连接蛋白(FN);Phospho-ELISA法检测胞浆及胞核内p38MAPK和磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白的表达;以及RT-PCR法检测p38MAPK的mRNA的表达.结果:与正常对照组比较,高糖组MC合成基质蛋白Col-Ⅳ、FN增多;胞浆及胞核内p-p38MAPK的表达增加.非诺贝特及罗格列酮干预能使高糖培养系膜细胞合成Col-Ⅳ、FN显著减少,胞核内p-p38MAPK表达显著下调,但对胞浆内p-p38MAPK的表达则无显著影响.各组总p38MAPK蛋白水平及p38MAPK的mRNA表达则没有明显改变.结论:非诺贝特及罗格列酮能够显著下调高糖培养的MC核内p38MAPK信号传导通路的活化,进而减少胞外基质合成.
关键词： 非诺贝特 罗格列酮 肾小球系膜细胞 p38丝裂原活化蛋白激酶 糖尿病肾病 -
SB203580对大鼠再灌注损伤肺细胞凋亡的干预
目的:探讨P38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)特异性抑制剂SB203580对再灌注损伤肺细胞凋亡的影响.方法:30只SD大鼠随机分为3组:假手术对照(control,C)组,肺缺血/再灌注(I/R)组,肺缺血/再灌注+SB203580(S组);TUNEL法检测肺组织细胞凋亡的改变;免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达;电镜观察肺组织形态学改变.结果:I/R组与C组比较,Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达均明显上调(均P＜0.01),Bcl-2/Bax比值显著下降(P＜0.01),凋亡指数(AI)显著增高(P＜0.01),肺组织超微结构明显异常;使用SB203580后,Bcl-2蛋白表达上调(P＜0.01),Bax蛋白表达下调(P＜0.01),Bcl-2/Bax比值上升(P＜0.01),AI显著下降(P＜0.01),肺组织超微结构异常改变不同程度减轻.结论:SB203580可通过上调Bcl-2蛋白的表达、下调Bax蛋白的表达、调控Bcl-2/Bax蛋白之间的平衡而减轻细胞凋亡,对肺缺血/再灌注损伤发挥积极的防治作用.
关键词： 肺 再灌注损伤 SB203580 p38丝裂原活化蛋白激酶 细胞凋亡 -
参附注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤的防治作用
目的:观察参附注射液(shenfu injection,SF)对肾缺血再灌注损伤大鼠P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响,并探讨其肾脏保护作用的可能机理.方法:动物随机分为假手术对照组、缺血再灌注组、参附预处理组3组.免疫组化法检测肾组织P38MAPK、ICAM-1蛋白含量,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测肾组织和血浆TNF-α的表达.结果:缺血再灌注组P38MAPK、ICAM-1表达和TNF-α含量明显高于假手术对照组(P＜0.01).与缺血再灌注组相比,参附组P38MAPK、ICAM-1表达和TNF-α含量明显降低(P＜0.01).结论:SF可能通过抑制P38MAPK的表达,从而下调TNF-α、ICAM-1的表达,发挥其肾脏保护作用.
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CpG-ODN对新生大鼠缺血/缺氧性脑损伤的保护作用研究
目的 探讨Toll 样受体9(Toll-like receptor 9,TLR9) 激动剂——含CpG 基序的寡核苷酸(CpG-ODN)对新生大鼠缺血/缺氧性脑损伤的保护作用机制.方法 50只健康7日龄新生Wistar大鼠,♀♂不限,随机分为5组,假手术组、缺血/缺氧性脑损伤(HIBD)组、CpG-ODN低剂量组(0.35 mL·kg-1)、CpG-ODN中剂量组(1.40 mL·kg-1)、CpG-ODN高剂量组(5.60 mL·kg-1).术后48 h对大鼠神经功能进行评分,光学显微镜下观察脑组织病理学改变.免疫印迹法检测缺血/缺氧侧脑组织中磷酸化p38 MAPK、TLR9表达,酶联免疫吸附法检测TNF-α的表达.结果 CpG-ODN低、中剂量组较模型组神经行为学评分降低,病理学损伤减轻,而高剂量组较模型组神经行为学评分升高(P<0.05),病理学损伤加重;Western blot 分析结果表明,缺血/缺氧侧脑组织中磷酸p38 MAPK、TLR9蛋白表达逐渐上调,TNF-α在脑组织中含量逐渐升高(P<0.05).结论 TLR9激动剂CpG-ODN低、中剂量可改善新生大鼠脑缺血/缺氧损伤神经行为学评分及神经系统功能,减轻新生大鼠缺血/缺氧性脑损伤,其机制可能是通过适度激活p38 MAPK信号通路,并分泌适量TNF-α 发挥作用.
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乌司他丁通过干预p38 MAPK/ERK信号通路减轻脓毒症性肺损伤
目的探讨乌司他丁( ulinastatin,UTI)对脓毒症性急性呼吸窘迫综合征( acute respiratory distress syndrome, ARDS)大鼠的肺保护作用及可能机制。方法56只Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组、模型( LPS 6、12、24 h)组、乌司他丁( UTI 6、12、24 h)组,每组8只。采用腹腔注射细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS,10 mg·kg-1)的方法制备大鼠ARDS模型,乌司他丁组在左侧腹腔注射 LPS 后1 h后,在右侧腹腔注射乌司他丁20000 U · kg-1,对照组、注射同等剂量的生理盐水,各组大鼠在不同时间点留取肺组织及血浆标本。计算肺组织湿/干质量( W/D)比值；光镜下观察肺组织病理改变；用ELISA法检测各组血浆中肿瘤坏死因子-α( tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素-18( inter-leukin-18, IL-18)、肺表面活性物质A((surfactant protein A, SPA)含量,检测各组肺匀浆中丙二醛( malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶( superoxide Dismutase,SOD)和一氧化氮( nitric oxide, NO)含量；免疫组化法检测p38丝裂原活化蛋白激酶( mitogen activated protein kinase, p38MAPK)、细胞外信号调节蛋白激酶( extracellular-signal regulated protein kinase,ERK)蛋白表达情况；Western blot法检测肺组织中磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)及磷酸化ERK(p-ERK)蛋白表达的变化。结果光镜下观察对照组肺组织结构完整,肺泡腔清晰；LPS组肺泡壁增厚,渗出明显,肺组织出现损伤性变化,以12h组变化明显；UTI组各组病理改变较LPS组明显减轻。与对照组比较,LPS组W/D比值、血浆TNF-α、IL-18含量,肺匀浆MDA、NO含量均明显升高( P<0．05),而肺匀浆SOD含量明显降低；与 LPS 组比较, UTI 各组肺组织W/D比值、血浆 TNF-α、IL-18含量,肺匀浆 MDA含量均明显降低,而肺匀浆SOD含量明显增高,差异有统计学意义；免疫组化结果显示：与对照组比较,LPS 组 p38MAPK、ERK蛋白在胞质和胞核表达均明显增加,而UTI组较LPS组表达均明显减少；Western blot检测结果显示：与对照组比较,LPS组肺组织p-p38MAPK/ERK蛋白表达均明显增高,而UTI干预组蛋白表达均明显受抑制。结论乌司他丁通过干预p38MAPK/ERK信号通路、抗氧化作用而减轻炎症反应,发挥对LPS致脓毒性大鼠ARDS的保护作用。
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大黄素对高糖培养的GMC增殖、FN表达及p38MAPK的影响
目的 本研究旨在观察大黄素对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)的增殖与细胞外基质的主要成分--纤维连接蛋白(FN)表达的影响,观察大黄素对高糖培养的p38MAPK信号转导通路的影响,以探讨大黄素调节p38MAPK信号通路抗糖尿病肾脏纤维化的分子作用机制.方法 MTT比色法检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞周期分布;Western blot方法检测FN、p-p38MAPK蛋白表达情况.结果 高糖能够诱导大鼠GMC增殖、上调FN的表达以及促进p38MAPK活化,与正常培养组相比差异有统计学意义(P<0.05);大黄素可以抑制高糖诱导的大鼠GMC增殖、FN表达与p38MAPK活化,与高糖组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 大黄素抗糖尿病肾脏纤维化的作用可能与大黄素抑制p38MAPK信号通路密切相关.
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DATS通过p38MAPK通路抑制LPS诱导的小鼠MH-S细胞TNF-α及IL-1β表达
目的 探讨p38MAPK在二烯丙基三硫(DATS)抑制脂多糖(LPS)诱导小鼠肺泡巨噬细胞促炎细胞因子表达中的作用.方法体外培养MH-S细胞,用DATS和(或)LPS进行干预,Western blot检测细胞p38及磷酸化p38(p-p38)的表达;用LPS和(或)SB203580孵育细胞,反转录PCR检测细胞中TNF-α、IL-1β mRNA表达,Western blot检测细胞磷酸化(p-IκB)及非磷酸化IκB的表达.结果 LPS刺激MH-S细胞可导致p-p38表达增加,呈时间依赖性;用DATS(0.1、0.5、2.5、5.0 mg·L-1)预处理细胞30 min后再给予LPS刺激,p-p38表达呈剂量依赖性下降;单独DATS对p-p38表达无明显影响.p38特异性抑制剂SB203580可剂量依赖性地抑制LPS诱导的p-IκB蛋白、TNF-α及IL-1β mRNA表达.结论 DATS可通过抑制p38MAPK通路抑制IκB磷酸化及NF-κB活化,进而下调LPS诱导小鼠肺泡巨噬细胞TNF-α、IL-1β mRNA表达.
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CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型肝纤维化逆转与MAPK信号通路的研究
目的 通过检测CCl4诱导肝纤维化大鼠逆转恢复各时期MAPK信号通路蛋白动态变化,研究其在肝纤维化恢复期可能的调控作用.方法 采用CCl4皮下注射SD大鼠12周,复制肝纤维化模型,分别于注射12周,停药后2、4、6、8周取材.通过检测各组ALT、AST、Hyp、LN、PⅢNP的含量变化和肝脏病理组织切片Masson染色,加以验证.采用Western blot法检测各组肝组织中MAPK通路蛋白表达.结果 ALT、AST、Hyp、LN、PⅢNP等反映肝损伤和纤维化进程的指标在第12周高,即模型组高,并且随着肝纤维化逆转而含量逐渐降低,Masson染色结果与之一致,表明大鼠肝纤维化模型期与各恢复期模型建立完成.p-ERK1/2在模型组表达明显降低,与正常组相比差异有显著性(P<0.01),恢复4周表达明显升高,与模型组相比差异有显著性(P<0.01),以后逐渐降低.p-JNK1/2在模型组表达明显降低(P<0.01),恢复期逐渐升高(P<0.05).p-p38在模型组表达明显升高（P<0.01）,恢复期逐渐降低(<0.05）p-ERK/ERK与Hyp相关系数r=-0.46,P=0.003；p-JNK/JNK与Hyp相关系数r=-0.53,P=0.0004；p-p38/p38与Hyp相关系数r=0.81,P=0.0001.结论 MAPK信号通路中的ERK、JNK和p38信号通路在肝纤维化逆转中发挥重要作用.
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黄连素对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞FN及p38MAPK信号通路的影响
目的 研究黄连素对高糖培养下大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质成分纤维连接蛋白及p38MAPK信号通路的影响,进一步探讨黄连素抗糖尿病肾病的作用机制.方法 实验分组:正常对照组、甘露醇组、高糖组、高糖+SB203580组、高糖+黄连素低剂量组、高糖+黄连素高剂量组共6组,观察黄连素对高糖培养下的大鼠肾小球系膜细胞纤维连接蛋白以及p38MAPK信号通路蛋白表达的影响.结果 与高糖组相比,黄连素降低系膜细胞纤维连接蛋白的蛋白表达水平,抑制p38MAPK及其下游核转录因子CREB的磷酸化.结论 黄连素抗糖尿病肾病的作用可能与其减少细胞外基质成分FN的积聚,抑制p38MAPK信号通路激活密切相关.
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缬沙坦对高糖培养的肾小球系膜细胞p38 MAPK传导通路的影响
目的 探讨高糖状态下肾小球系膜细胞中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、其上游因子MAPK激酶3/6(MKK3/6)和下游因子cAMP反应元件结合蛋白1(CREB1)的表达以及血管紧张素受体1拮抗剂(AT1Ra)缬沙坦的影响.方法 体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分别给予高糖和缬沙坦干预,采用Western bolt检测MKK3/6、p38 MAPK和CREB1及其磷酸化蛋白的表达, 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测系膜细胞内TGF-β1和FN mRNA的表达.放免法测定细胞上清液中纤维连接蛋白(FN)和IV型胶原的含量.MTT法检测缬沙坦在不同时间、不同药物浓度对细胞增殖状态的影响.结果 ①与低糖对照组相比,高糖组系膜细胞p-p38 MAPK、p-MKK3/6和p-CREB1表达明显上调, TGF-β1和FN mRNA的表达增加,FN和IV型胶原含量增加.②缬沙坦组p-p38 MAPK、p-MKK3/6和p-CREB1的表达明显下调,TGF-β1和FN mRNA的表达降低,同时FN和IV型胶原的含量减少.③ MTT法检测显示不同浓度的缬沙坦对细胞增殖状态都有所抑制,并随药物浓度的增加而作用增强.结果 缬沙坦抑制肾小球系膜细胞TGF-β1的表达和细胞外基质的分泌可能部分是通过影响p38 MAPK传导通路的激活来实现的.
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扇贝多肽在中波紫外线诱导的HaCaT细胞凋亡中对p38MAPK-HSP27通路的影响
目的 从p38MAPK-HSP27通路方面研究扇贝多肽(polypeptide from Chlamys farreri,PCF)抑制中波紫外线(UVB)诱导的HaCaT细胞凋亡的作用机制.方法 复制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡模型;实验设计为6组:对照组、UVB模型组、UVB+5.69 mmol·L-1维生素C阳性对照组、UVB+5.69 mmol·L-1 PCF组、UVB+2.84 mmol·L-1 PCF组、UVB+1.42 mmol·L-1 PCF组.PCF预处理30 min,荧光染色(Hoechst 33258)结合琼脂糖凝胶电泳分析PCF在p38抑制剂(SB203580)存在和不存在两种条件下对UVB诱导的HaCaT细胞凋亡的影响;蛋白质印迹法检测p38 MAPK、HSP27的表达及磷酸化水平的改变,同时分析HSP27在细胞内定位的改变.结果 PCF可明显抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡;PCF在1.42～5.69 mmol·L-1范围内,可剂量依赖性抑制p38 MAPK和HSP27的磷酸化水平,并抑制HSP27由胞质向胞核中的移位.结论 PCF通过阻断p38 MAPK-HSP27通路来抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡,其作用机制与抑制p38 MAPK的活化从而阻止HSP27的磷酸化及其细胞内移位有关.
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脊髓p38MAPK在大鼠背根节慢性压迫神经病理性疼痛中的作用
目的 观察背根节慢性压迫(chronic compression of dorsal root ganglion,CCD) 痛大鼠脊髓p-p38MAPK表达的变化,探讨p38MAPK与慢性神经病理性痛的相关性.方法 ♂SD大鼠36只,随机分为正常组(Naive组,n=4)、假手术组(Sham组,n=16)和背根节慢性压迫组(CCD组,n=16),Sham组和CCD组又分别分为5,7,14 d和21 d 4个亚组(n=4),分别用免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠脊髓磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)表达的变化.结果 3组大鼠脊髓均见p-p38MAPK蛋白表达.Naive组和Sham组间比较差异无统计学意义.CCD组大鼠脊髓p-p38MAPK蛋白表达较Naive组和Sham组明显增多;与Sham组相比, CCD后5 ,7,14,21 d各组大鼠脊髓背角神经元胞质p-p38MAPK蛋白分别增加了138.1%(P＜0.01)、184.3%(P＜0.01)、247.4%(P＜0.01)和90.4%(P＜0.05).胞核p-p38MAPK蛋白分别增加了167.3%(P＜0.01)、177.8%(P＜0.01)、262.7%(P＜0.01)和72.7%(P＜0.05).结论 在CCD大鼠模型中,脊髓p38MAPK的活化与背根节慢性压迫致神经病理性痛的形成和发展存在密切联系.
关键词： p38丝裂原活化蛋白激酶 背根节慢性压迫 神经病理性痛 脊髓
